卵巢子宫内膜异位囊肿对体外受精-胚胎移植的影响

目的探讨卵巢子宫内膜异位囊肿对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的影响。方法对2002年1月至2006年12月在广州医学院第三附属医院行IVF-ET的120例(148周期)卵巢子宫内膜异位囊肿患者作回顾性分析。120例分别在降调节日和控制性超促排卵(COH)启动日行经阴道超声引导下卵巢子宫内膜异位囊肿穿刺术,将取卵日仍有卵巢子宫内膜异位囊肿患者46例(55周期)作为观察组,取卵日无卵巢子宫内膜异位囊肿患者74例(93周期)作为对照组。比较两组IVF-ET的结局。结果两组人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)水平、移植胚胎数相似;观察组受精率[(61.5±23.6)%]、妊娠率(34.5%)稍低于对照组[(69.2±25.0)%,36.6%],但差异无显著性意义(P>0.05);观察组获卵数[(8.3±5.2)个]、优质胚胎数[(4.9±3.8)个]明显低于对照组[(10.5±7.6)个,(7.2±4.3)个](P<0.05);促性腺激素(Gn)总量明显高于对照组(P<0.05),取卵时间明显长于对照组(P<0.05)。结论卵巢子宫内膜异位囊肿对IVF-ET有一定的不良影响,导致Gn用量增加,取卵时间延长,获卵数和优质胚胎数减少。     

胰岛素抵抗与妊高征

妊高征是孕产妇特有的以多脏器受损为特点的一种综合征。虽然首次报道距今已有 10 0余年 ,但至今仍是危害母婴健康的疾病之一。其原因主要是病因不清 ,缺乏有效的防治手段。本文就胰岛素抵抗的基本特性及其与妊高征的关系作一综述。1　胰岛素抵抗的定义及机制胰岛素抵抗 (Ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＩＳＲ)是指一定量的胰岛素 (Ｉｎｓｕｌｉｎ ,ＩＳ)产生的生物学效应低于预计正常水平。即ＩＳ在促进葡萄糖摄取和利用方面受损 ,机体为了维持正常的血糖水平 ,代偿性地分泌过多的ＩＳ ,于是就产生了高胰岛素血症[1] 。高胰岛素血症…     

孕晚期人未成熟卵母细胞的体外成熟:一种新的卵母细胞来源

目的 探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响.方法 共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC 633枚和DO 453枚.其中OCC分为孕晚期组、自然周期组和IVM周期组;DO分为孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组;孕晚期来源的未成熟卵母细胞分为OCC组和DO组.所有未成熟卵母细胞体外成熟后,ICSI受精序贯培养,除IVM周期组行胚胎移植外,其余均培养至囊胚阶段.分别比较OCC和DO各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组的囊胚形成率,统计IVM周期组的移植周期妊娠率;比较孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率.结果 OCC:孕晚期组、自然周期组及IVM周期组的体外成熟率分别为74.3%、76.9%和82.2%,孕晚期组与IVM周期组相比具有统计学差异;三组受精率、卵裂率相比,孕晚期组和自然周期组囊胚形成率相比均未见统计学差异,IVM周期组移植周期妊娠率为20%.DO:超促排卵周期组体外成熟率最高(86.0%),明显高于自然周期组(72.5%)和孕晚期组(72.7%),P<0.01;孕晚期组受精率、卵裂率、囊胚形成率分别为65.0%、83.3%和38.5%,与其他两组相比均亦未见统计学差异.孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差别.结论 孕晚期来源的未成熟卵母细胞在体外具有同样的发育潜能,孕晚期捐献的卵母细胞可作为一种供卵来源:有无颗粒细胞并不影响孕晚期卵母细胞的发育能力.

Abstract：

Objective To investigate the in vitro maturation of human oocytes (IVM)from pregnant late term,natural cycles and Gn stimulating cycles and the effect of granulose cells on IVM from pregnant late term.Methods A total of 1086 immature oocytes were obtained including 633 oocyte-cumulus complexes(OCCs)and 453 denuded oocytes(DOs).OCCs were divided into pregnant late term group,natural cycle group and IVM group,and DOs were divided into pregnant late term group,natural cycle group and controlled ovarian hyperstimulation(COH) group.All the oocytes were matured in IVM culture system and fertilized by ICSI.The embyos were cultured to blastcyst stage except that those in IVM group were transferred into the utems.The main outcomes were assessed including maturation rate(MR), fertilization rate(FR),cleaverage rate(CR),and blastulation rate(BR)(natural cycle group,pregnant late term group and COH group)and pregnancy rate per transfer cycle(PR) of IVM group.ReslIIts MR of OCCs in pregnant late term group,natural cycle group and COH group was 74.3%,76.9%and 82.2%,respectively,showing statistical difference between pregnant late term cycle group and IVM group.No statistical difference was observed in FR,CR or BR between the three groups.For IVM cycle group,clinical pregnancy rate of 20%per aspiration was achieved.For DOs,MR of COH group(86.0%)was significantly higher than that of the natural cycle group(72.5%)and pregnant late term group(72.7%) (P<0.01).FR,CR and BR showed no statistical difference among the 3 groups.No difference was found in MR,FR,CR and BR between OCCs group and DOs group from pregnant late term.Conclusions The oocytes from pregnant late term have the same development potential as those from natural cycles or Gn stimulating cycles in vitro,and provide a new source of donor oocytes.Granulose ceils do not affect the IVM from pregnant late term.     

溶酶体组织蛋白酶L对人宫颈癌细胞HeLa迁移及侵袭能力的影响

目的 探讨溶酶体组织蛋白酶L(Cathepsin L)是否通过上皮-间充质转化(EMT)影响宫颈癌细胞的侵袭及迁移能力.方法 利用荧光定量PCR来检测人宫颈癌细胞HeLa、CaSki以及HeLa229中Cathepsin L的表达水平;设计并合成靶向Cathepsin L的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染Cathepsin L表达最高的宫颈癌细胞HeLa以构建稳定低表达Cathepsin L细胞株,通过Western blot和定量PCR来验证shRNA的干扰效率,拟将Cathepsin L-shRNA和空白对照载体转染HeLa细胞,并将构建好的稳定细胞株命名为HeLa/shRNA,空白组和对照组分别为HeLa和HeLa/Con.通过Transwell法检测干扰后细胞的迁移及侵袭能力,Western blot法检测EMT相关指标E-cadherin和N-cadherin以及其上游信号分子Snail、WNT-5a的变化.结果 Cathepsin L-shRNA转染后,能够有效抑制HeLa细胞中Cathepsin L的表达;Transwell法检测结果显示,Cathepsin L干扰组细胞侵袭及迁移能力显著低于阴性对照组(P ＜0.001).Western blot法检测结果发现,Cathepsin L干扰组细胞的E-cadherin表达增加,N-cadherin的表达降低;此外,Cathepsin L干扰组细胞的Snail、WNT-5a表达较对照组显著下降.结论 运用RNA干扰技术能够有效沉默HeLa细胞的Cathepsin L基因,并诱导其迁移侵袭能力的下降,其可能的机制是通过调节EMT的上游信号分子Snail、WNT-5a的表达来调控EMT,从而影响宫颈癌细胞的迁移及侵袭.提示Cathepsin L在宫颈癌的发生发展中起重要作用,抑制Cathepsin L的表达可能成为一种治疗宫颈癌的新方法.     

乙肝病毒S蛋白诱导人精子凋亡的分子机制

目的： 探讨乙肝病毒S蛋白(HBs)诱导人精子凋亡的分子机制。方法：人精子与不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞内半胱氨酸蛋白酶-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)活化,用TUNEL结合流式细胞术检测精子DNA的损伤。结果：人精子与25~100 μg/mL HBs共孵育3 h后,Annexin V-FITC＋/PI－精子,Caspase-3、-8、-9阳性精子,TUNEL阳性精子的比率均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且均呈剂量依赖趋势。结论：25~100 μg/mL HBs可诱发人精子胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,胞内Caspase-3、-8、-9激活和DNA损伤,从而致使人精子凋亡以影响精子的功能。     

乙肝病毒S蛋白对人精子氧化应激的影响

目的:乙肝病毒(HBV)可通过血睾屏障将病毒DNA整合到男性生殖细胞的基因组中,诱发多种染色体畸变,而且还能破坏精子线粒体功能,导致精子活力受损,受精率和受精指数下降,但其机制未明。本研究主要考察乙肝病毒S蛋白(HBs)对人精子氧化应激的影响。方法:人精子与不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)HBs共孵育3 h后,用流式细胞术检测精子内活性氧(ROS)的变化情况,应用酶标仪检测精子细胞内丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(TAC)。结果:人精子与25~100 μg/mL HBs共孵育3 h后,ROS阳性精子比率、人精子细胞膜MDA水平显著高于对照组,而TAC 水平显著低于对照组(P<0.05或0.01)。MDA水平以及ROS阳性精子比率的升高与HBs呈剂量依赖关系(r0.62,r0.75;P均<0.01)。TAC水平的降低与HBs呈剂量依赖关系(r-0.89;P<0.01)。结论:HBs可诱导人精子内ROS升高、TAC降低,从而产生氧化应激,使细胞膜脂质过氧化进而影响人精子的功能。     

长方案超排卵获卵数对胞浆内单精子注射治疗结局的影响

目的：比较常规长方案超排卵周期中,获取不同卵母细胞数对胞浆内单精子注射（ICSI）治疗结局的影响。方法：回顾分析广州医科大学附属第三医院生殖医学中心2007年1月—2013年6月因单纯男性因素采用常规长方案超排卵行ICSI治疗的患者资料。根据获卵数目分成4组,获卵数≤4个为G1组（90个周期）,获卵数5~10个为G2组（368个周期）,获卵数11～20个为G3组（449个周期）,获卵数≥21个为G4组（135个周期）。结果：在ICSI治疗中,G1组女方平均年龄高于其他3组（P＜0.01）,但其中＜35岁的患者占57.8%。G1组患者完全受精失败发生率、G4组的卵巢过度刺激综合征（OHSS）发生率以及这2组的移植周期取消率均高于G2组和G3组（P＜0.01）;G1组的临床妊娠率在4组中最低（31.3%,P＜0.05）;4组中G3组的临床妊娠率、胚胎种植率和移植胚胎活产率最高,且后两者差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：在ICSI治疗周期中,获卵数≤4个影响ICSI受精结局,完全受精失败发生率升高;获卵数在11～20个时ICSI临床结局最好。     

补佳乐联合复方氨维胶囊对薄型子宫内膜不孕症者妊娠结局的改善

目的:探讨补佳乐联合复方氨维胶囊对子宫内膜厚度及妊娠率的影响。方法:经B超监测有排卵发生但子宫内膜厚度<7 mm的不孕患者,随机分为补佳乐组(月经第7日给予补佳乐至排卵后2周)、氨基酸组(以复方氨维胶囊代替补佳乐)及联合用药(同时服用补佳乐和复方氨维胶囊)组,观察内膜生长情况及妊娠率。结果:共纳入患者142例,补佳乐组46例,氨基酸组48例,联合用药组48例,3组患者用药后子宫内膜厚度均较服药前增加(6.11±0.62 mmvs 8.03±1.34 mm、6.09±0.57 mm vs 7.94±1.28 mm、6.08±0.76 mm vs 8.93±1.47 mm),差异均显著(P<0.05)。联合用药组服药前、后的子宫内膜增加幅度及妊娠率均高于补佳乐组及氨基酸组,差异显著(P<0.05)。结论:复方氨维胶囊联合补佳乐可一定程度提高子宫内膜厚度,有助于胚胎着床,增加妊娠率,从而改善妊娠结局。     

体外受精和卵胞浆单精子注射完全受精失败的临床因素分析

【目的】 分析体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗中完全受精失败(TFF)发生的临床原因?【方法】收集本中心2007年1月至2011年5月间辅助生殖治疗数据,分IVF组(5778例)?half-ICSI组(146例)?ICSI组(821例)和PESA-ICSI组(274例)进行?字2 检验?t-检验和Logistic回归分析等统计分析,并对部分ICSI完全受精失败卵母细胞进行免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜观察?【结果】 IVF组和ICSI组TFF发生率分别为2.1% 和2.3%(P > 0.05);half-ICSI组IVF部分TFF发生率为21.9%,显著高于其他各组(P < 0.01)?除half-ICSI组,其他各组中获成熟卵数≤3的患者TFF发生率高于获成熟卵数 > 3患者(P < 0.01)?单纯畸精子症对IVF和ICSI治疗周期受精结果的影响无统计学意义(P > 0.05),且前次IVF受精失败不影响再次ICSI的受精结局(P > 0.05),但少精和弱精是辅助生殖治疗周期受精失败的高危影响因素(P < 0.05)?【结论】 低获卵数是辅助生殖治疗中完全受精失败的高危因素,获取适当数目成熟卵母细胞是治疗成功的关键; 畸精子症对IVF或ICSI的受精结局无显著影响;ICSI治疗是前次IVF治疗完全受精失败患者的首选?