产肠毒素大肠杆菌定居因子Ⅰ基因克隆与表达

目的：在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌（Enterotoxigenio eseheriehia coli,ETEC）定居因子CFA／Ⅰ,检测重组表达的ETECCFA／Ⅰ。方法：以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA／1重组载体,表达产物用SDS—PAGE鉴定,免疫原性实验验证。结果：成功构建了pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性。结论：CFA／Ⅰ基因的成功克隆为今后的ETECCFA／Ⅰ候选疫苗研制奠定了基础。     

产肠毒素大肠杆菌定居因子I基因克隆与表达

目的:在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenio escherichia coli,ETEC)定居因子CFA/I,检测重组表达的ETEC CFA/I.方法:以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA/I重组载体,表达产物用SDS-PAGE鉴定,免疫原性实验验证.结果:成功构建了pBV220-CFA/I重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性.结论:CFA/I基因的成功克隆为今后的ETEC CFA/I候选疫苗研制奠定了基础.     

弱精不育与正常精子蛋白质的双向电泳研究

目的:检测人类正常精子与弱精不育精子的差异表达蛋白质。方法:用2-DE-IPG-DALT技术对36例弱精不育与10例正常精子总蛋白进行分离,银染后,切取2个在患者中不表达的差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:成功建立了弱精不育与正常精子总蛋白的双向电泳图谱,经图像分析显示,弱精不育精子中高丰度表达而正常样本中缺失或表达下调的27个蛋白点,正常精子中存在而在弱精不育精子中缺失或低表达的37个点。并对C35和C37这2个差异蛋白质进行了质谱鉴定。结论:差异蛋白与弱精不育相关。