重症中暑对大鼠心肌肾素-血管紧张素系统的影响

目的：探讨重症中暑对大鼠心肌肾素-血管紧张素系统的影响。方法选用雄性Wistar大鼠24只,应用随机数表法将大鼠分为正常对照组、热打击后2 h组、热打击后24 h组,每组8只。采用放射免疫法测定大鼠血浆和心肌肾素及血管紧张素Ⅱ活性,采用免疫组化法测定心肌血管紧张素Ⅱ-1、2型受体(AT1R、AT2R)蛋白表达水平。结果大鼠热打击后60 min左右肛温达到42℃,77 min左右平均动脉压下降25 mmHg,此时即重症中暑造模成功。热打击后2 h及24 h组大鼠血浆和心肌肾素-血管紧张素系统显著激活[血浆RA：(2237.0±173.2)、(1498.0±172.3) vs (785.4±43.2),P<0.05;血浆AngⅡ：(143.4±19.8)、(76.8±21.6) vs (42.8±8.6),P<0.05;心肌RA：(10.63±0.59)、(8.49±0.92) vs (1.66±0.38) P<0.05;心肌AngⅡ：(279.9±11.3)、（212.5±10.1) vs (39.6±6.3) P<0.05];热打击后24 h组大鼠血浆和心肌肾素-血管紧张素系统仍处于激活水平,但较热打击后2 h组明显下降[血浆RA：(2237.0±173.2) vs (1498.0±172.3),P<0.05;血浆AngⅡ：(143.4±19.8) vs (76.8±21.6),P<0.05;心肌RA：(10.63±0.59) vs (8.49±0.92),P<0.05;心肌AngⅡ：(79.9±11.3) vs (212.5±10.1),P<0.05]。热打击后2 h及24 h组心肌AT1R蛋白表达明显上调[(49.8±14.1)、(52.6±15.8) vs (13.0±5.0),P<0.05];热打击对AT2R蛋白表达无影响[(14.1±6.2)、(16.8±7.3) vs (9.8±4.5),P>0.05]。结论重症中暑早期能够导致大鼠心肌肾素-血管紧张素系统显著激活。     

改良婴幼儿孤独症量表和婴幼儿孤独症量表-23在孤独症谱系障碍早期筛查中的临床适应性比较

目的:比较改良婴幼儿孤独症量表(M-CHAT)和婴幼儿孤独症量表-23(CHAT-23)对孤独症谱系障碍(ASD)早期筛查的临床适用性。方法:分别采用M-CHAT和CHAT-23对符合《精神障碍诊断和统计手册》第5版(DSM-5) ASD诊断标准的54例18～30月龄的患儿(ASD组)及54名性别、年龄相匹配的正常儿童(对照组)进行评估和比较。结果:①ASD组:M-CHAT筛查阳性53例,阴性1例;CHAT-23筛查阳性50例,阴性4例;②对照组:M-CHAT筛查阳性3例,阴性51例; CHAT-23筛查阳性2例,阴性52例。ASD组M-CHAT与CHAT-23筛查灵敏度分别为98. 1%及92. 6%,特异度分别为94. 4%及96. 3%,两量表间差异无统计学意义; M-CHAT与CHAT-23筛查阳性率在18～24个月和25～30个月两个年龄组比较差异无统计学意义。结论:应用M-CHAT和CHAT-23进行ASD早期筛查均具有很高的灵敏度和特异度,并适合用于18～30个月龄的儿童。     

依拉普利对大鼠气道粘液高分泌的干预作用

目的 本研究观察依拉普利对吸入丙烯醛诱导的大鼠气道粘液高分泌的作用,并探讨其可能的机制.方法 24只SD大鼠随机分为4组(n=6):[1]对照组;[2]依拉普利自身对照组;[3]模型组;[4]依拉普利干预组.于21d处死大鼠,采集标本.采用HE染色和阿辛兰-过碘酸雪夫染色(AB-PAS)的组织学检查;免疫组化检测气管和肺内气道的Muc5ac、肺内血管紧张素Ⅱ、肺内气道的核转录因于NF-kB.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测肺内气道Muc5acmRNA.结果 模型组肺内AngⅡ的表达、气管和肺内气道的Muc5sc的表达,肺组织Muc5acmRNA、NF-kB入核率明显高于空白对照组和依拉普利干预组,差异均有统计学意义.AB-PAS染色得到与免疫组化相似的结果 .结论 丙烯醛刺激可以增加大鼠肺内AngⅡ的表达;增加Muc5ac的表达;也可以增加气道上皮的AB-PAS染色的面积百分比,增加NF-kB入核率.应用依拉普利干预后可抑制上述改变.本研究结果 表明依拉普利具有抑制气遭粘液高分泌的作用,其机制可能与核转录因子NF-kB的活化有关.     

体外早期培养兔脂肪源性间充质细胞的增殖能力

背景：最新研究表明人脂肪源性间充质细胞的表面标志分子及分化能力会随着培养时间的延长而有所改变。 目的：观察体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞形态学特点及集落形成能力。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-01/03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和中心实验室完成。 材料：3月龄雌性新西兰大白兔9只，由上海市银根养兔室提供。 方法：兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪，I型胶原酶消化法获得原代细胞，接种至含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液中，细胞达80%融合时传代，取第2，3，4代细胞用于实验。 主要观察指标：倒置显微镜观察细胞形态，流式细胞仪分析细胞表型，计数细胞集落形成率。 结果：第2，3，4代兔脂肪源性间充质细胞均呈成纤维细胞样生长，体外生长迅速，CD29及PCNA均呈阳性表达，集落形成率分别为（8.0±0.6）%，（6.7±0.4）%，（4.6±0.5）%，经方差分析差异有显著性意义（F=12.18，P < 0.05）。 结论：体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞生长增殖旺盛，集落形成能力随着传代次数增加呈显著下降趋势。     

ERK1/2与实验性慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道平涌肌增殖的分子机制研究

目的:探讨ERK1/2信号在烟熏实验性慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑平滑肌增殖的分子机制.方法:取大鼠模型肺组织分别提取RNA、蛋白以及行组织病理学检查.RT-PCR检测TGF-β1、ET-1条带;Masson染色检测各组支气管管腔的内周长(Pi)、平滑肌层面积(WAm)、支气管壁面积(WAt);Western Blot检测各组标本TGF-β1、ET-1、ERK1/2和P-ERK1/2.结果:烟熏2周后气道平滑肌层和支气管壁厚度较健康对照组和U0126对照组明显增厚(P<0.05),TGF-β1、ET-1以及ERK1/2蛋白磷酸化表达均增加,予U0126干预后,气道平滑肌增殖和支气管壁厚度逐渐减轻,ERK1/2蛋白磷酸化受到抑制,呈剂量依赖性.结论:烟熏可以刺激大鼠气道平滑肌慢性炎症和平滑肌增殖,ERK1/2是COPD气道平滑肌增殖信号传导的主要途径.TGF-β1参与了ERK1/2信号系统对气道重塑平滑肌增殖的调控.MEK<,1>的特异性阻断剂U0126能有效干预COPD气道平滑肌细胞增殖的分子信号调节.     

铜绿假单胞菌对环丙沙星耐药与喹诺酮类耐药基因的关系研究

目的:探讨喹诺酮耐药(QNR)基因介导的铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药性。方法:用K-B纸片法测定30株铜绿假单胞菌对环丙沙星、庆大霉素、哌拉西林、头孢噻肟4种抗菌药物的敏感性。PCR法检测(QNR)基因。结果:铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药率为26.70%,1株环丙沙星耐药性铜绿假单胞菌携带有QNR基因。结论:铜绿假单胞菌对环丙沙星的耐药性与QNR基因有密切相关性。     

噻托溴铵治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的疗效评价

噻托溴铵是新一代治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的吸入型长效抗胆碱药物,通过选择性作用于M1和M3受体,扩张支气管,疗效持续,每天只需使用一次.UPLIFT研究结果进一步证实,长期规律使用噻托溴铵能够改善中重度、极重度稳定期COPD患者肺功能情况,缓解症状、提高运动耐量及改善生活质量,延长急性发作的时间间隔、减少急性加重发作次数,降低COPD患者死亡率,具有良好的安全性.     

体外早期培养免脂肪源性间充质细胞的增殖能力

背景:最新研究表明人脂肪源性间充质细胞的表面标志分子及分化能力会随着培养时间的延长而有所改变.目的:观察体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞形态学特点及集落形成能力.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/03在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和中心实验室完成.材料:3月龄雌性新西兰大白兔9只,由上海市银根养兔室提供.方法:兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,Ⅰ型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第2,3,4代细胞用于实验.主要观察指标:倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型,计数细胞集落形成率.结果:第2,3,4代兔脂肪源性问充质细胞均争成纤维细胞样生长,体外生长迅速,CD29及PCNA均呈阳性表达,集落形成率分别为(8.0±0.6)%. (6.7±0.4)%. (4.6±0.5)%,经方差分析差异有显著性意义(F=12.18,P<0.05).结论:体外早期培养的兔脂肪源性间充质细胞生长增殖旺盛,集落形成能力随着传代次数增加呈显著下降趋势.     

血清C反应蛋白在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者痰中病原学的预测价值研究

目的探讨血清C反应蛋白(CRP)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者痰中病原学的预测价值。方法选择2010—2011年在我院住院的112例AECOPD患者,采用ELISA法进行血清CRP的检测,进行痰或诱导痰细菌定量培养。根据是否检测到白假丝酵母菌分为白假丝酵母菌分离阳性组26例和白假丝酵母菌分离阴性组86例。结果 (1)112例患者共26例分离到白假丝酵母菌,白假丝酵母菌阳性分离率为23.2%。对涂片的分析发现,只有3例痰中存在假菌丝。(2)白假丝酵母菌分离阳性组与白假丝酵母菌阴性组比较,其抗生素使用率及激素使用率高、病死率高,差异均有统计学意义(P<0.05);(3)白假丝酵母菌分离阳性组患者血清CRP水平低于白假丝酵母菌分离阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AECOPD时血清CRP水平可辅助判断痰中病原体种类,为抗感染药物的选择提供依据。