地龙祛痰组份的纯化效率及其溶菌作用

目的了解地龙祛痰组份的纯化效率,检测其对不同类型核酸的降解作用、溶菌酶活性以及EDTA对其溶菌活性的影响。方法酸、碱变性沉淀及丙酮沉淀法制备祛痰组份粗提物,Bradford法检测蛋白含量,Yasuda法检测比活力,紫外光吸收法、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳检测对不同类型核酸的降解作用,比浊法检测地龙祛痰组份对溶壁微球菌的降解作用,将所得数据用多因素方差分析,比较EDTA对酶比活力的影响。结果 1000g鲜地龙纯化出4.12g粗提物,比活力纯化倍数为69。对环状、线状双链和单链DNA均有降解作用。对RNA无降解作用。含和不含EDTA的反应体系中,溶菌酶样比活力分别为400U/mg和410U/mg;EDTA对溶菌酶样作用没有差异(P0.05)。结论地龙祛痰组份纯化后蛋白含量减少,脱氧核糖核酸酶样活性提高,对不同类型的DNA具有降解作用,不能降RNA,具有溶菌酶样活性。EDTA不影响其溶菌酶样活性。     

脉冲电疗对60例初,复发癫狂症的临床疗效观察

脉冲电疗对６０例初、复发癫狂症的临床疗效观察６２５０００川省雅安市沙湾路１４号针灸诊朱智强多年来，笔者采用体穴配合耳穴进行脉冲电疗法治疗本病，特别对于初发病、复发不久（不超过３个月）的各种类型的精神病取得了满意的疗效，现将从１９９０年１０月至１９９５...     

一种超滤管电洗脱装置及应用研究

目的介绍一种自制超滤管电洗脱装置的制作方法,并与其他洗脱方法进行比较。方法以超滤管离心管、滤网和海绵制作成超滤电洗脱装置。待分离的蛋白样品用非变性聚丙酰胺凝胶电泳分离后染色、切胶、碎胶后,分别用上述自制超滤电洗脱装置、被动洗脱法和半透膜电洗脱法回收凝胶中的蛋白样品,再通过超滤离心进行脱盐浓缩。最后用Bradford法测定样品浓度,并比较三种洗脱方法的洗脱效率。结果超滤管电洗脱、被动洗脱和半透膜电洗脱分成0.5μg和5μg两组,以三种电洗脱法的蛋白回收率依次为:0.5μg组82%、44%、46%;5μg组77%、58.6%、63.6%。结论用超滤管自制的电洗脱装置制作简单方便,其回收效率比被动扩散法和半透膜电洗脱法高,特别适用于小量蛋白样品的回收。     

PI3K/Akt信号通路在小鼠胚胎神经发育中的作用及机制

目的 探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶（phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt）信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法 实验动物为C57BL/6J小鼠,胚胎第7.5天（embryonic day,E7.5）孕鼠随机分为6组,实验组分别腹腔注射12.5、25、50、75、100 mg/kg的LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂),对照组注射生理盐水。E13.5解剖,观察小鼠胚胎畸形情况。确定最佳造模剂量后,取该组小鼠胚胎神经及脊柱样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测细胞凋亡及音猬因子（sonic hedgehog,Shh）信号通路关键基因的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测蛋白质表达水平。实验细胞选用小鼠神经干细胞NE-4C细胞系,采用噻唑兰法（methylthiazolyldip...     

羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究

目的 本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较.方法 实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7～8周,体重18～20 g,常规饲养于...     

PMX诱导神经管畸形及其对神经上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:用培美曲塞(pemetrexed,PMX)建立叶酸缺乏的神经管畸形(neural tube defect,NTD)动物模型,并探讨其对神经上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用不同剂量PMX(5、10、15、17.5、20和30 mg/kg)对C57BL/6孕鼠进行干预,筛选最佳造模剂量。采用磷酸化组蛋白H3(pH3免疫组化的方法以及TUNEL方法)观察胎鼠神经上皮增殖和凋亡情况。结果:随着PMX剂量的增加,小鼠胚胎的吸收胎和畸形率逐渐增加,其中17.5mg/kg体重组的NTD的发生率最高(30.6%),被筛选为最佳造模剂量。pH3免疫组化和TUNEL结果显示,与正常对照组相比,NTD小鼠胚胎神经上皮细胞增殖减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05)。结论:PMX能诱导NTD的发生,其机制可能是因为PMX阻断了叶酸代谢通路并导致神经上皮细胞的增殖抑制和过度凋亡。