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目的 建立一种快速检测α地中海贫血(α地贫)SEA缺失的双重TaqMan实时荧光嵌套PCR方法.方法 收集2010年5-7月在广州市天河区妇幼保健院进行地贫筛查的外周血标本100份,2010年12月至2011年2月东莞东华医院进行产前诊断的胎儿标本7份(绒毛2份、羊水5份).从本实验室样本资源库中选取α地贫SEA缺失已知基因型标本50份.采用双重TaqMan实时荧光嵌套PCR技术,于同一检测体系同时检测各标本d地贫SEA缺失截短序列及缺失范围内正常序列,根据荧光PCR阳性扩增结果结合其Ct值差异诊断受检个体的α地贫SEA缺失基因型.同时采用检测α地贫SEA缺失的常规gap-PCR法,以PCR扩增结合产物凝胶电泳分析各标本α地贫SEA缺失基因型,以验证及对比分析新方法的准确性与实用性.结果 所建立的双重TaqMan实时荧光嵌套PCR优化体系中2个PCR的扩增效率分析曲线的斜率分别为-3.153(SEA缺失截短目的 片段)和-3.182(正常内参序列),扩增效率均接近100%.应用此方法检测50份α地贫SEA缺失已知基因型标本,结果显示该方法不但能实现其快速分子诊断,而且能准确判断受检标本中的外源性污染,从而有效避免假阴性或假阳性误诊.100份外周血标本中,两种方法分别检出SEA缺失标本11份,对比分析两方法的诊断符合率为100%.7份胎儿标本中,gap-PCR法检出SEA缺失3份,而本方法则检出SEA缺失标本2份、受-SEA/αα母源性污染的基因型为αα/αα的绒毛标本1份.结论 本研究建立的双重TaqMan实时荧光嵌套PCR可以快速准确检测α地贫SEA缺失,操作简单实用,适合大规模人群筛查和常规分子诊断. 相似文献
2.
目的探讨离子交换高效液相色谱法(HPLc)血红蛋白分析用于地贫筛查的应用价值和基本规律。方法收集50例血常规表型正常、151例小细胞低血素症外周全血,及7例含Hb变异体的α-地贫外周全血或脐带血标本,用VARIANTTMⅡ离子交换HPLCHb分析系统及配套β-地贫短程序试剂进行Hb组分分析,再根据Hb分析及DNA分子诊断结果分组统计和全面评价。结果50例正常标本HbA.2.0%~4.0%、HbF〈2.0%。151例小细胞低血素症标本中,40例HbA,〉4.0%、HbF〈5.0%的标本均确诊为p一地贫基因携带者,筛查符合率100%109例HbA,〈4.0%、HbF〈2.0%的标本中确诊108例为α-地贫;2例HbA.〈4.0%、HbF≥5.0%的标本分别确诊为δβ-地贫和HPFH。HPLC图谱显示能检出但不能定量的Hb变异体为HbH、HbBart’s和HbCS,不能检出HbWS。结论离子交换HPLCHb分析操作简单,结果稳定可靠,人为因素影响小,适合大规模人群筛查及常规检测;并提示实践应用中,须注意特定仪器及配套试剂所采用技术的适应范围,总结经验,丰富及完善其分析数据库及色谱图,避免误诊和漏检。 相似文献
3.
目的:回顾性分析我院诊治的85例社区儿童感染肺炎链球菌患者临床资料,探究肺炎链球菌对不同抗菌药物的耐药性.方法:选取2013年2月20日~2014年2月20日来我医院进行诊治的感染肺炎链球菌的社区儿童进行回顾性资料分析,收集患儿的痰标本应用VITEK2 compact 15细菌鉴定药敏分析仪进行分析,探究肺炎链球菌对各类抗菌药物的敏感性.结果:85例样本均检测出肺炎链球菌,肺炎链球菌对青霉素等药品的耐药率较高;肺炎链球菌对万古霉素的敏感性很高,对阿莫西林等药品的敏感性较高.青霉素敏感肺炎链球菌对红霉素等药品的耐药率明显低于耐青霉素肺炎链球菌,差异显著(P<0.05).结论:肺炎链球菌耐药性问题已逐渐引发关注,工作中应加强对肺炎链球菌的耐药性检测,正确选择适宜的治疗药品. 相似文献
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胰岛素样生长因子1及胎盘生乳素与胎儿生长发育的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
在影响胎儿宫内生长发育的诸多因素中 ,胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowthfactor 1,IGF 1)的作用尤为重要[1] 。有研究发现 ,在妊娠过程中 ,人类胎盘生乳素 (humanplacentallactogen ,hPL)可替代垂体生长激素 ,刺激IGF 1的产生 ,从而促进胎儿的生长[2 ] 。我们观察了妊娠期糖尿病(gestationaldiabetesmellitus,GDM)孕妇、胎儿生长受限 (fetalgrowthrestrict,FGR)孕妇和正常孕妇足月分娩时 ,母血、脐血中IGF 1、hPL… 相似文献
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健康新生儿血二胺氧化酶、D-乳酸测定及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨健康新生儿血二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸的正常含量,为新生儿胃肠功能衰竭的早期诊断寻找可靠的检验依据。方法对79例健康新生儿(足月儿59例,早产儿20例)进行血清DAO、D-乳酸含量测定。结果血清DAO为(8.851±3.424)u/ml,血D-乳酸为(0.918±0.715)ug/ml,血清DAO含量在足月儿与早产儿、在性别之间比较无差异,在日龄之间比较:<3天组与-7天及晚期新生儿各组比较差异无显著性,P值均>0.05,-7天组与晚期新生儿各组比较有显著性差异,P值均<0.05。D-乳酸含量在性别之间差异无显著性(P>0.05),但在早产儿与足月儿、<3d的早期新生儿与>14d的晚期新生儿之间的比较差异有显著性(P<0.05)。结论血DAO不受性别、孕周的影响,血D-乳酸在胎龄、日龄有差别。 相似文献
7.
解脲脲原体感染对男性不育症患乾精液质量的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨男性不育症患者解脲脲原体(UU)感染与精子密度及精子运动质量的关系。方法;将258例男性不育症患者精液进行UU 培养及精液计算机辅助分析。结果:无精子症组、少精子症组、精子密度正常组三者之间UU感染阳性率有明显区别(P<0.05),以少精子症患者UU感染阳性率最高。UU阳性组与UU阴性组比较,精子运动质量无明显差别(P>0.05),但前者运动线性有明显下降趋势(P<0.01)。结论:UU感染可对男性的生精功能及精子质量有一定影响,从而使精液整体质量下降。 相似文献
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全子宫切除术对妇女血脂,血液流变学的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
应用放射免疫法、酶标法及血浆粘度测定仪对26例因子宫肌瘤行全子宫切除保留双侧附件的病人手术前后进行检测。结果:手术后较正常组雌激素水平降低,甘油三脂增高,全血粘度、血浆粘度、血球压积增高(P<0.001),血沉均有增高趋势,并随术后时间和延长逐渐增高。提示:子宫切除后激素水平、血脂代谢及血液流变学均有明显改变,这种改变可能是引起女性心血管疾病发病率增高的危险因素之一,应予重视。 相似文献
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尿β-HCG定量检测在异位妊娠鉴别诊断中的意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨一种异位妊娠(EP)尿β-HCG定量检测的快速酶联免疫检测法(EIA)的诊断价值。方法:对68例以临床诊断为EP入我院治疗的患者作尿β-HCG-EIA快速定量检测,并同时抽取静脉血做常规β-HCG-RIA检测,比较两种方法的差异。结果:尿β-HCG-EIA与血β-HCG-RIA检测结果差异无显著意义(P>0.05)。结论:尿β-HCG-EIA快速定量检测可替代血β-HCG-RIA捡测,作为一种更方便快速诊断EP的方法。 相似文献
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男性不育症患者精浆前列腺特异性抗原含量及其意义 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 研究男性不育症患者精浆前列腺特异性抗原 (PSA)含量对精液黏稠度的影响 ,并探讨精液精子密度与PSA含量的关系。方法 对 164例男性不育症患者精液进行常规精液分析 ,并检测精浆PSA含量及精液黏稠度。结果 黏精液组精浆与正常黏度组精液精浆PSA含量分别为 (2 2 8± 5 1) μg/ml ,(3 98± 71) μg/ml ,差异有显著性 (P <0 0 1)。无精子症组、少精子症组、精子密度正常组精浆PSA含量分别为 (479± 72 ) μg/ml,(2 68± 5 4) μg/ml,(3 78± 61)μg/ml,少精子症组精浆PSA含量显著降低 (P <0 .0 5 )。 结论 精浆PSA含量与精液黏稠度有密切关系。少精子症组精浆PSA含量低于无精子症组及精子密度正常组 相似文献