增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）自身增强子I（enhancerI，ENHI）对HBV DNA疫苗免疫应答的影响。方法 采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原（HBsAg）和HBsA-ENHI基因片段，重组到载体VR1012中，构建两种HBV DNA疫苗，转染CADS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB／c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果 转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHI的HBV DNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高，两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异；免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHI可使HBV DNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加，对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB／C小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)自身增强子Ⅰ(enhancerⅠ,ENHⅠ)对HBVDNA疫苗免疫应答的影响。方法采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原(HBsAg)和HBsAg-ENHⅠ基因片段,重组到载体VR1012中,构建两种HBVDNA疫苗,转染COS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB/c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHⅠ的HBVDNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高,两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异;免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHⅠ可使HBVDNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加,对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB/c小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定

目的　在原核表达系统中对HIVp2 4抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性。方法　利用PCR技术从HIV-1全基因质粒 (B2N)中扩增p2 4抗原基因 ,并克隆入T载体中。通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上 ,用此连接产物转化大肠埃希菌BL2 1,经IPTG诱导 ,表达p2 4抗原。利用固定化金属离子 (Ni2 )配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白。并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、WesternBlot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测。结果　PCR产物约为 6 90bp ,与预期p2 4抗原全基因片段大小一致。重组质粒T-p2 4和pRSET-p2 4经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,其插入的外源基因片段均为 6 90bp。将纯化前与纯化后的蛋白作SDS PAGE电泳 ,均可见一条约 2 4× 10 3的外源基因表达带 ,与计算的相对分子质量相符。经WB和ELISA试验 ,证明基因工程表达的p2 4抗原具有较高的特异性及活性。结论　成功构建了HIVp2 4表达载体pRSET-p2 4 ,并在原核细胞中高效表达 ,其表达产物具有良好的特异性及活性     

舌原发成熟性畸胎瘤一例

畸胎瘤来源于多能的胚胎细胞，好发于卵巢和睾丸，偶可见于颈、纵隔、骶部、松果体及腹膜后等部位。原发于舌部的畸胎瘤极为罕见，我院于1991年收治1例，报道如下。     

用RACE技术对一株肠道病毒3''端进行扩增和序列分析

目的 应用3′RACE技术对一株本室分离肠道病毒基因组3′末端进行扩增，并对其核苷酸序列进行比较分析。方法 提取病毒总RNA，以锚定oligdT（17）引物进行逆转录，用特异引物及锚定引物进行3′RACE扩增，将PCR产物进行克隆、测序和序列分析。结果 获得了该病毒的3′端核苷酸序列，同源性分析结果显示该肠道病毒的核苷酸序列与肠道病毒76、89、90、91型的同源性最高为90％左右，而与其他型别的肠道病毒的同源性均小于80％；推导的氨基酸同源性与肠道病毒76、89、90、91型均在90％以上。结论 用RACE技术对肠道病毒3′端进行扩增及序列分析，证明该病毒属新型肠道病毒类，为进一步研究该病毒的分子生物学特性奠定了基础。     

内镜下硬化剂和组织胶注射与多环套扎以及门奇静脉断流术治疗食管静脉曲张破裂出血的近期疗效对比

食管静脉曲张破裂出血是肝硬化及肝癌的严重并发症 ,病势凶险 ,死亡率高。除传统的三腔管压迫外 ,硬化剂和组织胶注射、静脉曲张套扎术 (ＥＶＬ)、门奇静脉断流术等也都是有效的止血方法。我们自 1994年 1月～ 2 0 0 0年 4月先后采用这些方法实施治疗 ,现报道如下 :一、临床资料1 一般资料 :1994年 1月至 2 0 0 0年 4月因食管胃底静脉曲张破裂出血的住院患者 16 1例入选本研究。入选条件是 :(1)肝炎后肝硬化门脉高压致食管胃底静脉曲张破裂活动性出血、或在 72ｈ内有过活动性出血 ;(2 )静脉曲张程度为Ⅳ～Ⅴ度[1] ;(3)肝炎后肝硬化符合临床…     

高频电刀对切口愈合的影响因素

1　对象和方法1.1　对象　 1999 0 3/ 1999 10行剖腹手术病例中随机抽样调查了 2 0 0 (男 131,女 6 9)例 ,年龄 30 6 2岁 .其中普通外科手术10 0例 ,妇科手术 6 0例 ,泌尿外科手术 40例 .患者均无任何手术合并症 .高频电刀为台北市越圣仪器厂股份有限公司生产的 5 0 0ＳⅡ型高频电刀 .1.2　方法　按统一设计的观察指标对上述患者进行详细调查 ,包括患者一般情况 (年龄、性别、切口脂肪厚度 ) ,术中高频电刀使用情况 ,以及术后切口愈合情况 ,由专人进行调查记录 .根据术中使用高频电刀方法 ,将患者分为实验组 (130例 ) ,采用电凝扫削皮下组织…     

急性颈椎间盘突出症的手术治疗(附27例报告)

目的探讨急性颈椎间盘突出症的治疗方法。方法对27例急性颈椎间盘突出症采取颈前路手术方法治疗,并进行5~53个月(平均34个月)随访。结果全组均成功手术,术后优良率为92.59%。结论颈椎间盘突出症手术治疗应明确手术指征,不同类型应选用不同的方法。     

美沙酮维持治疗患者激励积分机制的应用效果

目的 探讨美沙酮维持治疗患者激励积分机制的应用价值.方法 设计积分项目和分值,申请加入积分制的54 例患者为治疗组,根据个人积分情况给予免除相应天数的治疗费用直至获最大奖励;对照组53 例,平时给予口头表扬或一定的物质奖励;每月随机尿吗啡检测,大于7 天未来服药为脱失.结果 两组在治疗期间尿吗啡检测总阳性率、个人阳性次数和维持治疗率均有显著差异性(P＜0.01).结论 美沙酮维持治疗患者激励积分机制有助于降低尿吗啡检测阳性率和提高维持治疗率.     

昼夜节律在病毒感染中的作用

昼夜节律是由内源性时钟调节的多个生物过程的日常振荡,调控机体的各种生理变化.节律紊乱会导致多种疾病的发生,包括代谢综合征和癌症等.最近将昼夜节律系统作用研究扩展到了感染的调控,宿主与病原体的相互作用以及由此产生的疾病结局.深入了解昼夜节律系统在调节病毒感染中的作用将为病毒性传染病的致病机理、抗病毒治疗、疫苗研发等提供新的思路.本文就昼夜节律与病毒感染的相互作用进行综述,包括昼夜节律如何影响病毒感染以及病毒如何调节节律以促进自身复制的关键发现,突出昼夜节律的重要性.