儿科重症监护病房腺病毒感染分析

目的：了解广州地区PICU中人腺病毒( human adenovirus,HAdV)肺炎的病原学特点及临床特征。方法选取2012年1月至2014年12月在广州市妇女儿童医疗中心PICU住院的HAdV感染患儿87例为研究对象。采集患儿咽拭子样本,用实时荧光定量聚合酶链反应( FQ-PCR)方法进行HAdV及其亚型检测,同时检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、合胞病毒、肠道病毒、偏肺病毒、博卡病毒、鼻病毒、肠道病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体、副流感病毒等10种常见呼吸道病原体。对HAdV肺炎患儿的临床资料进行分析。结果87例HAdV肺炎患儿中, HAdV-3感染占35.6％(31/87), HAdV-7感染占52.9％(46/87),HAdV-4感染占2.3％(2/87),8例未定型;病原体混合感染检出率为27.6％(24/87),其中87.5％(21/24)是2种混合感染,12.5％(3/24)是3种混合感染;与肺炎支原体发生混合感染的占50.0％(12/24),与人博卡病毒混合感染的占20.8％(5/24)。 HAdV-7感染患儿中73.9％(34/46)需要呼吸机辅助通气,而 HAdV-3感染患儿中51.6％(16/31)需要呼吸机辅助通气(χ2＝4.045,P＝0.044)。 HAdV-7感染患儿发生2个以上器官功能不全或衰竭的比例大于HAdV-3感染患儿[47.8％(22/46)vs.22.6％(7/31),χ2＝5.027,P＝0.025]。结论 HAdV是广州地区PICU感染的重要病毒病原,可导致重症肺炎。 PICU中发现3、7、4型HAdV感染,7型HAdV肺炎患儿所占比例和临床表现较3型更多、更危重。 HAdV与其他病原体发生混合感染的现象较为常见。     

25例肾病综合征患儿调节性T细胞水平变化及意义

目的：观察肾病综合征（NS）患儿外周血中调节性T细胞（Treg）、淋巴细胞各亚群的变化,探讨其在疾病发生和发展中的作用。方法选取20例健康儿童作为对照组,25例患儿作为肾病综合征组。采用流式细胞术对两组儿童进行外周血Treg、淋巴细胞各亚群检测。结果与正常对照组比较,NS组的外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-／low Treg细胞、CD3^＋CD4^＋辅助性T细胞、CD19^＋B细胞表达均明显降低（P＜0．05）;而CD3^＋CD8^＋抑制性T 细胞表达明显升高（P＜0．05）;肾病综合征组患儿的 CD16^＋CD56^＋NK细胞表达降低,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）。结论淋巴细胞免疫功能的紊乱,特别是Treg的表达及其功能的改变,参与了肾病综合征的发病,其检测可有助于肾病综合征的诊治。     

流式细胞术检测过敏性紫癜患儿外周血调节性T细胞的研究

目的了解过敏性紫癜（HSP）患儿外周血调节性T细胞数量的改变及其在过敏性紫癜患儿免疫功能紊乱中的调控作用。方法应用四色流式细胞术,对35例过敏性紫癜患儿和35例正常儿童的CD4^＋CD25^hi调节性T细胞、CD3^＋T淋巴细胞、CD3^＋CD4^＋辅助T细胞、CD3^＋CD8^＋抑制T细胞、CD19^＋B淋巴细胞、CD3^-CD16^＋ 56^＋NK细胞进行测定。结果HSP患儿外周血CD4^＋CD25^hi调节性T细胞、CD3^＋CD4^＋辅助T细胞、CD3-CD16^＋56＋NK细胞的百分率下降均明显低于对照组;CD19^＋B淋细胞的百分率则显著增高;而两组间CD3^＋T淋巴细胞、CD3^＋CD8^＋抑制T细胞的变化差异无统计学意义。结论HSP患儿体内存在细胞及体液免疫功能紊乱,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其数量下降可能是导致过敏性紫癜发病的重要原因之一。     

鼻病毒感染诱发儿童哮喘急性发作时血清粘附分子水平及意义

【目的】 了解鼻病毒(rhinovirus,RhV)感染诱发儿童哮喘急性发作时血清可溶性细胞间粘附分子-1(solube intercellular adhesion moleculet,sICAM-1)水平变化及意义。 【方法】 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对哮喘急性发作儿童呼吸道RhV检测,筛选出39例RhV阳性患儿(研究组),正常儿童31例(对照组),采用 ELx800酶标仪酶联免疫吸附试验法检测两组儿童的血清sICAM-1水平。 【结果】 研究组sICAM-1水平结果为(229.57±59.19) μg/mL, 对照组sICAM-1水平结果为(198.92±49.74) μg/mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。 【结论】 鼻病毒感染诱发儿童哮喘急性发作时血清粘附分子表达水平升高,可能是导致哮喘儿童气道炎症和气道高反应的重要炎症因子之一。     

手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群的研究

目的检测手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群,探讨其免疫功能变化与疾病的关系。方法采用四色荧光标记流式细胞术,检测31例手足口病患儿外周抗凝全血的淋巴细胞亚群:CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞、CD19+细胞、CD16+56+细胞的相对计数,并同时检测30例健康儿童作为对照组。结果手足口病患儿外周血CD3+细胞、CD3+CD4+细胞(Th)、CD3+CD8+细胞(Ts)以及CD16+56+细胞的百分率下降均明显低于对照组(P0.05);CD19+细胞的百分率则显著增高(P0.05);而两组间Th/Ts细胞比值的变化不存在明显差异(P0.05)。结论手足口病患儿体内存在细胞及体液免疫功能紊乱,病毒感染可能是引起机体免疫功能异常的关键。     

广州地区2007年4238例急性呼吸道感染婴幼儿中人副流感病毒1～3型的研究

人副流感病毒(HPIV)1～3型在婴幼儿中主要引起下呼吸道感染,是引起气管炎和肺炎的重要病原体[1].实时荧光PCR检测是公认的核酸分子定性和定量检测的标准方法[2],本研究建立了实时荧光PCR检测HPIV 1～3型的方法,并对2007年广州地区的4238例急性呼吸道感染患儿的临床标本进行检测.     

急性呼吸道腺病毒感染患儿血清细胞因子的动态变化

目的探讨急性呼吸道腺病毒（AdV）感染患儿的细胞因子水平,及其在腺病毒感染发病与发展中的致病作用及意义。方法采集临床住院患儿血清和咽拭子,分别用酶联免疫法（ELISA）及实时荧光定量PCR法检测AdV-IgM及AdV核酸,两者结果均为阳性者入选AdV感染组。采用流式细胞蛋白分析技术（CBA）检测20例AdV感染者急性期、恢复期和20例正常对照儿童血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ及IL-17A。结果 AdV感染患儿急性期血清中的IL-2、IL-4、IL-6、TNF、IL-17A水平显著高于恢复期和正常对照组（P〈0.01）;而血清中的IL-10、IFN-γ水平急性期显著低于恢复期和正常对照组（P〈0.05）;恢复期和正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论儿童急性呼吸道腺病毒感染会引起细胞因子水平的改变,它们在血清中水平失衡,对发病及病情的发展有一定影响。     

2009~2010年广州地区儿童呼吸道合胞病毒感染分析

目的 应用实时荧光PCR方法检测呼吸道合胞病毒,分析2009~2010年广州地区儿童感染呼吸道合胞病毒的状况。方法 以呼吸道合胞病毒的N基因序列为参考,设计特异性引物和TaqMan荧光探针,建立实时荧光PCR方法,进行灵敏度和特异性检测。采用实时荧光PCR方法,对2009~2010年两年本院门诊或住院部急性呼吸道感染患儿的21458份咽拭子样本进行了检测。结果 （1）实时荧光PCR方法具有较好的特异性和灵敏度,与其他常见呼吸道病毒无交叉反应。（2）2009年的10477例临床标本中实时荧光PCR方法检测全年的呼吸道合胞病毒阳性率为7.25％,流行高峰在3月份,感染率为20.04%;2010年检测的10981例临床标本中,呼吸道合胞病毒阳性率为9.73％,有两个流行高峰,一个在2月,感染率为29.56％,另一个高峰在12月份,感染率达到22.20％。结论 本研究建立的实时荧光PCR方法具有简便快捷、特异、敏感的特点,适用于临床呼吸道合胞病毒的检测。2009~2010年呼吸道合胞病毒依然是广州地区儿童急性呼吸道感染的主要病原。     

婴幼儿病毒性肺炎病原学与外周血淋巴细胞亚群变化的研究

目的分析广州地区病毒性肺炎患儿病原学感染情况与外周血淋巴细胞亚群的变化。方法应用ELISA及荧光定量PCR法检测226例支气管肺炎患儿急性期病原学感染,包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IFV)、副流感病毒(PIV)、巨细胞病毒(CMV)、肠道病毒(EV)、EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV),并利用四色流式细胞术对病毒性肺炎患儿及正常对照儿童进行外周血淋巴细胞亚群检测。结果检出病毒感染阳性者106例,其中轻症肺炎84例,重症肺炎22例;阳性率46.9%,其中单一病毒感染71例,占67.0%,混合感染35例,占33.0%;RSV、ADV、IFV感染居前3位;与对照组相比,病毒性肺炎患儿外周血CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+辅助性T淋巴细胞及CD16+56+NK细胞均明显下降(P<0.05),CD19+B淋巴细胞比例则显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);且重症患儿的CD3+CD4+T淋巴细胞也比对照组儿童显著降低(P<0.01);与轻症患儿相比,重症患儿CD16+56+NK细胞下降更为明显(P<0.01)。结论支气管肺炎患儿病毒感染的种类繁多,特别是重症肺炎患儿存在明显的免疫功能紊乱,及早进行病原学及免疫功能检测,有利于及时采取相应的治疗措施。