贝利尤单抗治疗重型Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ及Ⅴ型狼疮性肾炎的有效性及安全性分析

目的 探讨贝利尤单抗治疗重型Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ及Ⅴ型狼疮性肾炎(Lupus nephritis, LN)的有效性及安全性。方法 回顾性选取2019年1月至2022年4月在郑州大学第一附属医院接受贝利尤单抗联合常规治疗(常规治疗分为3种：(1)糖皮质激素联合他克莫司;(2)糖皮质激素联合他克莫司及霉酚酸酯;(3)糖皮质激素联合霉酚酸酯)的重型Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ及Ⅴ型LN患者为治疗组,接受常规治疗患者为对照组,按照1∶2分层匹配。根据治疗组和对照组的常规治疗中有无他克莫司再分为2个亚组(他克莫司亚组和霉酚酸酯亚组)。主要终点是24周完全缓解(Complete remission, CR)。结果 共81例患者入选,治疗组27例,对照组54例。在24周时,治疗组的CR率显著高于对照组(48.1%vs.25.9%,χ²=4.000,P=0.046)。亚组分析显示,治疗组的贝利尤单抗联合他克莫司亚组的CR率显著高于对照组(χ²=5.511,P=0.019),贝利尤单抗联合霉酚酸酯亚组的CR率与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。在24周时,治疗组的24小时尿蛋...     

弓形虫感染对THP-1巨噬细胞极化影响的研究

目的 探讨弓形虫感染对体外诱导的人外周血单核细胞(Human acute monocytic leukemia cell line,THP-1)极化特点的影响。方法 用佛波酯(PMA)诱导THP-148 h使之由悬浮的单核细胞诱导为贴壁的巨噬细胞,体外选择不同时间点感染弓形虫,用Diff染色分析弓形虫在细胞内的增殖情况。Western blot检测极化相关蛋白,Q-PCR检测mRNA的表达情况。结果 成功诱导得到贴壁的巨噬细胞模型,感染弓形虫后,M1型巨噬细胞标志性蛋白iNOS 及M2型巨噬细胞标志型蛋白Arg-1 36 h表达量与对照组差异明显(t=10.23,P<0.05)。Q-PCR的结果显示不同的处理组IL-1、IL-12、iNOS和TNF-α逐渐减少,而IL-10、Arg-1呈逐渐增加,到36 h达到顶峰(t=9.587,P<0.05)。结论 弓形虫RH株感染THP-1巨噬细胞后可以在胞内生长增殖,THP-1细胞感染后向M2型巨噬细胞方向极化。     

维生素D3对结肠癌增殖和凋亡的影响及机制研究

[目的]探讨维生素D3对结肠癌增殖和凋亡的影响及机制研究。[方法]通过对临床结肠癌患者样本收集,血液中维生素D含量检测、受体检测、PCR定量、蛋白质免疫印迹等分子生物学实验,研究维生素D3对结肠癌增殖和凋亡的影响和机制。[结果]ELISA结果显示结肠癌患者血液中的1,25-二羟维生素D3含量(11.54±3.15)ng/ml和2,5二羟维生素D3含量(10.67±2.31)ng/ml较健康对照组1,25-二羟维生素D3为(29.65±7.25)ng/ml,2,5二羟维生素D3为(15.34±6.98)ng/ml明显降低,且维生素D受体的mRNA水平(5.01±3.86)相对对照组(9.36±4.87)较低,免疫荧光技术结果表明维生素D3通过Wnt信号通路影响结肠癌,蛋白质免疫印迹和PCR结果显示维生素D3处理后的人结肠癌细胞SW480中Wnt信号通路相关蛋白,EMT相关蛋白和β-catenin表达量均下调。[结论]维生素D3能够有效减少结肠癌组织的增殖,从而降低结肠癌发病率和防止结肠癌复发。     

分泌性中耳炎患者耳积液HMGB1、IL-6表达及意义

目的 检测高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1,HMGB1）、白细胞介素-6（interleakin-6,IL-6）在分泌性中耳炎患者血清及耳积液表达水平,探讨其在分泌性中耳炎中的致病意义。方法 选择2019年6月～2020年12月本院治疗的分泌性中耳炎患者83例,依据病情分期分为急性组（急性中耳炎,病程<3周）28例、亚急性组（亚急性中耳炎,病程3周～3个月）30例和慢性组（慢性中耳炎,病程3～6个月）25例;根据耳积液性质分为浆液性组50例、黏液性组33例,另选取同期健康体检人员（无任何耳鼻喉疾病史）抽血并留血清85例作为对照组,采用ELISA方法检测血清及耳积液HMGB1、IL-6水平,采用Pearson法分析HMGB1、IL-6水平与分泌性中耳炎患者病程的相关性。结果 对照组与观察组血清HMGB1、IL-6水平差异无统计学意义（P>0.05）;与观察组血清比较,分泌性中耳炎患者耳积液HMGB1、IL-6水平显著升高（P<0.05）;急性组、亚急性组、慢性组中耳炎患者耳积液HMGB1、IL-6表达水平依次升高,差异有统...     

弓形虫ROP16蛋白在人白血病细胞THP-1表达及对其细胞增殖与凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨弓形虫Ⅱ型(Me49)ROP16蛋白在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中的表达及其对THP-1细胞增殖与凋亡的影响。方法构建过表达ROP16(overExp-ROP16)和空载体(overExp-NC)慢病毒,通过转染THP-1细胞,72 h后观察荧光表达情况,采用PCR与Western blot验证ROP16在THP-1细胞中的表达。免疫荧光技术检测ROP16蛋白在THP-1细胞中的定位。CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖及凋亡。采用qRT-PCR检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA相对表达水平。Western blot检测Bax、Bcl-2、Pro-Caspase-3和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达变化。结果构建的过表达ROP16重组慢病毒转染到THP-1细胞后,可观察强荧光信号,ROP16蛋白在THP-1细胞中成功表达。免疫荧光结果表明ROP16蛋白定位于THP-1细胞核。CCK-8与流式细胞术证实ROP16蛋白抑制THP-1细胞的增殖并促进其凋亡(均P<0.05)。与对照组相比,过表达组促凋亡因子Bax、Caspase-3 mRNA高表达(P<0.05),抗凋亡因子Bcl-2 mRNA低表达(P<0.01),Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白水平上调(P<0.01),Bcl-2与Pro-Caspase-3蛋白水平下调(P<0.01)。结论构建的慢病毒表达质粒overExp-ROP16可在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中表达且通过入核调节凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3而抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡。     

尿路感染642例病原菌分布及耐药性分析

目的了解泌尿系统感染的病原菌分布及耐药情况,指导临床合理用药。方法对2012年1月—12月我院中段尿培养标本中分离的642株致病菌及其药敏试验结果进行回顾性分析。结果从1 507份临床送检标本中共分离出642株病原菌(同一患者只取第1株),其中G-杆菌共420株,占65.4%;G+球菌178株,占27.7%;真菌44株,占6.8%。排列在前6位的病原菌分别为大肠埃希菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌和铜绿假单胞菌。检出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌共192株,阳性率分别为60.2%和36.2%。发现对亚胺培南耐药的大肠埃希菌2株;对万古霉素耐药的屎肠球菌1株。结论泌尿系统感染的病原菌以G-杆菌为主,病原菌多重耐药现象严重;临床医师应重视中段尿培养,并应根据药敏试验结果合理选择抗生素。     

基于生物信息学探讨弓形虫ROP16Ⅰ对A549细胞表达谱的影响

目的 采用生物信息学对ROP16_Ⅰ基因转染的A549细胞株的表达谱芯片结果进行数据挖掘,寻找影响Ι型弓形虫疾病的差异表达基因,为揭示Ι型弓形虫疾病的发病机制提供依据。方法 通过生物信息学方法对过表达ROP16_Ⅰ的A549细胞株的表达谱进行研究,从中筛选差异表达基因。将得到的数据导入在线分析工具ToppGene和STRING中对差异表达基因进行筛选,同时进行GO 分析及KEGG分析。结果 本研究共获得了483个差异表达基因,其中上调的基因共有252个,下调的基因共有231个。ToppGene最终筛选得到CCL8、CXCL11、PIAS1及EIF2AK2等14个Ι型弓形虫相关的基因。GO分析和KEGG分析发现,这些候选基因与白介素IL-10、IL-4、IL-13信号通路,细胞因子-细胞因子受体相互作用通路及Toll样受体信号通路等相关。在蛋白-蛋白互作网络中,这14个候选基因恰好处于网络的最核心位置。结论 Ι型弓形虫疾病的发生可能与CCL8、CXCL11、PIAS1及EIF2AK2等基因密切相关。     

弓形虫ROP16_Ⅱ效应分子对宿主A549细胞基因表达谱的影响

目的 ROPl6在弓形虫入侵宿主细胞的过程中发挥着关键作用。为了提高ROP16对宿主细胞的分子功能的认识,本研究分析了ROP16_Ⅱ基因转染的A549细胞株的表达谱,筛选了新的候选基因,为揭示Ⅱ型弓形虫病的发病机制提供了依据。方法通过表达谱芯片技术对过表达ROP16_Ⅱ的A549细胞株的表达谱进行研究,并从中筛选差异表达基因。利用ToppGene从差异表达基因中筛选候选基因,并通过RT-qPCR对获得的基因进行验证。结果共获得了9 994个差异表达基因,其中上调的基因有4 293个,下调的基因有5 701个。将这些差异表达基因进行GO功能富集分类,主要涉及多种生物学过程,包括发育过程、生物调控、免疫应答和信号传导等过程。采用ToppGene筛选得到4个疾病候选基因,其中上调表达的有IL4R和STAT1;下调表达的有IL12RB1和IL2RG。RT-qPCR结果与表达谱芯片数据一致。结论 ROP16_Ⅱ入侵宿主细胞后影响宿主细胞基因表达谱,了解ROP16_Ⅱ的作用机制,对于更加全面地揭示Ⅱ型弓形虫病的发病机制具有重要意义。