白藜芦醇通过下调microRNA-151表达抑制肝癌细胞株HepG2细胞活性的研究

目的 研究白藜芦醇（Res）对肝癌细胞株HepG2宿主基因黏着斑激酶（FAK）和内含子miR-151表达的影响,探讨其抗肿瘤的可能作用机制.方法 分别以50、100、150、200 μmol/L Res作用于体外培养的HepG2细胞24、48和72 h.CCK-8法检测细胞增殖;Real-Time PCR检测细胞FAK mRNA和miR-151表达.利用miR-151模拟物转染获得miR-15过表达HepG细胞株（miR-151过表达组）,流式细胞仪和Hoechst 33342染色观察过表达miR-151对HepG2细胞周期及凋亡的影响.以转染模拟物突变体细胞作为阴性对照,未转染细胞作为空白对照.结果 Res对体外培养HepG2细胞的增殖活性及FAK mRNA和miR-151表达具有显著抑制作用,并在一定范围内呈现浓度和时间依赖性.miR-151过表达组HepG细胞miR-151表达明显高于阴性对照组和空白对照组（P＜0.001）;流式细胞仪检测和Hoechst 33342染色观察结果显示,miR-15过表达使HepG细胞G0/G1期缩短,细胞周期进程加快,并能抑制细胞凋亡.结论 Res可能通过下调miR-151表达,抑制肝癌细胞HepG2增殖并诱导凋亡.     

白藜芦醇通过下调microRNA-151表达抑制肝癌细胞株HepG2细胞活性的研究

目的 研究白藜芦醇(Res)对肝癌细胞株HepG2宿主基因黏着斑激酶(FAK)和内含子miR-151表达的影响,探讨其抗肿瘤的可能作用机制.方法 分别以50、100、150、200 μmol/L Res作用于体外培养的HepG2细胞24、48和72 h.CCK-8法检测细胞增殖;Real-Time PCR检测细胞FAK mRNA和miR-151表达.利用miR-151模拟物转染获得miR-15过表达HepG细胞株(miR-151过表达组),流式细胞仪和Hoechst 33342染色观察过表达miR-151对HepG2细胞周期及凋亡的影响.以转染模拟物突变体细胞作为阴性对照,未转染细胞作为空白对照.结果 Res对体外培养HepG2细胞的增殖活性及FAK mRNA和miR-151表达具有显著抑制作用,并在一定范围内呈现浓度和时间依赖性.miR-151过表达组HepG细胞miR-151表达明显高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.001);流式细胞仪检测和Hoechst 33342染色观察结果显示,miR-15过表达使HepG细胞G0/G1期缩短,细胞周期进程加快,并能抑制细胞凋亡.结论 Res可能通过下调miR-151表达,抑制肝癌细胞HepG2增殖并诱导凋亡.     

脑胶质瘤相关癌基因1对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响

目的:探讨脑胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene1,GLI1)对人胰腺癌PANC-1细胞增殖的影响。方法:构建靶向GLI1基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒重组载体pLVTHM-GLI1-shRNA(以空载体pLVTHM-GFP为对照),经包装后感染胰腺癌PANC-1细胞,应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中GLI1、bcl-2、bcl-xl和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA和蛋白的表达;CCK8(cell counting kit-8)法分析各组细胞的生长情况。结果:成功构建了稳定低表达GLI1的GLI1-shRNA-PANC-1细胞,与PANC-1细胞和GFP-PANC-1细胞比较,GLI1-shRNA-PANC-1细胞中GLI1mRNA和蛋白表达水平分别下调了(82.1±3.2)和(76.7±2.2)(P<0.01),bcl-2mRNA和蛋白表达分别下调了(49.7±5.4)、(43.5±9.4)(P<0.01);而blc-xl和PCNAmRNA和蛋白表达水平无明显变化。GLI1-shRNA-PANC-1细胞的增殖抑制率明显高于GFP-PANC-1、PANC-1细胞(P<0.05)。结论:干扰GLI1基因的表达可抑制人胰腺癌PANC-1细胞的增殖,其机制可能与下调bcl-2的表达有关。     

胰腺神经内分泌肿瘤患者临床特征及预后影响因素分析

目的 探讨胰腺神经内分泌肿瘤(PNET)患者的临床特征及预后影响因素。方法 收集2012年3月-2019年4于上海交通大学附属第一人民医院病理确诊为PNET的54例患者临床资料,分析患者临床、病理、影像学特征及预后情况。计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher精确检验。采用Kaplan-Merier法进行生存分析,并用log-rank进行组间差异检验。结果 54例PNET患者中,男19例(35.2%),女35例(64.8%);无功能性PNET 47例(87.0%),功能性PNET 7例(13.0%);TNMⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分别有17例(31.5%)、26例(48.1%)、9例(16.7%)、2例(3.7%);世界卫生组织病理分级G1、G2、G3期分别有24例(46.2%)、22例(42.3%)、6例(11.5%)。CT(χ2=8.250,P=0.010)和MRI(χ2=6.048,P=0.031)检查评估结果示肿瘤边界不清的患者术后复发和病死率更高。患者总生存期为1~86个月,5年生存率为92.0%,无病生存期为1~71个月。单因素分析结果显示,PNET患者TNM分期(χ2=9.572,P=0.023)、病理分级(χ2=7.506,P=0.023)、手术切缘侵犯(χ2=15.123,P<0.001)、淋巴结转移(χ2=4.716,P=0.030)及远处转移(χ2=5.534,P=0.019)与总生存期相关。结论 PNET CT和MRI提示肿瘤边界不清者预后较差。肿瘤TNM分期、病理分级、手术切缘侵犯、淋巴结转移及远处转移与PNET患者预后有密切关系。     

胰腺癌中EMT和Hedgehog信号通路的研究进展

胰腺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤,具有早期易发生转移、恶性程度高等特点,预后极差,5年生存率仅约5%。研究提示上皮间质化（epithelial-mesenchymaltransition,EMT）与胰腺癌的转移关系密切,而异常激活的Hedgehog信号通道对胰腺癌的发生、发展、转移等恶性生物学特性的维持极为重要。