肺结核、肺癌患者外周血结核分枝杆菌及其L型的检测方法

目的：建立检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型的简便方法,并对其临床应用进行评价。方法：将红细胞裂解后离心检测,建立ＰＣＲ法、直接培养法、溶血离心培养法、溶血离心涂片法和滴片法。结果：１３例肺结核和２５例肺癌患者中,肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌ＰＣＲ检测的阳性数为８例中３例和１１例中３例;结核分枝杆菌及其Ｌ型直接培养法总阳性率为１７．６５％,溶血离心涂片法、溶血离心培养法、滴片法的总阳性率分别为９．５２％、４１．１８％和５８．８２％;肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌以Ｌ型为主,表现为抗酸或非抗酸。结论：肺结核和肺癌患者外周血存在结核分枝杆菌及其Ｌ型,并以Ｌ型为主;溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色可常规用于检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型。     

端粒、端粒酶与肿瘤关系研究进展

端粒是一种ＤＮＡ－蛋白质复合体,位于真核生物染色体末端,维持染色体的稳定,保证线性ＤＮＡ完整复制。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶,近年来研究发现,端粒酶活性及端粒的稳定与恶性肿瘤发生相关。恶性肿瘤是由破坏细胞正常生长调控的多种基因突变引起,是一个多步骤、多阶段的过程。近年研究发现,在大多数人体恶性肿瘤细胞中可检测到端粒酶活性,而在正常体细胞中一般端粒酶阴性（生殖细胞、造血干细胞等除外）。端粒酶与肿瘤之间的高度相关性使之成为目前肿瘤研究的新热点。端粒酶抑制及检测可能有潜在的临床治疗及诊断价值。本文就此作一综述。     

Survivin反义寡核苷酸协同Taxol诱导肺癌细胞株凋亡

[目的]研究Survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)单独或联合Taxol对肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达,细胞凋亡,生长抑制率的影响.[方法]Survivin ASODN经脂质体介导转染人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,用RT-PCR法、Western blot法检测Survivin表达;Survivin ASODN单独、联合Taxol作用NCI-H446细胞后,用MTT法检测细胞生长抑制率,台盼兰拒染实验检测细胞死亡率,流式细胞仪检测细胞凋亡并计算两药相互作用指数(CDI).[结果]Survivin ASODN转染NCI-H446细胞后,Survivin mRNA表达和蛋白表达明显下调,其中SurvivinASODN 500nM作用72h时Survivin mRNA抑制率达62.72%,效果最佳;Survivin ASODN单独或联合Taxol作用NCI-H446细胞后发现Survivin ASODN联合Taxol作用的效果明显优于两药单独应用(P＜0.01).其联用时细胞凋亡率达73.3%,而单用时分别为43.6%和23.8%.其联用时细胞生长抑制率达80.1%,而单用时抑制率分别为50.4%和30.5%(P均＜0.01).两药联用组细胞死亡率达69.9%,高于两药单用时的41.4%和24.8%(P均＜0.01);CDI值为0.43,表明两药具有显著协同作用.[结论]Survivin ASODN能够抑制肺癌细胞株Survivin mRNA和蛋白表达并诱导肺癌细胞凋亡;Survivin ASODN能够增加Taxol的敏感性.     

热休克蛋白70及其在支气管哮喘中的研究进展

热休克蛋白为一类广泛存在于各种生物体的应激蛋白,其高度的保守性及“分子伴侣”功能已为人们所认识。热休克蛋白70为热休克蛋白家族在细胞内含量最多且最保守的一类。近年来,越来越多的研究表明热休克蛋白70在支气管哮喘的免疫及炎症中发挥重要作用,但确切机制尚未明了,仍待进一步的研究探索。     

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的：探讨凋亡：抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用，探讨其在抗癌方面的作用。方法：①实验于2002-08／2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成。将对数生长期NCI—H446细胞分为6组：空白对照组，脂质体10mg／L组（仅加空脂质体），NSODN 500nmol／L组（该3组均为对照组），survivin反义寡核苷酸500nmol／L组，bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组（分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸，48h后收取细胞进行以下检测）。②在脂质体介导下，以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC—A1，于72h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达。凋亡指数：（静止期／DNA合成前期）占整个细胞周期的百分比；增殖指数=（DNA复制期＋合成后期／有丝分裂期）占整个细胞周期的百分比。②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI—H446后，用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数，锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率。（3）计量资料差异性比较采用方差分析和q检验。结果：①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因。survivin反义寡核苷酸作用细胞株后，出现生长抑制和细胞凋亡，细胞survivin mRNA明显下调，反义寡核苷酸500nmol／L作用72h后NCI—H446和SPC—A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62．72％和67．43％。②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI—H446细胞均有生长抑制作用；联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64．9％，优于单独应用（单用bcl-2反义寡核苷酸为34．2％）（P〈0．01），两药相互作用指数为0．708。锥虫蓝拒染实验显示，survivin反义寡核苷酸500nmol／L＋bcl-2反义寡核苷酸5μmol／L组细胞死亡率为62．1％，高于两药单用时的31．4％和41．4％。流式细胞仪检测凋亡显示，与各对照组相比，survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡，凋亡率分别为43．6％和30．7％，两者联用凋亡率提高到58．6％（p〈0．01）。结论：①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达，并诱导细胞凋亡和抑制生长。②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用。     

血管内皮生长因子在肺癌中的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是目前发现的最重要的血管刺激因子.在恶性肿瘤中,VEGF表达明显高于正常组织,并通过刺激肿瘤血管和淋巴管的生成进而促进肿瘤的生长、转移.因此,针对VEGF的靶向治疗一直是最近的研究热点.而对VEGF的自分泌机制以及上游调控...     

肝素、低分子肝素的抗肿瘤作用研究进展

肝素、低分子肝素是临床常用的一种抗凝药物.近年来研究发现,其还具有多种生物活性和临床用途,包括抗血管生成及抗肿瘤作用等.肝素、低分子肝素可通过改变肿瘤细胞的细胞和分子学环境而干预肿瘤的发展,例如,肝素、低分子肝素具有抗肿瘤细胞增殖作用,抑制血管内皮细胞增殖和抑制血管形成,通过抑制乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶等酶的活性及作...     

支气管镜介入技术在外周肺病变中的应用

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因,肺癌的治愈率很低,不仅因其自身攻击性,还因对肺癌筛查的忽视。随着肺部筛查手段的不断进展,肺外周病变的检出率逐渐提高,当前对外周肺病变进行诊断的最常用方法是经支气管行支气管镜检查或计算机断层扫描（computed tomography, CT）引导下经皮穿刺针吸/活检,然而对于外周肺病灶,支气管镜检查有较低的诊断率,经皮穿刺检查有较高的气胸发生率,因此,使用安全、微创的方法对外周肺病变进行组织确诊是临床工作者将面临的挑战。新型支气管镜介入诊断技术已逐渐用于临床,这些技术可有效提高外周肺病变的诊断率,缩短诊断时间,使患者获得及时有效的治疗。本文将现有的技术进行简要综述以帮助临床医生尝试应用这些微创技术。     

胸膜腔注射尿激酶治疗结核性胸膜炎疗效观察

目的:观察胸腔内注射尿激酶对减少结核性渗出性胸膜炎胸膜增厚、粘连的效果。方法:渗出性胸膜炎患者96例,随机分成治疗组50例与对照组46例。治疗组每次抽胸腔积液(胸液)后注入尿激酶10万u+0.9% NS20ml,对照组仅注射0.9% NS20ml。两组其余治疗相同。结果:治疗组胸液吸收时间、胸穿次数、胸膜粘连发生率、胸膜厚度均低于对照组(P<0.01),治疗组第一秒用力呼气容积占预计值的百分比(FVC%)、一秒率/用力肺活量(FEV_1.0/FVC%)、肺活量和肺活量占预计值的百分比均高于对照组(P<0.01)。治疗组在注药后凝血酶时间、凝血酶原时间、活化部分凝血激酶时间变化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:胸腔内注入尿激酶治疗结核性胸膜炎可以促进胸液吸收,减轻胸膜肥厚、粘连,改善肺功能。     

CT引导下经皮肺活检对肺曲霉病的诊断价值

目的:探讨CT引导下经皮肺活检对肺曲霉病的诊断价值。方法:对34例接受CT引导下肺活检的肺曲霉病患者的临床资料进行回顾性分析。结果:穿刺活检病理确诊30例,4例未确诊病例后经手术病理证实为肺曲霉病。临床表现:咳嗽25例,咳痰20例,发热18例,咯血6例,胸痛5例,胸闷、呼吸困难5例,无症状者(体检发现肺部病变)3例。影像学表现:结节15例(单发6例,多发9例),肿块7例,实变灶5例,斑片影4例及新月征3例。血半乳甘露聚糖试验阳性率67.6%(23/34)。病理学改变以坏死性炎症为主。并发症:气胸17.6%(6/34),1例需放置胸腔引流管,其余自行吸收;针道出血5例,少量咯血1例,均未特殊处理,症状自行缓解。结论:CT引导下经皮肺活检是确诊肺曲霉病的一种安全、有效的方法。