基因技术在逆转肿瘤细胞多药耐药性上的应用

MDR(multiple drug resistance)调节剂或化学增敏剂可通过抑制P-gp输出泵的活动来逆转经典的耐药表型.应用MDR调节剂的一个障碍在于所需治疗剂量下的内在毒性.例如,环孢菌素A可引起心脏功能衰竭、高血压、高胆红素血症和免疫抑制等.并且肿瘤细胞可形成针对所用化学增敏剂的抵抗,即所谓的第三抵抗.因此,很有必要发展一些有选择性的、低毒高效的策略来克服MDR.研究表明,肿瘤细胞产生MDR的根本原因是某些基因不协调表达,导致某些与MDR相关的蛋白质和酶上调或下降,从而产生耐药.因此从理论上讲,在基因水平逆转MDR将是解决问题的关键.目前此方面的研究主要集中在MDR1基因及某些癌相关基因.反义核酸技术给耐药逆转提供了新的高效特异性的方法,较传统的MDR逆转方法有较多优势.近来发展起来的RNA干涉技术,为肿瘤多药耐药的基因逆转提供了新的方法.     

乳腺癌干细胞的富集及相关基因表达

目的通过微球体培养富集乳腺癌干细胞,并检测其相关基因的表达。方法将MCF-7乳腺癌细胞进行第一代微球体培养,7d后消化微球体获得单细胞悬液,取部分细胞进行第二代微球体培养,另一部分细胞则在胶原底物进行分化培养。于培养第11天收集第二代微球体细胞、分化细胞,采用流式细胞术进行干细胞比例分析;同时应用Real-time PCR技术检测β-catenin、CXCR4、SOX2、ALDH3A1 mRNA表达。结果流式细胞分析显示,微球体细胞和分化细胞的侧亚群细胞比例分别为(7.36±0.54)%和(4.32±0.42)%(P<0.05),CD55high比例分别为(17.41±1.09)%和(4.47±0.33)%(P<0.05)。Real-time PCR检测结果表明,微球体细胞与分化细胞相比,β-catenin、CXCR4、SOX2及ALDH3A1 mRNA表达分别上调了约1.5、5.0、4.0和5.7倍(P<0.01)。结论微球体细胞富集了较高比例的乳腺癌干细胞,且β-catenin、CXCR4、SOX2、ALDH3A1 mRNA呈现高表达。     

单克隆抗体C225对乳腺癌干细胞的抑制作用

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(C225)对乳腺癌细胞系MCF-7中乳腺癌干细胞的抑制作用.方法 MTT法检测C225对MCF-7细胞增殖的影响.将MCF-7进行微球体培养,根据培养液中是否加入表皮生长因子(EGF)和C225分为对照组、C225组、EGF组、EGF+ C225组;培养13 d,观察四组微球体形成大小及数量,计算微球体形成率(MFE);流式细胞术检测微球体细胞及常规培养MCF-7中CD44+CD24-细胞比例.结果 MCF-7细胞增殖抑制率随C225质量浓度的增加而上升.与对照组比较,C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24-细胞比例明显降低,分别为(0.61±0.04)% vs (1.44±0.09)% (P<0.01)和(3.50±0.29)% vs (9.07±0.52)% (P<0.01).与EGF组比较,EGF+C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24-细胞比例明显降低,分别为(0.68±0.04)% vs (1.61±0.05)% (P<0.01)和(4.00±0.58)% vs (10.47±0.79)% (P<0.01).常规培养MCF-7中CD44+CD24-细胞比例为(2.03±0.15)%,与EGF组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).EGF组与对照组微球体形成大小、MFE以及微球体中CD44+CD24-细胞比例的比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 C225对MCF-7中CD44+CD24-细胞有明显抑制作用.     

肿瘤患者心理痛苦管理:基于指南整合和应用方法的指南改编

目的 依据指南整合和应用方法(A Guideline Adaptation and Implementation Planning Resource,CAN-IMPLEMENT),对肿瘤患者心理痛苦管理的相关临床实践指南进行改编,制订适合临床情境的癌因性心理痛苦管理指南.方法 调查上海市癌症患者症状现况,基于CAN-I...     

MAPK信号转导通路在托瑞米芬非雌激素抗肿瘤中的作用

目的 探讨托瑞米芬(TOR)对乳腺癌细胞株MCF7的非雌激素抗肿瘤作用及促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在其中所发挥的作用.方法 采用SRB法测量TOR单独或联合MEK抑制剂PD98059对乳腺癌细胞株MCF7活性的抑制;Western blotting检测不同浓度TOR对MCF7细胞株磷酸化ERK的影响.结果 TOR抑制乳腺癌细胞株MCF7的活性,抑制强度呈浓度依赖性.PD98059与TOR联用,可显著增强TOR对MCF7细胞株的细胞毒作用,对细胞株抑制率大于两药单独应用之和.5、10、20μmol/L的TOR对MCF7细胞株中磷酸化ERK有明显的浓度依赖性抑制作用.结论 MAPK信号转导通路在TOR非雌激素抗肿瘤中发挥重要作用,MAPK通路抑制剂与TOR联合应用可发挥协同作用,增强其抗肿瘤效用.     

肿瘤干细胞传统治疗抵抗与靶向治疗

近年来,不断有资料表明,肿瘤干细胞和正常干细胞具有相似的性质.肿瘤干细胞导致肿瘤的发生、复发及转移.肿瘤干细胞对传统治疗方法的抵抗是肿瘤治疗失败的主要原因.同时,肿瘤干细胞位于特定的微环境中,肿瘤干细胞与微环境的相互作用显著影响肿瘤的进程.本文针对肿瘤干细胞及其微环境的靶向治疗做一综述.期望为肿瘤治疗带来新的思路.     

单克隆抗体C225对乳腺癌干细胞的抑制作用

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体西妥昔单抗(C225)对乳腺癌细胞系MCF-7中乳腺癌干细胞的抑制作用。方法 MTT法检测C225对MCF-7细胞增殖的影响。将MCF-7进行微球体培养,根据培养液中是否加入表皮生长因子(EGF)和C225分为对照组、C225组、EGF组、EGF+ C225组;培养13 d,观察四组微球体形成大小及数量,计算微球体形成率(MFE);流式细胞术检测微球体细胞及常规培养MCF-7中CD44+CD24－细胞比例。结果 MCF-7细胞增殖抑制率随C225质量浓度的增加而上升。与对照组比较,C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24－细胞比例明显降低,分别为(0.61±0.04)% vs (1.44±0.09)% (P<0.01)和(3.50±0.29)% vs (9.07±0.52)% (P<0.01)。与EGF组比较,EGF+C225组微球体体积明显减小,且MFE和微球体中CD44+CD24－细胞比例明显降低,分别为(0.68±0.04)% vs (1.61±0.05)% (P<0.01)和(4.00±0.58)% vs (10.47±0.79)% (P<0.01)。常规培养MCF-7中CD44+CD24－细胞比例为（2.03±0.15）%,与EGF组和对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）。EGF组与对照组微球体形成大小、MFE以及微球体中CD44+CD24－细胞比例的比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 C225对MCF-7中CD44+CD24－细胞有明显抑制作用。     

MAPK信号转导通路在托瑞米芬非雌激素抗肿瘤中的作用

目的探讨托瑞米芬(TOR)对乳腺癌细胞株MCF7的非雌激素抗肿瘤作用及促分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在其中所发挥的作用。方法采用SRB法测量TOR单独或联合MEK抑制剂PD98059对乳腺癌细胞株MCF7活性的抑制;Western blotting检测不同浓度TOR对MCF7细胞株磷酸化ERK的影响。结果TOR抑制乳腺癌细胞株MCF7的活性,抑制强度呈浓度依赖性。PD98059与TOR联用,可显著增强TOR对MCF7细胞株的细胞毒作用,对细胞株抑制率大于两药单独应用之和。5、10、20μmol/L的TOR对MCF7细胞株中磷酸化ERK有明显的浓度依赖性抑制作用。结论MAPK信号转导通路在TOR非雌激素抗肿瘤中发挥重要作用,MAPK通路抑制剂与TOR联合应用可发挥协同作用,增强其抗肿瘤效用。     

乳腺癌间质细胞对MCF-7细胞Wnt1、Notch 1、β-catenin表达及细胞迁移的影响

目的研究乳腺癌间质细胞对乳腺癌细胞的调控效应,探讨微环境在乳腺癌发生和发展中的作用。方法取5例乳腺癌患者手术后标本进行原代间质细胞的分离、培养和纯化,并行免疫组化鉴定。采用Transwell三维共培养体系,将原代间质细胞与乳腺癌细胞系(MCF-7)共培养3d(实验组),以2?S培养基单独培养MCF-7作为对照组。Real-time PCR检测MCF-7的Wnt1、β-catenin、Notch 1 mRNA表达;迁移实验观察MCF-7迁移状况。结果经免疫组化α-SMA、Vimentin、FSP抗体鉴定,证实纯化的细胞为活化的间质成纤维细胞。实验组MCF-7的Wnt1、Notch1表达明显上调,分别为对照组的2.09倍和3.75倍,而β-catenin表达下调为对照组的0.31倍;实验组MCF-7穿过膜的细胞数明显增多,为对照组的2.3倍。结论乳腺癌原代间质细胞对MCF-7 Wnt、Notch1、β-catenin mRNA表达具有调节作用,并促进MCF-7的迁移。     

新型冠状病毒肺炎与抗肿瘤药物治疗

新型冠状病毒感染的肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)疫情仍严重影响着世界各国的医疗卫生体系,而恶性肿瘤患者由于较低的免疫功能状态及更多的风险暴露,影响更甚。本文通过检索PubMed数据库中与本研究目的直接相关的国内外相关文献,并参考相关诊治指南,总结了国内外关于恶性肿瘤与COVID-19相关的研究数据,以论述该人群的个体防护、抗肿瘤治疗、合并感染的转归以及患者的临床管理策略。我们发现恶性肿瘤患者感染COVID-19的概率更高,临床预后更差,尤其是肺癌和血液系统肿瘤。全身化疗可能延缓人体对严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome corona virus 2,SARS-CoV-2)的清除时间,进而对COVID-19的临床结局产生负面影响,部分内分泌治疗药物、靶向药物对其影响较小,而免疫检查点抑制剂治疗方面的证据尚不够充分。临床工作中,加强肿瘤患者的个体防护、合理调整抗肿瘤治疗方案、优化临床诊治流程具有重要价值。