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1.
14-3-3σ调控p27抑制Rat1-Akt细胞增殖   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
目的: 研究腺病毒介导14-3-3·σ(Ad-14-3-3·σ)对Akt过表达Rat1-Akt细胞增殖的影响,并探讨其作用是否通过调控p27而实现。 方法: 通过5-溴-2′脱氧尿嘧啶(BrdU)实验检测Ad-14-3-3·σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响,并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3·σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响。 结果: Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率(45%)低于PBS处理组(100%)或Ad-β-gal转染的对照组细胞(98%)。14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位。 结论: 转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Rat1-Akt增殖,14-3-3σ通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性,阻断Akt介导的p27胞浆错位,从而发挥其抑制Rat1-Akt细胞增殖。  相似文献   
2.
14-3-3σ负调控Akt抑制Rat1-Akt细胞成瘤性   总被引:1,自引:2,他引:1       下载免费PDF全文
目的:研究腺病毒介导14-3-3·σ(Ad-14-3-3·σ)对Akt过表达Rat1-Akt细胞成瘤性的作用,并探讨其作用是否通过负调控Akt而实现。 方法:通过半体内和体内实验观察Ad-14-3-3·σ转染对Rat1-Akt细胞在裸鼠中成瘤性的影响;采用Western blotting方法检测转染14-3-3·σ基因后肿瘤组织内14-3-3·σ蛋白及其对Akt蛋白、Akt磷酸化活性和Akt磷酸化底物水平的影响。 结果:无论体外用Ad-14-3-3σ处理Rat1-Akt细胞,还是体内经瘤内注射Ad-14-3-3σ,均可见14-3-3·σ可使荷瘤鼠肿瘤体积显著缩小(P<0.05),出现肿瘤的时间推迟,其中以长时间不间断给药疗效最好;转染14-3-3·σ基因治疗组的肿瘤组织中Akt蛋白、Akt-Thr308位点磷酸化活性及Akt磷酸化底物水平低于转染Ad-β-gal或PBS处理的对照组。 结论:14-3-3σ可抑制Rat1-Akt细胞在裸鼠中的成瘤性,14-3-3σ通过负性调控Akt蛋白水平和磷酸化活性而抑瘤。  相似文献   
3.
目的通过对人内皮抑素小环载体在真核细胞中的表达和生物学效应的研究,探讨小环载体作为生物治疗载体的可行性。方法将mc-hES、pcDNA-hES分别转染人肝癌细胞HepG2后,通过ELISA、RT-PCR和Westernblot观察hES表达。MTT法检测其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖抑制作用。结果 mc-hES和pcDNA-hES均能表达hES,mc-hES能明显抑制HUVEC的生长,而对HepG2无明显作用(P〈0.05)。在相同条件下,小环较常规质粒在体外能快速介导转基因的表达,且较传统质粒高6~8.3倍。结论 mc-hES较普通质粒pcDNA-hES在肝癌细胞中能高效表达转基因,为小环载体进一步研究提供了很好的实验基础。  相似文献   
4.
5.
1临床资料患者,男,38岁,以“体检发现胆囊结石2 a”为主诉入院。无腹痛,无反酸、嗳气,无发热、黄疸。体检:生命体征平稳,皮肤、巩膜无黄染,腹平软,无压痛及反跳痛,肝右肋缘下未触及,Murphysing(-)。2 a前B超提示胆囊炎并胆囊结石。入院后给予相关检查,B超提示:萎缩性胆囊炎并胆囊结石。于2006年12月3日在全身麻醉下行胆囊切除术,术中见肝脏形态、色泽正常,在正常胆囊区未见胆囊,胆总管未见扩张,反复查找未见胆囊,疑为肝内胆囊,遂术中B超探查,仍未见胆囊,之后用细针穿刺胆总管,用38%泛影葡胺40 m l造影,胆总管、肝总管左右肝内胆管及分支显…  相似文献   
6.
【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序,将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中,然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM 2000法转染HEK293细胞包装携带BDNF目的基因的重组腺病毒,少量提取重组腺病毒DNA检测证实为复制缺陷型BDNF基因重组腺病毒后大量扩增。蛋白电泳及Western blot法初步检测BDNF目的基因在HEK293细胞中的表达。【结果】成功构建了携带大鼠BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒。并证实其在HEK293细胞中可高水平表达BDNF目的基因。【结论】利用体外连接法可方便、快捷地构建携带BDNF目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并可在体外高水平表达表达其所携带的目的基因。  相似文献   
7.
泮托拉唑治疗十二指肠溃疡临床分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
泮托拉唑(Pantoprazle)是一种二烷氧基吡啶基苯并咪唑化合物能特异性抑制胃壁细胞的 H~+,K~+-ATP 酶,使壁细胞内的 H~+不能转运到胃腔中,从  相似文献   
8.
<正>慢性前列腺炎是泌尿外科和男科临床上最常见的炎症性疾病之一,即使长期治疗,其症状也总是反复,属于难治性疾病,因机制不完全清楚,尚无很好的治疗方法。我院泌尿外科和男科门诊2007年12月至2009年12月应用加替沙星联合普适泰(舍尼通)治疗慢性前列腺炎患者130例,取得了满意疗效,现报告如下。  相似文献   
9.
目的设计合成7-苯甲酰基中氮茚-1-羧酸乙酯类化合物,并对其抗HIV-1活性进行初步研究。方法以异烟酸、溴乙酸苄酯、丙炔酸乙酯为原料,经取代、Friedel-Crafts反应、1,3-偶极环加成反应、水解、缩合得到目标化合物;采用荧光筛选方法对目标化合物抗HIV-1病毒感染因子(viral infectivity factor,VIF)活性进行评价。结果共合成30个未经文献报道的新化合物,其结构经1H-NMR、13C-NMR、HRMS确证;活性结果表明,化合物30、31、36、37等4个化合物抗HIV-1活性与先导化合物相当。结论 7-苯甲酰基中氮茚-1-羧酸乙酯类化合物作为HIV-1 VIF复合物抑制剂,中氮茚环与取代芳环之间含3~4个原子长度为保持活性所必须,进一步的构效关系值得继续研究。  相似文献   
10.
重组内皮抑素对肿瘤血管结构和乏氧改善作用的实验观察   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 观察重组内皮抑素作用下小鼠Lewis肺癌移植瘤在血管退化前是否存在血管正常化时间窗,在此时间窗内肿瘤乏氧是否改善.方法 激光共聚焦显微镜动态观察重组内皮抑素作用下肿瘤血管的形态学变化,免疫组化染色检测不同时间段肿瘤乏氧细胞比例,观测肿瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线.结果 重组内皮抑素处理后肿瘤血管密度逐渐下降,连续治疗9 d较对照组下降最为明显.重组内皮抑素处理后周细胞覆盖内皮细胞比例逐渐增加,第3天开始明显增加,第5天增加最明显,第7天后明显下降.对照组基底膜与内皮细胞连接松散,厚度增加,而重组内皮抑素处理后,基底膜与内皮细胞连接紧密,厚度下降.在重组内皮抑素处理后第5天肿瘤乏氧细胞比例下降最明显,连续5 d用重组内皮抑素,肿瘤生长未见加快.结论 重组内皮抑素能使肿瘤血管正常化,其时间窗为治疗后3~7 d;此时肿瘤氧供明显改善,为临床联合应用放疗和重组内皮抑素提供了实验依据.
Abstract:
Objective To investigate whether recombinant human endostatin can create a time window of vascular normalization prior to vascular pruning to alleviate hypoxia in Lewis lung carcinoma in mice. Methods Kinetic changes in morphology of tumor vasculature in response to recombinant human endostatin were detected under a confocal microscope with immunofluorescent staining in Lewis lung carcinomas in mice. The hypoxic cell fraction of different time was assessed with immunohistochemical staining . Effects on tumor growth were monitored as indicated in the growth curve of tumors . Results Compared with the control group vascularity of the tumors was reduced over time by recombinant human endostatin treatment and significantly regressed for 9 days. During the treatment, pericyte coverage increased at day 3, increased markedly at day 5, and fell again at day 7. The vascular basement membrane was thin and closely associated with endothelial cells after recombinant human endostatin treatment, but appeared thickened, loosely associated with endothelial cells in control tumors. The decrease in hypoxic cell fraction at day 5 after treatment was also found. Tumor growth was not accelerated 5 days after recombinant human endostatin treatment. Conclusions Recombinant human endostatin can normalize tumor vasculature within day 3 to 7, leading to improved tumor oxygenation. The results provide important experimental basis for combining recombinant human endostatin with radiation therapy in human tumors.  相似文献   
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