抗VEGF单克隆抗体偶联5-FU纳米微粒的初步研究

目的： 为了提高5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)的抗癌活性，采用抗VEGF单克隆抗体与 5-FU 聚乳酸纳米微粒交联结合制备具有靶向功能的免疫纳米微粒。 方法： 采用抗VEGF单克隆抗体与已制备的 5-FU 聚乳酸纳米微粒(5-FU-NPs)以化学键偶联连接的方法制备具有靶向功能的5-FU免疫纳米微粒(5-FU-Ab-NPs)，考察其形貌、粒径分布、体外释放和免疫活性等性能。结果： 5-FU-Ab-NPs仍呈规则球形，粒径约为（202±23）nm，体外释放实验表明该5-FU-Ab-NPs与5-FU-NPs具有相似缓释特性，免疫学检测和电镜检视显示偶联后的抗VEGF单克隆抗体免疫活性保持原活性的80%以上。结论： 5-FU-Ab-NPs保持原5-FU-NPs缓释药物的特点，具有双重活性功能，即免疫导向和缓释药物,有利于提高肿瘤局部药物浓度。     

肝细胞癌NOS3和VEGF表达的临床意义

【目的】研究肝细胞癌组织中一氧化氮合酶3(NOS3)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义。【方法】通过免疫组化的方法检测51例肝细胞癌组织NOS3和VEGF的表达。【结果】NOS3和VEGF在51例肝细胞癌组织中的阳性率分别为53%和63%;NOS3在复发组的阳性率明显高于无复发组(P<0.01);VEGF在小肝癌组、门静脉癌栓组和2年内复发组的阳性率分别高于大肝癌组、无门静脉癌栓组和2年内未复发组(P<0.05);肝细胞癌组织中NSO3和VEGF的表达呈正相关(P<0.001)。【结论】NOS3、VEGF与肝细胞癌门静脉癌栓形成和预后等生物学行为有密切关系。     

人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其用于观察载siRNA纳米微粒体内效应的研究

 目的：探讨建立人胰腺癌PANC-1裸鼠移植瘤模型的最佳实验方法,并应用该模型进行载基因纳米微粒体内效应的研究。方法：将不同数量PANC-1细胞悬液接种于BALB/c (nu/nu)小鼠右侧背部皮下,当肿瘤体积达100 mm3时尾静脉注射siRNACY5.5纳米复合物进行活体荧光成像。此外,于尾静脉注射负载siRNAKras纳米复合物,蛋白印迹及免疫组织化学染色法观察肿瘤组织Kras蛋白表达水平。结果：1×107 cells/300 μL 接种成瘤率达100%,成瘤时间＜2周。荧光呈像及组织学检查显示载siRNA纳米微粒可靶向聚集在肿瘤组织发挥体内基因沉默效应。结论:本研究报道的人胰腺癌裸鼠移植瘤模型建立方法成瘤率达100%,成瘤时间短,是研究药物示踪和观察疗效的理想模型。     

广州地区胰腺癌相关抑郁症的临床发病状况调查

目的 探讨我国广州地区胰腺癌相关抑郁症的临床发病状况.方法 采用多中心、前瞻性调查设计,纳入2007年6月至2009年6月广州地区4家医院收治的50例胰腺癌、60例肝癌、50例食管癌、50例胃癌及52例结直肠癌住院患者.采用汉密顿抑郁量表-24(HAMD-24)评估患者的抑郁状况.结果 胰腺癌伴发抑郁症的发生率为78.0%(39/50),显著高于肝癌的60.0%(36/60)、胃癌的36.0%(18/50)、食管癌的24.0%(12/50)、结直肠癌的19.2%(10/52)(P值均＜0.05).其中胰腺癌患者中有24.0%(12/50)为严重抑郁症,明显高于肝癌的10.0%(6/60)、胃癌的4.0%(2/50)、食管癌及结直肠癌患者的0(P值均＜0.05).胰腺癌晚期患者抑郁症发生率为94.3%,明显高于早期患者的46.7%(P＜0.01);接受化疗患者的抑郁症发生率为92.3%,显著高于手术患者的62.5%(P＜0.05).结论 与消化系统其他癌症相比,胰腺癌相关抑郁症的临床发生率最高,且抑郁程度较重.     

大容量核糖体展示抗体库的构建与初步鉴定

目的构建库容量大、多样性好的核糖体展示单链抗体库,为进一步筛选单链抗体奠定基础。方法对2006年10月1日至11月31日收集于中山大学附属第二医院的人外周血(健康成人2名,胃癌3例,肠癌3例,胰腺癌1例,每例各5mL,新生儿2名各2mL)分离淋巴细胞,提取RNA;利用RT-PCR克隆出全套重链可变区基因(variable region of heavy chain,VH)、轻链可变区基因(variable region of light chain,VL);然后利用重叠延伸PCR技术连接构建VH-VL单链抗体库。并通过连接T-Vector转化E.coli JM109大肠埃希菌,经蓝白筛选,挑取阳性克隆测序以鉴定单链抗体组装。结果试验成功构建了单链抗体核糖体展示模板,其库容达1.1×1013。结论大容量核糖体展示单链抗体库的构建为筛选多种人源性单链抗体奠定了基础。     

SDF-1α/CXCR4轴通过诱导胰腺癌上皮-间充质转化促进肿瘤迁移和侵袭

目的:探讨SDF-1α/CXCR4轴对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测4种胰腺癌细胞株CXCR4 mRNA的表达。Transwell实验检测外源性SDF-1α及其受体CXCR4靶向抑制剂AMD3100对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。MTS法检测外源性SDF-1α及AMD3100对胰腺癌细胞活力的影响。Western blot法检测外源性SDF-1α及AMD3100对胰腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)相关标志物表达的影响。结果:(1) 4种胰腺癌细胞株均不同程度地表达CXCR4 mRNA,其中PANC-1细胞株表达量最高。(2)外源性SDF-1α可增强PANC-1细胞的迁移和侵袭能力,该作用可被AMD3100所阻断。(3)外源性SDF-1α处理PANC-1细胞72 h可增强细胞活力,该作用可被AMD3100阻断。(4)外源性SDF-1α通过上调SNAIL和TWIST促使PANC-1细胞发生EMT,该作用可被AMD3100所阻断。结论:SDF-1/CXCR4轴通过促进胰腺癌细胞发生EMT而促进肿瘤迁移和侵袭。     

胃肠道间质瘤的临床及病理分析

目的:探讨胃肠道间质瘤的临床及病理特征。方法:回顾性分析52例经病理证实的胃肠道间质瘤的临床和病理资料。结果:消化道出血(65%)是最常见的临床表现;梭形细胞型35例(67%),上皮样细胞型7例(13%),混合型10例(19%)。免疫组织化学染色CD11794%、CD3479%、SMA48%、desmin44%、S-100蛋白9.6%;良性9例(17%),交界性20例(38%),恶性23例(44%);CD117、CD34在良性、交界性、恶性间质瘤中的表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:胃肠道间质瘤的临床表现复杂多样,误诊率高;免疫组织化学标记CD117对胃肠道间质瘤有确诊意义。     

虫草发酵菌丝体中腺苷和虫草素含量的检测

目的:建立同时检测虫草菌丝体样品中腺苷和虫草素含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法:样品经纯水超声波提取、离心和膜过滤,ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)液相色谱柱分离,以水-甲醇(85:15)洗脱,流速1 ml/min;检测器以260 nm波长检测。结果:待测成分在10 min内达到良好的基线分离,线性范围广,腺苷和虫草素线性相关系数分别为0.9997、0.9999,检出限为0.05μg/ml。结论:该方法准确度和精密度良好,方法学考察符合标准,是一种简便、快速、可行的测定虫草菌丝体样品中腺苷和虫草素的方法。     

载三氧化二砷纳米微粒对胰腺癌腹水抑制效应的实验研究

目的探讨用纳米载体包裹的三氧化二砷(As2O3)在荷胰腺癌SCID小鼠体内的分布及对腹水生成和存活时间的影响。方法用超声乳化法制备载As2O3乳酸羟基乙酸共聚物纳米微粒(As2O3-NPs),用体外释药方法研究其释放特性。于小鼠右前腋下接种SW1990细胞12d后,静脉给As2O3-NPs5.0mg/kg体重,采用高压液相色谱法(HPLC)测定血浆、正常和肿瘤组织中As2O3含量。观察不同浓度As2O3-NPs对腹水生成的抑制作用。观察10.0mg/kg体重As2O3-NPs处理的胰腺癌小鼠的存活期、体重、腹腔渗透性及腹水中凋亡细胞的变化。结果As2O3-NPs直径为(210±23)nm,含药量为29%(重量比),体外释药速度明显慢于单纯的As2O3。As2O3-NPs在体内呈浓度依赖性抑制腹水形成,减少腹膜的通透性,增加腹水内凋亡细胞量,延长荷瘤小鼠的存活时间。结论As2O3-NPs具有明显的缓释药物功能,能有效积聚在肿瘤组织,并抑制癌性腹水生成,是一种有希望的抗肿瘤药物。     

恶心、呕吐、腹泻、色素沉着——查房选录(313)

1 病历摘要 患者男,41岁.因恶心、呕吐、腹泻伴上腹部不适4 d于2007-08-08收入我科.患者于4d前受凉后出现恶心、呕吐,呕吐物为胃内容物,非喷射性,每日呕吐数次,无呕吐咖啡样物,腹泻3～5次/日,无排水样便及黏液脓血便,无里急后重感,伴上腹部不适,位于剑突下,呈钝痛,食欲差,偶有饱胀感.