敲减OGT对肝细胞脂肪合成的作用研究

目的探讨敲减N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(OGT)对肝细胞脂肪合成的影响。方法建立L02正常肝细胞脂肪变模型,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测OGT及O-连接糖基化(O-GlcNAc)表达。建立L02细胞OGT敲减细胞系,油酸诱导后检测其脂质形成能力。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测脂肪合成相关酶的mRNA和蛋白表达。采用独立样本t检验。结果Western blot显示L02细胞脂肪变后OGT及O-GlcNAc表达均升高(P<0.05)。shOGT慢病毒感染L02细胞后,OGT mRNA相对表达水平明显下调(P<0.01)。油红O染色显示,L02 shOGT细胞内脂质减少,qRT-PCR显示系列脂肪合成酶:乙酰辅酶A羟化酶、脂肪酸合成酶和硬脂酰辅酶A去饱和酶mRNA相对表达水平均降低,差异具统计学意义(P值均<0.05),蛋白水平与mRNA相对表达量一致。结论敲减OGT后可通过降低O-GlcNAc水平抑制肝细胞脂肪合成。     

小鼠间断性禁食模型的建立及其对葡萄糖内稳态的影响

目的探寻稳定、可靠替代传统热量限制的小鼠模型建立方法及其对葡萄糖内稳态的影响。方法将40只SPF级16周龄C57BL/6J小鼠(雌雄各半)随机按性别及喂养方式分为四组。自由饮食组给予基础饲料自由取食,间断禁食组正常饮食和禁食各24 h交替进行,禁食日可自由饮水。监测各组小鼠体质量和血糖变化情况,并与建模前和建模12周行经腹腔葡萄糖耐量实验和经腹腔胰岛素耐量实验。结果小鼠间断性禁食12周后,体质量和空腹血糖未见明显变化。腹腔注射葡萄糖后血糖上升幅度减轻,腹腔注射胰岛素后血糖下降比例增加。与对照组相比,上述耐量实验曲线下面积均明显减低(P0.05)。结论小鼠间断性禁食后胰岛素敏感性增加,糖耐量改善,且该造模方法操作简单,可作为替代传统热量限制模型的有效选择。     

敲减CCAAT/增强子结合蛋白α通过增加O-GlcNAc糖基化水平促进肝癌细胞体外增殖*

目的 探讨CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）在肝癌细胞增殖中的作用及其机制。方法 利用靶向C/EBPα的RNAi慢病毒感染Hep3B肝癌细胞系,构建C/EBPα肝癌细胞系敲减模型。采用qRT-PCR和Western blot分别检测C/EBPα mRNA和蛋白表达水平,采用CCK-8检测敲减C/EBPα后对Hep3B细胞增殖的影响,采用在正常高葡萄糖（NG,4.5 g/L）和低葡萄糖（LG,1 g/L）条件下培养细胞的增殖变化,采用Western blot法检测不同葡萄糖浓度条件下在C/EBPα敲减细胞和对照细胞乙酰葡糖胺转移酶（OGT）、乙酰葡糖胺水解酶（OGA）和整个O-GlcNAc糖基化水平。结果 靶向C/EBPα的RNAi慢病毒感染Hep3B肝癌细胞后,C/EBPα mRNA水平下调了（7.5±2.3）倍（P<0.05）,蛋白表达水平下调了（8.8±0.25）倍（P<0.001）,提示C/EBPα敲减细胞系构建成功;敲减C/EBPα后明显促进肝癌细胞的体外增殖;在低葡萄糖条件下刺激48 h和72 h,敲减C/EBPα分别促进细胞增殖15.4%（P<0.05）和25.0%（P<0.01）;敲减C/EBPα后细胞OGA蛋白表达水平在正常高糖和低糖刺激24 h和48 h时分别下调了70.1% （P<0.01）、51.4%（P<0.05）和61.2%（P<0.05）,整体O-GlcNAc糖基化表达水平上调,在低糖刺激48 h时升高80.6%。结论 敲减转录因子C/EBPα可以提高细胞整体O-GlcNAc糖基化水平,从而促进肝癌细胞的体外增殖。     

SIRT6与肿瘤关系的研究进展

沉默信息调节因子6（SIRT6）是NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶,其参与细胞基因组稳定、糖脂代谢和炎症等多种生物学过程。近来研究表明SIRT6可通过自身酶活性调节与肿瘤发生、增殖及代谢等多种相关基因的表达和蛋白活性,继而参与肿瘤的发生发展。本文就SIRT6的生物学功能、其在肿瘤细胞生物学行为中的作用及在肿瘤诊断治疗中的潜在价值作一综述。     

极光激酶B抑制剂的研究进展

极光激酶是维持细胞基因组完整性的关键丝氨酸/苏氨酸有丝分裂调节激酶,由3个成员极光激酶A、B、C组成,其中极光激酶B在有丝分裂中起着至关重要的作用。极光激酶B在多种恶性肿瘤中过表达,故极光激酶B被作为有吸引力的抗癌药物靶点被广泛研究,目前已经开发了多种靶向极光激酶B的小分子抑制剂。介绍了极光激酶B特异性抑制剂、进入临床试验阶段的泛极光激酶抑制剂等的研究进展,希望为极光激酶B抑制剂的开发和临床使用提供参考。     

肠系膜恶性孤立性纤维瘤1例

孤立性纤维瘤（solitary fibrous tumor,SFT）是临床甚为罕见的间叶性梭形细胞肿瘤,可见于体腔或器官内,病理表现为良性或者低度恶性[1]。发生于肠系膜的恶性SFT更为罕见,国内尚未报道,国外也仅见散在个案报道。现将我科收治1例发生于降结肠系膜根部的SFT病例报告如下。     

PEG-rhG-CSF预防化疗后中性粒细胞减少症的随机对照临床研究

目的:比较聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)预防化疗后中性粒细胞减少症的有效性和安全性。方法:采用随机开放、平行分组的方法,乳腺癌患者接受1个周期TAC方案化疗,随机分配到60、100、120μg/kg PEG-rhG-CSF组和5μg/(kg.d)rhG-CSF组。结果:共入组12例,5μg/(kg.d)rhG-CSF对照组和60、100、120μg/kg PEG-rhG-CSF试验组患者ANC<1.5×109/L分别持续1、2、2和2.75 d,中性粒细胞减少症的发生率差异无统计学意义。受试药物的第2峰低于对照药物。结论:PEG-rhG-CSF一次给药的疗效和不良反应与rhG-CSF多次给药相似。