2型糖尿病患者非酶促糖化低密度脂蛋白与血糖和血脂的关系

目的：分析２型糖尿病患者非酶促糖化低密度脂蛋白形成与血糖和血脂的关系,以及对胆固醇代谢的影响。方法：随机选择５２例２型糖尿病患者和１７例非糖尿病患者对照,测定其空腹血中血糖、血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、β脂蛋白浓度以及糖化低密度脂蛋白指数。结果：糖化低密度脂蛋白指数与血糖、血清甘油三酯、β脂蛋白、总胆固醇以及低密度脂蛋白胆固醇均呈线性正相关,其相关系数分别为ｒ＝０．８７０（Ｐ＜０．０５）,ｒ＝０．９３８（Ｐ＜０．０５）,ｒ＝０．９２（Ｐ＜０．０１）,ｒ＝０．９９３（Ｐ＜０．０５）和ｒ＝０．９９９（Ｐ＜０．０００５）。结论：高血糖和高甘油三酯血症可促使低密度脂蛋白高糖化形成,进而可干扰胆固醇代谢,导致低密度脂蛋白胆固醇以及总胆固醇浓度升高。     

转染癌胚抗原基因的人树突状细胞疫苗表达的研究

目的　探索使用质粒转导制备转基因DCs疫苗的方法。方法　采用细胞因子rhIL 4和rhGM CSF诱导培养法制备人外周血树突状细胞 ,用Lipofectine向人DCs转染含人CEA真核表达质粒。结果　转染组DCs培养上清CEA含量明显高于未转染组培养上清CEA含量。结论　人CEA真核表达质粒转染DCs可内源性表达CEA     

Expression Profile of Metastasis-associated Genes in Esophageal Squamous Cell Carcinoma

Esophageal cancer (EC) is one of the mostcommon fatal cancers in the worldwide , and ischaracterized by its high metastasis ,local lymphnode and blood metastasis at early stage , whichmay be the key factors of its recurrence and poorprognosis[1]. Thus ,better elucidation of molecularmechanism during metastasis is expected to i m-prove prevention and treat ment of EC. Many stud-ies have contributed to advance inits molecular as-pects . This li mited information based on singlegene ,however ,i…     

氯沙坦通过减少细胞凋亡减轻心肌肥大大鼠的骨骼肌萎缩

目的:探讨细胞凋亡在心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩中的作用及氯沙坦对心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩的影响. 方法:雄性SD大鼠42只随机分成3组(n=14):Ⅰ组(对照组),Ⅱ组(心肌肥大组),Ⅲ组(心肌肥大氯沙坦治疗组). Ⅱ组和Ⅲ组分别一次性腹腔注射野百合碱(30 mg/kg)以诱导心肌肥大. 2 wk后,Ⅲ组大鼠用氯沙坦[10 mg/(kg·d)]灌胃. 再过2 wk后全部处死动物,以腓肠肌(GAS)的质量和体质量比作为骨骼肌萎缩的指标. TUNEL法检测GAS细胞凋亡. 免疫组化和Western Blot法检测GAS Bcl-2,Bax的表达,并把Bax/Bcl-2值作为凋亡的程度. 结果:与Ⅰ组比,Ⅱ组的GAS细胞凋亡率明显增加[(147.6±32.6)‰ vs (4.1±1.8)‰, P<0.05],并且GAS出现了萎缩. 与Ⅱ组比,Ⅲ组的GAS细胞凋亡率明显减少[(46.2±12.3)‰ vs (147.6±32.6)‰, P<0.05],GAS萎缩减轻. Bcl-2的表达Ⅱ组比Ⅰ组明显减少(P<0.05),Bax的表达明显升高(P<0.05). 而Ⅲ组与Ⅱ组相比Bcl-2的表达明显升高(P<0.05),Bax的表达明显减少(P<0.05). Ⅱ组GAS的Bax/Bcl-2值明显升高,而Ⅲ组Bax/Bcl-2值明显下降. 结论:细胞凋亡在心肌肥大大鼠骨骼肌萎缩中发挥着重要的作用,可能是骨骼肌萎缩的原因之一,氯沙坦可能通过改变Bax/Bcl-2值减轻心肌肥大大鼠骨骼肌的凋亡和萎缩.     

曲古霉素A对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的作用及机制

目的探讨曲古霉素A（TSA）对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的影响及机制。方法用AnnexinV-FITC和PI进行双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测TSA对食管癌细胞凋亡相关基因表达的影响。结果 1.0μmol/L的TSA诱导EC9706细胞凋亡率增加（P〈0.05）,且呈浓度依赖性;0.5μmol/L的TSA作用48 h后细胞凋亡率增加（P〈0.05）,呈时间依赖性。TSA处理的EC9706细胞Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;TSA诱导EC9706细胞caspase-8及caspase-9裂解活化,且随作用时间延长逐步升高。结论一定量的TSA可以诱导EC9706细胞凋亡,凋亡原因与Bax表达增强、Bcl-2减少以及凋亡细胞中caspase-8及caspase-9介导的caspase-3活化有关。     

转染pcDNA3-hCEA的人树突状细胞对MGC803细胞的作用

目的：观察转染含人癌胚抗原（CEA）真核表达质粒pcDNA3-hCEA的人树突状细胞（DC）对胃癌细胞MGC803的抑制作用.方法：采用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养法制备人外周血DC并用Lipofectamine向人DC转染pcDNA3-hCEA.RT-PCR检测转染细胞hCEA的表达,观察DC-hCEA细胞诱导的致敏的T淋巴细胞（CTL）对胃癌细胞MGC803的杀伤效应.结果：DC-hCEA诱导的CTL对胃癌细胞MGC803的杀伤效应强于DC（P＜0.05）.结论：编码CEA基因的真核表达质粒转染的人DC能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应.     

原代脐静脉内皮细胞与脐静脉内皮细胞株的生物学特性比较

目的:建立高效脐静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cell,HUVEC)体外培养方法,与HUVEC株生物学特性进行对比研究,为组织工程及相关医学基础研究提供更好的细胞来源.方法:在新鲜脐静脉内灌注2.5 g/L胰蛋白酶消化获得内皮细胞,内皮细胞培养基(endothelial cellmedium,ECM)进行培养;RPMI1640培养HUVEC株.比较两组细胞形态;免疫组化、RT-PCR检测vWF,CD144的表达;Western Blot检测两组冻存复苏后细胞vWF,CD144蛋白水平的表达.结果:原代HUVEC体外生长2～3 d可铺满单层,细胞呈梭形、饱满,漩涡状排列生长,传代后可见管腔样结构;HU-VEC株胞质多颗粒,细胞单薄.免疫组化原代HUVEC的vWF和CD144表达明显高于HUVEC株[vWF分别为(142.7±3.3),(113.6±0.7);CD144分别为(118.6±0.5),(74.2±0.4);P<0.01].在mRNA水平,原代HUVEC基因CD144(577 bp)的表达量为HUVEC株的(3.15±0.12)倍(P<0.05);vWF(434 bp)表达量为HUVEC株的(6.15±0.37)倍(P<0.05).蛋白水平冻存复苏的原代HUVEC的CD144(135ku)表达量为HUVEC株的(2.07±0.31)倍(P<0.05);vWF(210 ku)表达量为HUVEC株的(5.38±0.23)倍(P<0.05).结论:脐静脉灌注胰蛋白酶消化法配合ECM培养可迅速获取大量内皮细胞,其生物学特性明显优于HUVEC株,是组织工程及相关医学基础研究更好的细胞来源.     

曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞凋亡的影响

目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响.方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化.结果:对照组、0.3、0.5及1.0 μmol/L TSA组作用24 h后,EC1细胞凋亡率分别为(2.18±0.37)%、(2.96±0.34)%、(7.41±1.01)%和(14.03±1.23)%,Bax蛋白表达水平分别为(0.42±0.23)、(0.45±0.11)、(1.16±0.28)和(1.89±0.30),Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.15 ±0.14)、(1.11±0.15)、(0.59±0.06)和(0.40±0.07),4组间3指标差异均有统计学意义(F=211.96,25.12和33.68,P均<0.001),随TSA作用浓度的增加,EC1细胞凋亡率、Bax蛋白表达均增加,Bcl-2表达减少.结论:一定剂量的TSA可以诱导EC1细胞凋亡,凋亡的发生町能与Bax表达增加和Bcl-2表达减少有关.     

牛膝多糖与锌对小鼠树突状细胞增殖分化和抗原提呈能力的影响

目的 研究牛膝多糖与锌单用及合用在异源性抗原负载的条件下对小鼠树突状细胞 (DC) 增殖分化和抗原提呈能力的影响,并通过体内实验证实其对荷瘤小鼠的免疫效应,探讨其发生机制。方法 无菌处死正常小鼠获取其骨髓细胞,粒细胞-巨噬细胞刺激因子 (GM-CSF) 和白细胞介素-4 (IL-4) 体外诱导骨髓细胞生成 DC,同时培养液中加入不同质量浓度的牛膝多糖 (200、300、400 μg/mL)、锌 (0.02 μg/mL)。通过显微镜、流式细胞检测技术观察牛膝多糖、锌单用与合用在异源性抗原负载的条件下对 DC 的影响,并通过体内实验观察对 H22荷瘤小鼠脾指数、胸腺指数及肿瘤质量的影响。结果 牛膝多糖和锌单用在异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓源性 DC 的分化、成熟及表面标记 CD86、CD11a 的表达,增强 DC 诱导的细胞毒性T淋巴细胞反应,能够使荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的质量增加,明显抑制肿瘤的生长,并存在明显量效关系;中剂量为正性效应,高剂量为负性效应;但牛膝多糖和锌合用并不协同增强效应。结论 牛膝多糖和锌在异源性抗原负载的条件下能够通过刺激 DC 的分化成熟,提高其抗原提呈能力,进而起到提高机体细胞免疫的作用。