含Hp特异性抗体羊奶2种检测方法的比较及初步临床效果

［摘要］ 目的比较含抗Hp特异性抗体羊奶的2种检测方法,并初步观察抗体羊奶的临床效果。 方法用国际标准菌株ATCC26695及ATCC26695、SS1混合菌液制备2种含抗Hp特异性抗体的羊奶,分别用双相免疫扩散试验及酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 法检测羊奶中抗Hp特异性抗体含量,并比较二者检测效果;30名受试者按照随机抽样法分为试验组和对照组,试验组每天饮用抗体羊奶,对照组饮用普通羊奶,连续饮用30 d,用14C尿素呼气试验(14C urea breath test,14C-UBT) 评估效果。 结果2种方法检测结果均证实了抗体羊奶中抗Hp特异性抗体的存在,ELISA结果显示,2种抗体羊奶中抗Hp特异性抗体含量高于对照孔,差异有统计学意义(P＜0.05),且随着稀释倍数增大,抗体含量逐渐降低;2种抗体羊奶间抗体含量差异无统计学意义(P＞0.05)。初步临床试验证明试验组经服用抗体羊奶后有效率为66.6%,与服用前比较差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论2种检测方法均可较好地反映抗体羊奶中抗Hp特异性抗体存在,ELISA法简便、快速,能够更为精确地定量检测抗体含量,所获得的结果更为可靠。临床试验表明抗体羊奶能够有效降低患者14C-UBT数值,具有良好的临床应用前景。     

弥漫大B细胞淋巴瘤患者血清IL-24及IL-6浓度检测 的临床意义

目的：探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者外周血清IL-24及IL-6的浓度及其临床意义。方法：收集43例DLBCL患者和33例正常对照人群外周血血清,ELISA法检测IL-24及IL-6的浓度,分析血清IL-24及IL-6浓度与患者临床病理指标之间的关系;并计算患者的国际预后指数（IPI）。结果：与正常对照组[IL-24浓度为（58.32±11.81）μg/mL,IL-6为（24.63±7.73）μg/mL]相比,DLBCL患者血清IL-24浓度[（42.18±8.48）μg/mL]明显降低（P<0.01）,而IL-6浓度[（45.29±12.71）μg/mL]明显升高（P<0.01）,且二者浓度呈明显负相关（r=-0.414,P<0.05）;同时血清IL-24及IL-6浓度与患者临床分期、肿瘤细胞侵犯骨髓状态及IPI均密切相关（P<0.01）,而与患者年龄及性别均无明显相关关系（P>0.05）。发生骨髓转移组患者血清中IL-24较正常对照组和未转移组均明显降低（P<0.01）,而IL-6浓度明显升高（P<0.01）;同时随着骨髓转移程度的增加,该趋势更为明显。IPI指数>2的患者,外周血IL-24浓度较IPI指数<2的患者明显降低,而IL-6浓度明显升高（P<0.01）。结论：DLBCL患者血清IL-24浓度较低及IL-6浓度较高可能是患者临床症状较重,预后较差的预测指标。血清IL-24及IL-6浓度测定可作为DLBCL的辅助诊断及监测指标,为临床治疗提供科学依据。     

食管鳞状细胞癌患者血清HMGB1和IDO水平的变化及其临床意义

目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）患者血清中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）的表达水平并探讨两者与临床病理特征及淋巴细胞亚群的相关性。方法：选取2021 年3月至2022 年8月在河北医科大学第四医院初次住院治疗的95 例ESCC 患者作为ESCC 组,另选取40 例健康体检人群作为对照组。ELISA 法检测全部研究对象的血清HMGB1和IDO水平及不同组ESCC细胞培养上清中HMGB1、IDO和p65水平,流式细胞术检测全部研究对象外周血淋巴细胞亚群水平。WB法检测仅敲低HMGB1基因表达或敲低HMGB1后再加入NF-κB信号通路激活剂对ESCC细胞HMGB1、IDO和p65表达的影响。结果：ESCC 组患者血清HMGB1 和IDO 水平明显高于对照组（均P<0.01）;血清HMGB1 和IDO 表达水平升高是ESCC 临床进展的独立危险因素（均P<0.01）,二者联合检测对ESCC 临床进展预测价值更高（P<0.01）;血清HMGB1 和IDO 与ESCC患者的T分期、N分期和临床分期有明显关联（均P<0.05）; ESCC组患者血清HMGB1与外周血CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、 B细胞和NK细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg 细胞百分率呈显著正相关（均P<0.05）,血清IDO 与外周血CD3+ T细胞百分率和绝对计数值、CD4+ T细胞百分率和绝对计数值、CD8+ T细胞和B细胞绝对计数值呈显著负相关,而与Treg 细胞百分率呈显著正相关（均P<0.05）;血清HMGB1和IDO表达水平呈显著正相关（P<0.01）。si-HMGB1组KYSE30和ECA109 细胞及其培养上清液中IDO和p65 表达水平明显低于si-NC 组和si-HMGB1+PMA组（均P<0.05）。结论：血清HMGB1和IDO与ESCC临床进展和机体免疫功能密切相关,具有成为ESCC 肿瘤标志物和免疫治疗新靶点的潜力。HMGB1 可能通过NF-κB信号通路促进IDO表达,进行双靶点联合治疗可能会取得更好的疗效。     

基于炎症指标和肿瘤标志物的肺癌治疗前远处转移预测模型的构建和验证

目的 探讨炎症指标及肿瘤标志物联合检测对肺癌远处转移的预测价值。方法 选取河北医科大学第四医院肺癌患者133例作为研究组,根据转移情况分为转移组、未转移组,检测外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、细胞因子及肿瘤标志物,筛选肺癌远处转移的危险因素,以Logistic回归分析构建模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析评估该模型对肺癌远处转移的预测效能,并以河北医科大学第一医院98例肺癌患者作为验证组进行验证。结果 转移组NLR、白细胞介素(IL)-8、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平均明显高于未转移组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,IL-8 (OR=1.008,P=0.014)、CYFRA21-1 (OR=1.067,P=0.035)水平升高是预测肺癌远处转移的独立危险因素,联合二者建立的风险预测模型为Logit(P)=-2.217+0.008X_IL-8+0.081X_CYFRA21-1,对预测肺癌远处转移有良好的效能,在研究...     

外泌体分离和纯化方法研究进展

外泌体是由活细胞主动分泌的一种纳米级囊泡,内含蛋白质、核酸等生物活性物质,参与细胞间通讯,在肿瘤微环境调节、免疫识别、炎症反应等众多生理病理过程中发挥重要作用。作为一种运输载体,外泌体广泛存在于生物流体中,但由于其粒径小、内含物丰度低,能否获得高质量的外泌体成为后续研究成败的关键。虽然外泌体分离、纯化和鉴定方法日趋发展...     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织，采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平，并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移，同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高，且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此，CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。     

中药升陷汤抑制肺癌A549细胞增殖和侵袭转移作用研究

目的:本研究旨在体外筛选出升陷汤抑制人肺癌A549细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其分子机制进行探讨。方法:通过MTT法和形态观察筛选出升陷汤抑制A549细胞增殖的有效萃取部位。Annexin V/PI双染法检测升陷汤正丁醇提取物对A549细胞的凋亡诱导作用。划痕实验和Transwell小室检测生陷汤提取物对A549细胞侵袭、转移的影响;Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化。结果:20-400μg/mL正丁醇萃取部位作用于A549细胞48、72h后可明显抑制其增长,且与凋亡相关。20-80μg/mL升陷汤作用于A549细胞24h后可明显抑制其侵袭和转移;正丁醇萃取部位可明显降低p-ERK和基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达(P<0.01)。结论:升陷汤正丁醇萃取部位能显著抑制A549细胞的增殖和侵袭转移。     

连翘叶乙醇提取物对人食管癌细胞增殖抑制作用的研究

 目的
研究中药连翘叶乙醇提取物体外对食管癌细胞增殖的影响及对TE-13细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法应用MTT法分析不同浓度连翘叶乙醇提取物(ethanol extract of Forsythia suspense leaf,FSEE）对人食管癌细胞TE-13、TE-1、Yes-2和 Eca-109增殖的影响;光学显微镜下观察经FSEE处理后细胞的形态学改变; Wright-Giemsa染色观察TE-13细胞凋亡的形态学变化;经Annexin V/PI双染后用流式细胞术检测 FSEE对TE-13细胞凋亡率的影响;用不同浓度(0.1、0.2、0.5mg/ml）FSEE作用于TE-13细胞24 h后,分析细胞PARP、Caspase 3、 Caspase 8、Caspase 9蛋白表达的变化。RT-PCR法检测FSEE对TE-13细胞凋亡相关基因Bcl-2家族中Bcl-2、Bcl-xL、Bax mRNA表达的影响。结果FSEE对人食管癌细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05);经FSEE处理24 h后,TE-13细胞出现明显的凋亡形态学改变,TE-13细胞凋亡率明显增高,与未处理组比较差异有统计学意义(P<0.01）;经0.1、0.2、0.5 mg/ml FSEE作用24 h后,TE-13细胞PARP、Caspase 3、Caspase 9蛋白出现裂解片段,并随药物浓度增加,裂解片段浓度升高,呈浓度依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.01）。 经FSEE处理后,TE-13 细胞Bax mRNA表达上调, Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达水平下调。结论FSEE在体外可明显抑制食管癌细胞的增殖,诱导TE-13细胞凋亡,其机制可能与其通过Caspase依赖性的内源途径诱导细胞凋亡有关。     

香加皮宝霍甙-Ⅰ抑制人食管癌细胞增殖的机制

目的观察香加皮活性成分宝藿甙-Ⅰ对食管癌细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其与β-catenin通路的关系。方法采用MTT法观察宝藿甙-Ⅰ对食管癌细胞Eca-109增殖活性的影响;Annexin V/PI染色检测宝藿甙-Ⅰ对食管癌细胞凋亡的影响。RT-PCR法检测宝藿甙-Ⅰ对食管癌细胞β-catenin、survivin 和c-myc mRNA表达的影响,Western blot和激光共聚焦显微镜检测食管癌细胞β-catenin、磷酸化β-catenin、survivin和c-myc蛋白表达的变化。结果10~40μg/ml宝藿甙-Ⅰ明显降低了Eca-109细胞的增殖活性并诱导其凋亡。经宝藿甙-Ⅰ处理24 h后,β-catenin、survivin 和c-myc mRNA和蛋白表达水平均降低,磷酸化的β-catenin蛋白表达升高,β-catenin在细胞核和细胞质中的表达均降低,且在胞核中的降低更为明显。结论香加皮宝藿甙-Ⅰ可通过调节β-catenin通路活性抑制食管癌Eca-109细胞增殖。     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织,采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平,并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移,同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高,且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此,CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。