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重组链激酶(r-SK)由工程菌提取液经SephacrylS-200柱纯化,比活性达105IU/mg,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示分子量为78.0247×10-24kg的一条带。人新鲜血浆经Lysine-Sepharose4B亲和层析,SephadexG-25凝胶过滤制备纤溶酶原(plg),比活性达23.7IU/mg,活性回收率为13.6%,SDS-PAGE显示分子量为147.7489×10-24kg的一条带。对-茴香酸-对-脒基r-SK和plg的混合物经苯酯盐酸盐(APAN)修饰后制备茴香酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物(APSAC),产物经L-lysineSepharose4B亲和层析,SDS-PAGE显示分子量为78.0247×10-24kg和147.7489×10-24kg两条带,其拟一级水解速率常数为1.26×10-4sec-1。体外溶栓实验证明其有溶栓活性。 相似文献
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MTT比色法与ELISA法测定rhEPO体外生物学活性比较 总被引:6,自引:1,他引:5
红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是人体内调控红系祖细胞的重要造血生长因子,它能刺激红系前体细胞的分化、增殖及成熟.重组人红细胞生成素(rhEPO)是运用基因工程方法,把人EPO基因转入CHO细胞内进行分泌表达,再经过纯化工艺获得的活性蛋白.rhEPO在治疗慢性肾性贫血及肾功能衰竭方面具有良好的疗效.rhEPO生物活性测定方法分体外法与体内法,现就两种体外测定rhEPO生物活性方法进行研究与比较.MTT比色法,运用四甲基偶氮唑盐(MTT)在活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶作用下可被还原成蓝紫色结晶-甲形成量与细胞增殖程度成正比,从而通过rhEPO依赖株UT-7形成的甲量来定量测定rhEPO活性.双抗夹心ELISA法,用抗体包被固相载体后加rhEP0标准品与样品,使相应抗原与固相抗体结合后加入酶标抗体,最后再与该酶的底物反应生成有色物质,通过标准曲线精确测得rhEPO样品生物活性单位. 相似文献
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Exenatide是由Amylin Pharmaceuticals与礼来(Eli Lilly)公司共同开发的胰高血糖素样肽-1(glucogan-like peptide-1,GLP-1)受体长效激动剂。研究证实,exenatide具有促进胰岛β细胞增殖、抑制β细胞凋亡、抑制食物摄取、减慢胃排空和减轻体质量等生理作用,有着传统治疗糖尿病药物不可比拟的优点,因而近年exenatide及类似物已经成为糖尿病治疗领域的研究热点。 相似文献
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目的:c-jun反义核酸消除人体卵巢癌细胞抗药性探讨.方法:采用c-jun反义核酸处理抗药型人体卵巢癌细胞,观察c-jun,γ-GCS以及GSH在两种细胞内的表达水平.结果:c-jun反义核酸可抑制c-jun基因的表达并降低谷胱苷肽合成的关键酶γ-GCS的mRNA表达量,使抗药型细胞内GSH含量降低大约75%.ATT分析结果也表明,经c-jun反义核酸处理后,抗药型细胞对顺铂的IC_(50)从40μmol/L降低到1.0μmol/L,对敏感型细胞无明显影响(0.2μmol/L).结论:c-jun反义核酸可特异地抑制抗药型细胞内c-jun基因的表达并间接抑制γ-GCS的表达,最终抑制GSH的合成,从而消除卵巢癌细胞的抗药性. 相似文献
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