LINC00958 通过上调VEGF-C 表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为及小鼠模型的淋巴结转移

目的：探讨LINC00958/血管内皮生长因子 C（VEGF-C）信号通路在宫颈癌的淋巴管生成和淋巴转移中的作用。方法：从2020 年9月至2022 年9月期间在河南省人民医院接受手术的患者中收集了42 例宫颈癌组织标本,通过qPCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞（Hela、C33A、SiHa、Caski）中LINC00958 的表达情况。将LINC00958 过表达载体（LINC00958 组）或对照载体（CMV 组）转染Caski 细胞,敲减LINC00958（shLINC00958 组）、VEGF-C（shVEGF-C 组）的shRNA 序列或阴性对照shRNA （shNC 组）转染SiHa 细胞。分别通过CCK-8法、Transwell 实验检测过表达或敲减LINC00958 对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察转染后细胞的培养上清液对人淋巴管内皮细胞（HLEC）淋巴管形成能力的影响。建立小鼠腘淋巴结转移模型,观察过表达LINC00958 或同时敲减VEGF-C对宫颈癌淋巴结转移的影响。结果：LINC00958 在宫颈癌组织中呈高表达（P<0.001）,高水平的LINC00958 与大肿瘤、晚期肿瘤分级、浸润深度和淋巴转移有关联（P<0.05 或P<0.01）。与正常人宫颈上皮细胞ende1617相比,宫颈癌细胞中LINC00958 水平均显著升高（P<0.01 或P<0.001）。shLINC00958 组SiHa 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力均显著低于shNC 组（P<0.05、P<0.01 或P<0.001）,LINC00958 组Caski 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力显著高于CMV组（P<0.05、P<0.01或P<0.001）。通过RNA下拉、RNA免疫沉淀实验发现宫颈癌细胞中LINC00958 能够特异性结合VEGF-C。LINC00958+shVEGF-C 组Caski 细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促淋巴管形成能力显著低于LINC00958 组（P<0.01 或P<0.001）;在小鼠腘淋巴结转移模型中,LINC00958+ shVEGF-C 组中小鼠腘窝淋巴结的体积和VEGF-C 蛋白、N-cadherin 蛋白以及LYVE-1的阳性细胞比例均显著低于LINC00958 组（均P<0.001）。结论：LINC00958通过直接与VEGF-C蛋白相互作用增强宫颈癌细胞的增殖、侵袭、淋巴管生成能力,促进小鼠腘淋巴结转移模型的淋巴结转移。     

尿路上皮癌相关1基因靶向miR-204-5p对子宫内膜癌细胞增殖迁移凋亡和免疫逃逸的影响

目的探讨长链非编码RNA尿路上皮癌相关1(UCA1)基因对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、凋亡和免疫逃逸的影响及其分子机制。方法收集2017—2019年于河南省人民医院行子宫全部或部分切除的内膜样腺癌患者的子宫内膜癌组织和癌旁正常组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测UCA1和miR-204-5p的表达, 采用细胞计数试剂盒8法、Transwell法、流式细胞术检测细胞增殖迁移和凋亡能力, 双荧光素酶报告分析UCA1与miR-204-5p的靶关系。将HEC-1A-sh-NC或HEC-1A-sh-UCA1细胞与外周血单核细胞(PBMC)或细胞因子诱导的杀伤细胞进行体外共培养, 探讨UCA1在免疫逃逸中的作用。结果子宫内膜癌组织中UCA1的表达水平(17.08±0.84)高于癌旁正常子宫内膜组织(3.00±0.37), miR-204-5p的表达水平(0.98±0.16)低于癌旁正常子宫内膜组织(2.00±0.20, 均P<0.05)。Pearson相关性分析显示, miR-204-5p的表达与UCA1的表达呈负相关(r=-0.330, P=0.030)。UCA1和miR-204-5p的表...     

miR-126和miR-155及程序性死亡受体配体1在宫颈癌中表达及意义

目的 观察宫颈癌组织miR-126、miR-155、程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1, PD-L1)表达变化,分析其与宫颈癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 行手术治疗且经组织病理检查确诊的宫颈癌患者104例,收集手术切除癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-126、miR-155相对表达量,以相对表达量均值为界判定低表达或高表达;采用免疫组织化学法检测PD-L1阳性表达率。104例患者术后随访5～30个月,根据是否发生复发、转移、死亡分为预后不良组24例和预后良好组80例。比较宫颈癌组织与癌旁组织miR-126、miR-155相对表达量及PD-L1阳性表达率;比较不同临床病理特征宫颈癌患者、预后不良组与预后良好组癌组织miR-126、miR-155高、低表达比率及PD-L1阳性表达率;采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后不良的影响因素。结果 宫颈癌组织miR-126相对表达量(0.82±0.13)低于癌旁组织(1.68±0.24)(t=32.215,P<0.001),miR-155相对表达量(4.11±0.74)、PD...