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目的 构建与糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定序列相连的bcr/abl真核表达质粒,并检测其在COS-7细胞中基因和膜蛋白的表达.方法 以编码慢性粒细胞白血病bcr/abl融合蛋白全长序列的migP210质粒为模板,通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段,双酶切后定向插入真核表达载体pBudCF4.1中,经鉴定获得重组质粒pBB.同时用RT-PCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI获得约243 bp的锚定序列,双酶切后克隆人pBB质粒中与ber/abl基因下游羧基端相连,获得重组质粒pBBG.在多聚阳离子介导下将pBBG质粒转染COS-7细胞,采用RT-PCR和Western blot检测bcr/abl融合基因和蛋白的表达.结果 经酶切和测序鉴定证实,由GPI锚定连接的ber/abl融合基因插入片段正确;RT-PCR检测到转染细胞中有bcr/abl融合基因,Western blot检测到转染细胞膜上有hcr/abl融合蛋白的表达.结论 成功构建由GPI锚定修饰的bcr/abl重组质粒pBBG,并能在COS-7细胞膜上表达出bcr/abl融合蛋白. 相似文献
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摘要 目的 研究慢性感染创面分离的多重耐药菌(MDROs)种类分布及其耐药特性,为临床合理用药提供理论依据。方法 通过细菌分离鉴定和药敏试验方法,对某医院212例慢性难愈合创面感染分泌物进行检测与分析。结果 从212例慢性感染创面分泌物中分离出病原菌122例,检出率为57.55%。共检出病原菌156株,其中多重耐药菌102株,占分离菌株总数的65.39%。102株多重耐药菌中,包括革兰阳性菌25株和革兰阴性菌77株;居前4位依次是产ESBLs大肠埃希菌、多重耐药铜绿假单胞菌、产ESBLs奇异变形杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MASA),构成比依次为21.57%、17.65%、13.73%和11.76%。MDROs仅对万古霉素和美罗培南有较好的敏感性。结论 慢性感染创面感染菌多为MDROs,以革兰阴性菌为主,提示应加强创面感染病原菌监测,合理选用抗菌药物。 相似文献
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摘要 目的 探讨骨科医院感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及其导致医院感染的危险因素。方法 回顾性研究2015年1月-2018年12月某院收治的146例肺炎克雷伯菌培养阳性患者的临床资料,根据药敏结果将患者分为CRKP组和CSKP组,比较两组患者对常用抗菌药物的耐药情况,CRKP菌株医院感染的危险因素。结果 146例患者中CRKP菌株42例和CSKP菌株104例。CRKP对大部分常用抗菌药物的耐药率高于CSKP(P<0.05)。近3个月使用多因素Logistic分析结果显示,多发伤、入住ICU、留置至少一种插管、近3个月使用碳青霉烯类、近3个月使用三代或四代头孢菌素、住院时间>30 d是CRKP感染的独立危险因素。结论 骨科患者CRKP耐药情况严重,应采取有效的防控措施,降低CRKP菌株感染的风险。 相似文献
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目的研究骨科患者尿路感染耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREco)的耐药性及其导致尿路感染的危险因素。方法通过回顾性调查方式,对某医院收治的尿液培养大肠埃希菌阳性骨科患者的临床资料进行分析,以了解患者尿路感染CREco的耐药性及其危险因素。结果从该医院住院尿路感染送检标本中检出CREco菌株48例。CREco菌株对大部分常用抗菌药物的耐药率高于大肠埃希菌碳青霉烯类敏感株(P <0. 05)。多因素分析结果显示,入住ICU、入住ICU> 1周、留置导尿时间> 14 d、近1个月使用碳青霉烯类抗菌药物、住院时间> 30 d等因素构成骨科患者CREco尿路感染的独立危险因素。结论骨科患者尿路感染CREco耐药情况严重,应采取有效的防控措施,降低CREco所致尿路感染的风险。 相似文献
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目的探讨金属对金属(MOM)混合固定型髋关节表面置换术(HRA)的近期疗效,分析手术技术要点。方法 2004年10月至2008年6月,对52例(58髋)股骨头缺血性坏死、骨关节炎、髋关节发育不良、强直性脊柱炎患者行MOM-HRA。其中男32例,女20例;年龄16~65岁,平均42.6岁。手术方法按照K.De.Smet标准方法进行,术后对Harris评分、关节活动度和X线片进行随访。结果失访7例(8髋),45例(50髋)获得随访,随访时间平均22个月(12~54个月)。术前平均Harris评分(37.0±1.2)分,术后22个月平均(93.0±1.0)分;术前屈髋度平均(25.3±1.6)°,术后22个月平均(105.0±1.8)°;术前外展度平均(18.8±0.8)°,术后22个月平均(40.6±1.0)°。评价:46髋优,3髋良,1髋差。无股骨颈骨折,无松动,无脱位,无感染,无翻修,1例异位骨化BrookerⅢ型。结论 HRA具有保留股骨头骨量、术后关节活动度恢复快、近期结果好等优点,对于获得优良的术后结果,严格的患者选择和精确的手术技术至关重要。 相似文献
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目的比较全髋表面置换术(HRA)和传统全髋置换术(THA)围手术期的总失血量以及术后住院时间,探讨两种术式不同的失血机制及其对手术创伤的影响。方法 2009年1月至2009年12月,选择67例髋关节骨病患者,分为两组分别施行HRA和THA,HRA组34例(34髋),THA组33例(33髋)THA,两组均为初次单侧关节置换。通过Gross方程,根据身高、体重和手术前后的红细胞压积(Hct)变化差值算出所有患者的总失血量,记录显性失血量(术中出血和术后引流量),推算出隐性失血量。记录手术时间和术后住院时间,将以上数据进行比较。结果 HRA组总失血量、显性失血量和隐性失血量都与THA组有统计学差异。总失血量HRA组和THA组分别为(1048.0±134.2)ml和(1466.0±167.4)ml,两组间差异有统计学意义(t=11.3,P〈0.05);术中出血量分别为(542.0±68.9)ml和(625.0±86.3)ml,两组间差异有统计学意义(t=4.4,P〈0.05);术后引流量分别为(266.0±93.9)ml和(379.0±162.7)ml,两组间差异有统计学意义(t=3.5,P〈0.05);平均隐性失血量分别为(240.0±43.4)ml和(462.0±71.5)ml,两组间差异有统计学意义(t=15.3,P〈0.05);平均术后住院时间HRA组也明显缩短,HRA为(4.6±0.9)d,THA为(6.1±0.9)d,两组间差异有统计学意义(t=7.0,P〈0.05);平均手术时间HRA组则比HA组延长,HRA组为(114±13.9)min,THA组为(87±18.5)min,两组间差异有统计学意义(t=-6.9,P〈0.01)。结论尽管HRA比THA手术时间和手术切口都有延长,但总出血量明显降低,尤其是隐形失血量,术后住院时间也缩短,说明HRA出血相对偏少,创伤相对较小。 相似文献
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目的:研究青壮年股骨颈骨折患者内固定失败后Ⅱ期行髋关节置换的早期临床疗效。方法:2008年6月至2010年6月,对24例股骨颈骨折内固定术后股骨头坏死患者行全髋关节置换术,其中男12例,女12例;年龄18~58岁,平均42.9岁。术后行X线检查,并根据Harris评分标准评价临床疗效。结果:23例获得随访,平均随访时间34.4个月(25~48个月),1例术后并发髋关节脱位,未发现髋关节感染、松动或假体周围骨折等并发症。Harris评分为90.9±4.3,优18例,良4例,可1例。结论:Ⅱ期全髋关节置换治疗股骨颈骨折内固定术后并发股骨头坏死,术中手术难度增加,但可以获得良好的早期疗效。 相似文献
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目的构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响。方法化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacI线性化后转入HEK293细胞包装、扩增。倍比稀释法测定病毒滴度。实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力。结果pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组。结论K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖。 相似文献