内镜下圈套器法黏膜切除术对胃间质瘤的治疗效果

目的探讨对胃间质瘤患者行内镜下圈套器法黏膜切除术治疗的临床效果。方法选取2016年4月~2017年5月我院收治的98例胃间质瘤患者。根据治疗方法不同分为传统组和治疗组各49例。传统组行内镜黏膜切除术,治疗组行内镜下圈套器法黏膜切除术,观察并比较两组治疗效果、手术时间、住院费用及并发症发生率。结果治疗组治疗总有效率为91.84%,显著高于传统组的73.47%,治疗组手术时间、住院费用均明显低于传统组,治疗组并发症发生率为8.16%,显著低于传统组的24.19%,差异有统计学意义(P0.05)。结论内镜下圈套器法黏膜切除术治疗胃间质瘤,临床疗效显著,能显著缩短手术时间,减少并发症发生率,促进患者病情恢复。     

Bac-to-Bac杆状病毒昆虫表达系统介导的重组腺相关病毒制备

目的 建立高效的临床级重组腺相关病毒( rAAV)制备方法.方法 将rAAV的反向末端重复序列( ITR)及目的基因表达框(2053 bp)从pAAV-MCS剪切引入杆状病毒载体中构建顺式载体,rAAV血清型2的衣壳和复制蛋白基因在反式载体pFastBacDual中利用真核基因遗漏扫描原理表达,两者分别制备成杆状病毒,共感染昆虫细胞sf9包装rAAV.增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因验证其可行性.结果 顺式和反式杆状病毒载体分别在DH 10BacTM中转座形成杆粒bacmid、昆虫细胞sf9中制备成杆状病毒,病毒滴度可达1×108～3 ×108 v.g./ml.二杆状病毒共感染昆虫细胞sf9,完成rAAV拯救、复制和包装过程,经rAAV-EGFP感染293T细胞测试具有良好的生物学活性.结论 该系统具有高效、安全、简便等特点,为临床级rAAV制备和基因治疗奠定了基础.     

肠炎宁糖浆联合奥替溴铵治疗肠易激综合征的临床研究

目的探讨肠炎宁糖浆联合奥替溴铵片治疗肠易激综合征的临床疗效。方法选取2019年4月—2020年8月河南医学高等专科学校附属医院收治的92例肠易激综合征患者为研究对象,根据随机数字表法将92例分为对照组和治疗组,每组各46例。对照组口服奥替溴铵片,40 mg/次,3次/d。治疗组在对照组基础上口服肠炎宁糖浆,10 m L/次,3次/d。两组患者连续治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组的腹痛、腹胀、腹泻消失时间,肠易激综合征的特征指数生活质量量表(IBS-QOL)评分和血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)、神经肽Y(NRY)、血管活性肠肽(VIP)、胆囊收缩素(CCK)、胃动素(MTL)水平。结果治疗后,治疗组患者的总有效率为93.48%,对照组的总有效率为78.26%,组间有明显差异(P<0.05)。治疗后,治疗组患者腹痛、腹胀、腹泻消失时间均比对照组短(P<0.05)。治疗后,两组患者的IBS-QOL评分明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组患者IBS-QOL评分升高的更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的IL-6、IL-18水平明显降低,NRY水平明显升高(P<0.05);且治疗后治疗组的IL-6、IL-18水平低于对照组,NRY水平高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的CCK水平明显升高,VIP、MTL水平明显降低(P<0.05);且治疗后治疗组的CCK水平比对照组高,VIP、MTL水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肠炎宁糖浆联合奥替溴铵片可提高肠易激综合征的临床疗效,改善临床症状,增强患者的生活质量,减轻炎症反应,调节胃肠激素,安全性良好。     

几丁质酶3样蛋白1与糖尿病及其微血管并发症

几丁质酶3样蛋白1(chitinase-3-like-1 protein,YKL-40),是一种新发现的炎症标志物.最早是在牛的乳汁分泌物中发现,其化学本质即软骨糖蛋白39或甲壳质酶3样蛋白质1,是一个相对分子质量为40 000肝磷脂和壳质链接的凝集素,是哺乳动物甲壳质酶样蛋白家族的一员,但是没有甲壳质酶活性[1].大量证据表明YKL-40不仅是急性及慢性炎症标志物,而且与细胞外基质及血管重塑有关[2].基于此,发现了YKL-40与风湿及肿瘤疾病、以及早期动脉硬化相关[3].另外,YKL-40在炎症状态和血管重塑中的作用,意味着其在慢性、亚临床炎症性疾病,如胰岛素抵抗和糖尿病中的可能作用.现就YKL-40与糖尿病及其微血管并发症的研究进展综述如下.     

HPLC法同时测定茵栀黄分散片中绿原酸与栀子苷的含量

目的：建立同时测定茵栀黄分散片中绿原酸与栀子苷的含量测定方法。方法：采用HPLC法,Agilent ZorbaxSB—C18（色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相：乙腈-0．3％甲酸水,梯度洗脱,柱温30℃,流速：1．0mL·min^-1,检测波长：0～9min为327nm（绿原酸）,9～30min为238nm（栀子苷）。结果：绿原酸和栀子苷的线性范围分别为1．25～12．50μg·mL^-1（r=0．9996,n=6）、2．23～22．30μg·mL^-1（r=0．9998,n=6）,平均回收率分别为99．82％（RSD为1．16％,n=6）与98．49％（RSD为2．27％,n=6）。结论：该方法简便、准确、重现性好,可用于茵栀黄分散片中绿原酸与栀子苷含量的同时测定。     

嵌合抗原受体修饰T细胞免疫治疗肿瘤的研究进展

以嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞为基础的肿瘤过继细胞免疫治疗近年来取得了很大的进步,它赋予T细胞靶向杀伤活性,并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和打破宿主免疫耐受状态。CAR以单链抗体-共刺激分子-免疫受体酪氨酸活化基序的嵌合模式修饰T细胞显示出良好的抗肿瘤作用,Ⅰ/Ⅱ期临床试验在白血病、淋巴瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的治疗效果;CAR修饰T细胞临床治疗也带来了挑战,比如脱靶效应、细胞因子风暴、移植物抗宿主病样损伤等。研究者正在通过安装人工基因调控系统、优化共刺激分子、筛选最佳治疗潜质的T细胞亚群来提高CAR修饰T细胞的有效性和安全性,相信随着研究的不段深入,基于CAR的免疫治疗新策略会给肿瘤患者带来新的希望。     

慢性萎缩性胃炎合并Hp与未合并Hp患者胃镜病理表现差异分析

目的:分析慢性萎缩性胃炎合并幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染与胃镜病理变化之间的相关性.方法:收集2018年5月至2020年5月在本院收治的慢性萎缩性胃炎合并Hp感染者80例(Hp阳性组),另选取院同期治疗单纯慢性萎缩性胃炎患者80例(Hp阴性组).对比单纯慢性萎缩性胃炎患者与慢性萎缩性胃炎合并Hp感染者病理改变分布情况,分析患者病理特征与Hp感染之间的关系,及不同病理特征Hp感染程度.结果:Hp阳性组患者胃部炎症、中性粒细胞浸润、肠上皮分化、胃粘膜萎缩发生情况均明显高于Hp阴性组(P<0.05);Hp阳性组患者炎症、中性粒细胞浸润、肠上皮分化、胃粘膜萎缩情况为中-重度者明显高于Hp阴性组(P<0.05);不同病理特征之间患者Hp感染程度不一,胃粘膜萎缩患者其Hp感染程度以强阳性为主,炎症患者则以弱阳性为主(P<0.05).结论:Hp感染与慢性萎缩性胃炎患者胃镜下病理特征存在密切联系,在临床治疗中需要注意Hp诊断、根除有助于改善患者临床症状.     

miRNA-574-5p通过靶基因高温需求因子A1调控肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制

目的探讨微小RNA(mi RNA)-574-5p通过靶基因哺乳动物高温需求因子A1(HTRA1)调控肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测正常细胞株L02及肝癌细胞株Hep G2、SMMC-7721、BEL-7402中mi RNA-574-5p、HTRA1的表达水平,采用Western blot检测转染后Hep G2细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、MMP14蛋白的表达水平,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用双荧光素酶实验检测mi RNA-574-5p对HTRA1活性的影响。结果与L02细胞系比较,肝癌细胞系Hep G2、SMMC-7721、BEL-7402中mi RNA-574-5p的表达水平均升高,HTRA1 m RNA和HTRA1蛋白的表达水平均下降(P﹤0.05)。anti-mi RNA-574-5p组Hep G2细胞中mi RNA-574-5p的表达水平明显低于anti-mi RNA-NC组(P﹤0.01)。与anti-mi RNA-NC组比较,anti-mi RNA-574-5p组Hep G2细胞48、72 h的增殖率及cyclin D1、MMP2、MMP9、MMP14蛋白的表达水平均明显降低,迁移、侵袭数目均明显减少,p21、p27蛋白的表达水平均明显升高(P﹤0.01)。pc DNA-HTRA1组Hep G2细胞中HTRA1蛋白的表达水平明显高于pc DNA组(P﹤0.01)。与pc DNA组比较,pc DNA-HTRA1组Hep G2细胞48、72 h的增殖率及cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白的表达水平均明显降低,p21蛋白的表达水平明显升高,迁移、侵袭数目均明显减少(P﹤0.01)。双荧光素酶报告实验显示,mi RNA-574-5p+WT-HTRA1组Hep G-2细胞的荧光素酶活性明显低于mi RNA-NC+WT-HTRA1组(P﹤0.01)。mi RNA-574-5p+MUT-HTRA1组Hep G-2细胞的荧光素酶活性与mi RNA-NC+MUT-HTRA1组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。与anti-mi RNA-574-5p+si-NC组比较,anti-mi RNA-574-5p+si-HTRA1组Hep G2细胞中HTRA1蛋白的表达水平降低,培养48、72 h的肝癌Hep G2细胞的增殖率均升高,cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白的表达水平均升高,细胞迁移、侵袭数目均增多,p21蛋白的表达水平降低(P﹤0.05)。结论mi RNA-574-5p通过靶向负调控HTRA1基因调控肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移。     

重组人干扰素α-2b/免疫球蛋白G4 Fc融合蛋白在杆状病毒昆虫系统中的表达

目的 利用杆状病毒昆虫系统表达人干扰素(IFN) α-2b/免疫球蛋白(Ig)G4Fc融合蛋白(IFN/Fc),为长效干扰素的抗病毒治疗探索新方法.方法 利用分子克隆技术获得人IFN α -2b及IgG4 Fc基因cDNA,构建杆状病毒穿梭载体,在DH10 Bac菌株中转座获重组杆粒,转染昆虫细胞High five,Western blot检测目的蛋白表达,细胞病变抑制法检测生物学活性. 结果 穿梭载体在DH10 Bac中转座成功,获得重组杆粒Bacmid-IFN/Fc ; High Five细胞在病毒感染后72 h蛋白表达较好.病毒感染48 h即有少量目的蛋白表达,72 h表达量较高.Western blot结果显示在45×103处有特异性蛋白条带,体外抗病毒活性为580 IU/ml.结论 利用杆状病毒昆虫系统成功表达重组IFN/Fc融合蛋白,为新型长效干扰素研制及慢性病毒性肝炎治疗提供实验依据.