铜绿假单胞菌L型的诱导及其产绿脓菌素能力的研究

目的采用哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型,并研究其L型产绿脓菌素的能力。方法采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型;通过绿脓菌素试验测定铜绿假单胞菌L型的绿脓菌素产生能力。结果铜绿假单胞菌L型可被哌拉西林诱导为L型,铜绿假单胞菌L型仍具有产生绿脓菌素的能力,但产生的速度较原菌慢且量少。结论铜绿假单胞菌L型为该菌存在的重要形式,其仍能产生绿脓菌素为其致病因素之一。     

哌拉西林诱导铜绿假单胞菌L型形成的实验研究

目的：观察哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型的情况。方法：采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型,并稳定传代。结果：铜绿假单胞菌可被哌拉西林诱导为典型L型,在诱导因素存在下可稳定传代。结论：哌拉西林可诱导铜绿假单胞菌变异为稳定L型。     

B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究

目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果。结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21。于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。     

铜绿假单胞菌及其L型诱导血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的研究铜绿假单胞菌及其L型感染诱导血管内皮细胞凋亡的能力,比较两者的差异。方法用Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测铜绿假单胞菌及其L型感染血管内皮细胞2、4、6、8与10h后各时间段的细胞凋亡率,Giemsa染色观察细胞形态变化判断细胞受损情况。结果铜绿假单胞菌及其L型能诱导血管内皮细胞发生凋亡,与对照组比较差异有显著性意义（P <0.05）;L型诱导细胞的凋亡率弱于原菌（P <0.05）。结论铜绿假单胞菌及其L型可诱导血管内皮细胞发生凋亡,与细菌致病性相关;铜绿假单胞菌L型较原菌诱导细胞凋亡的能力减弱。     

铜绿假单胞菌L型对第三代和第四代头孢菌素的药物敏感性研究

目的：：探讨铜绿假单胞菌( Pseudomonas aeruginosa,PA) L型对第三代和第四代头孢菌素敏感及耐药状况。方法：将PA诱导成稳定的L型,利用K-B纸片琼脂扩散法检测PA原菌及其L型对第三代和第四代头孢菌素的敏感程度,分析PA-L型的耐药状况。结果：PA-L型对第三代和第四代头孢菌素的抑菌圈直径均较原菌缩小(P<0.05),但仍维持在敏感程度。结论：PA-L型对第三代和第四代头孢菌素仍具有敏感性。     

美托洛尔治疗心血管病的临床疗效观察

目的:探讨美托洛尔治疗心血管病的临床疗效.方法:笔者以2015年1～12月在我社区建档的100例心力衰竭者作为研究对象,对照组采用常规方法治疗,主要包括地高辛、利尿剂、心血管扩张的药物,实验组在对照组治疗的基础上给予美托洛尔进行治疗,两组治疗周期均为半年,治疗完毕观察两组治疗效果.结果:对照组治疗后LVFDD、LVES较治疗前降低,但是实验组的降低幅度明显高于对照组,两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05),实验组与对照组治疗后RWT、FS、SV较治疗前明显升高,但是实验组升高幅度较大,两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05),对照组LVEF治疗后明显低于治疗前,实验组治疗后明显高于治疗前,两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05).实验组与对照组相比,治疗后心率、收缩压、舒张压均有所降低,降低的幅度高于对照组,两组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:美托洛尔可改善由心血管病产生的心力衰竭患者心脏功能,重塑逆转心室,有显著疗效.     

米托蒽醌处理B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗特征及其诱导的抗肿瘤免疫反应初探

背景与目的:蒽环类药物处理可使肿瘤细胞免疫原性增加。本文旨在分析米托蒽醌(mitoxantrone,MIT)处理的B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗特征,初步探讨该瘤苗诱导的抗肿瘤免疫反应。方法:MIT处理B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗后,用吖啶橙/嗅化乙啶(AO/EB)染色法观察瘤苗细胞形态,流式细胞仪(FCM)检测其粒度及凋亡比例,荧光显微镜观察瘤苗凋亡后细胞膜表面结核杆菌早期分泌靶抗原6KD(ESAT-6)的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测瘤苗经MIT处理后IL-21的表达。瘤苗免疫小鼠后,FCM检测了补体依赖的细胞毒性(complement dependent cytotoxicity,CDC)及细胞毒T细胞(cytotoxicT lymphocyte,CTL)活性。结果:经MIT处理后,瘤苗停止分裂,细胞逐渐增大,数日内可保持生物活力,并表达IL-21。瘤苗细胞凋亡后,ESAT-6成点簇状分布于胞膜表面。MIT处理的瘤苗能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫应答,免疫鼠血清和CD8+T细胞可分别通过CDC和CTL杀伤野生型B16F10细胞。结论:MIT处理的B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗失去增殖能力,但仍能表达IL-21且具有免疫原性,能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应。     

多发性骨髓瘤RPMI-8226和NCI-H929细胞表达ABCG2和ABCB5及意义

研究ATP结合盒(ABC)转运体ABCG2、ABCB5在多发性骨髓瘤(MM)RPMI-8226和NCI-H929细胞的表达及意义。方法:用实时定量反转录酶-聚合酶链锁反应(qRT-PCR)及蛋白印迹(Western blot)法检测MM细胞中ABCG2、AB-CB5的表达,并观察两株细胞在增殖、克隆、耐药及致瘤性等方面的差异。结果:qRT-PCR和Western blot显示AB-CG2、ABCB5均表达于RPMI-8226和NCI-H929细胞,且前者的表达水平较后者明显增高(P<0.05)。与NCI-H929细胞相比,增殖、克隆、耐药实验,RPMI-8226细胞增殖速度快、克隆形成能力强、对长春新碱的耐受性高(P<0.05)。成瘤实验显示第10周时RPMI-8226组鼠出现了肿瘤而NCI-H929组鼠始终未出现肿瘤。ABCG2、ABCB5高表达于RPMI-8226细胞,可能是其耐药性较NCI-H929细胞增高的机制之一。这将为MM细胞化疗药物的筛选和靶向耐药分子ABCG2、AB-CB5治疗MM提供实验依据。     

白蛋白融合蛋白表达载体的构建及其在细胞中的表达和定位

目的：构建白蛋白-血凝素（Alb-HA）融合蛋白的真核表达载体,观察Alb在NIH3T3细胞中表达和定位。方法：采用两步克隆法将HA和Alb的编码序列以融合表达的形式克隆到载体pcDNA3上,随后转染NIH3T3细胞在荧光显微镜下观察Alb的表达和分布。结果：重组质粒经酶切、聚合酶链反应（PCR）和测序鉴定证明构建正确,并在NIH3T3细胞中大量表达,免疫荧光标记后在荧光显微镜下观察,Alb-HA融合蛋白分布于细胞质内。结论：成功构建Alb-HA融合蛋白表达载体并表达于NIH3T3细胞中,为下一步深入研究Alb的细胞内功能奠定了基础。