不断改革实验教学 提高学生实验技能

不断改革实验教学　提高学生实验技能湖南医科大学曾卫民，陈正炎培养合格的检验医师是保证医学检验质量的前提之一，更是五年制医学检验专业教学的主要目标。要实现这一目标，注重培养和提高学生的实验技能是至关重要的。作为检验专业主干课程的临床生化及其检验技术，在...     

不断改革实验教学 提高学生实验能力

临床生化检验是一门实践性很强的学科。实验教学的核心是如何提高学生的实验能力，实验能力的培养也是一种智能的培养。我们所说的实验能力是一种综合实验能力，主要包括两个方面：即基本实验能力．表现在一般的实验技能，操作能力等；创造实验能力，加实验的总体设计、实验方向的选择、实验方案的确定、综合性分析、新知识的探索等方面。我们根据教学目的和培养方针，提出了教学要。夯实基础，适当提高”。所谓“夯实基础”．即注重学生基本实验能力的培养，给学生以规范的操作、全面的实验技术和方法；所谓“适当提高”．一方面将先进的技术、方法介绍给学生，另一方面给学生以基本的科研能力的培养。     

一种多功能血浆蛋白质:补体4b结合蛋白

人类补体4b 结合蛋白(C4bBP)是一种高分子量的多链糖蛋白,含7个α亚基,1个β亚基。α亚基由549个氨基酸残基组成,有8个重复序列和补体4b 及肝素结合部位:β亚基则由235个氨基酸残基组成,有3个重复序列和蛋白 S 结合部位。其主要的生理功能是参与补体和凝血系统的调节。     

单克隆抗体ELISA测定血浆富组氨酸糖蛋白的方法

建立用单克隆抗体酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定血浆富组氨酸糖蛋白（ＨＲＧ）的方法。结果显示：ＭｃＡｂ３Ｃ６Ｆ３包被浓度为１０μｇ·ｍｌ＾－１,单抗酶标结合物作１：２００稀释时标准曲线最理想;最低检出限为１ｎｇ·ｍｌ＾－１,批内ＣＶ８．２％,批间ＣＶ１１．５％,回收率为８９．１％,测定范围为２．５－８０ｎｇ·ｍｌ＾－１;用该法测定４０例正常人血浆ＨＲＧ为（１１０．３±９．７）ｍｇ·Ｌ＾－１,２     

改进实验考试制度和评分标准的体会

改进实验考试制度和评分标准的体会湖南医科大学临床生化教研室曾卫民，陈正炎临床生化是医学检验专业的主干课程之一，根据其理论性和实践性都很强的特点，我们要求学生通过学习这门课后，不仅掌握本学科的基础知识，而且要有较强的动手能力。学生中重理论、轻实验的现象...     

抗富组氨酸糖蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :制备抗富组氨酸糖蛋白 (HRG)单克隆抗体 ,用于建立夹心ELISA方法检测血浆HRG浓度。方法 :用淋巴细胞杂交瘤技术 ,制备单克隆抗体 ,并对其免疫学特性进行了研究。结果 :建立了二株稳定分泌抗HRG单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (9E7C9和 3C6 F3) ,染色体数分别为 10 2和 96条 ,免疫球蛋白亚类均为IgG1。以羟基磷灰石法从腹水纯化McAb 9E7C9,SDS -PAGE检测其纯度 ,Westernblotting分析表明其可特异性地识别分子量为 670 0 0的抗原分子。用辣根过氧化物酶标记hcAb ,建立双抗夹心ELISA法 ,测定正常人血浆HRG含量为 110 .3± 9.7mg/L。结论 :所得McAbs特异性强 ,用其建立的夹心ELISA检测HRG的方法线性较好 ,灵敏度达 1ng/ml,为HRG的临床意义研究提供了精确的检测手段     

肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞释放反应的影响

本实验以体外原代培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为实验对象,观察肿瘤坏死因子(TNF)对HUVEC释放vWV,TXA_2,PGI_2的影响。结果发现TNF具有促进HUVEC释放vWF及PGI_2作用,对TXA_2释放无明显影响。     

涎腺肿瘤细针吸取标本端粒酶活性检测及其临床意义

目的 :检测涎腺肿瘤细针吸取标本的端粒酶活性并探讨其在涎腺肿瘤诊断中的价值。方法 :采用细针穿刺技术穿刺手术切除新鲜的 6 5例涎腺肿块组织 ,取FNA标本涂片 ,苏木精 -曙红 (HE)染色 ,作细胞学检查 ;残留于注射器内细胞用PBS液冲洗离心后 ,取沉淀物用银染 -TRAP法检测其端粒酶活性 ;肿块组织作病理学检查。结果 :17例FNA标本涎腺肿块细胞学检查诊断为恶性肿瘤 ,其中 14例 (82 % )端粒酶活性检测为阳性。 13例细胞学检查为不典型或不能确诊 ,有 7例端粒酶活性检测为阳性 ,随后组织病理诊断为恶性肿瘤 ,而 6例端粒酶活性检测为阴性标本有 5例最后组织病理诊断为良性肿块。 35例细胞学诊断为良性或取材不满意的FNA标本 ,有 4例端粒酶活性检测阳性而病理学检查有 2例为恶性肿瘤。结论 :FNA标本端粒酶检测诊断效率 (89.2 % )优于细胞学检查 (6 6 .2 % ) (U =3.15 >2 .5 8,P <0 .0 1) ,端粒酶活性检测是对FNA细胞学检查存在假阴性的补充检查并可作为涎腺恶性肿瘤诊断指标 ,特别是细胞学检查不能确诊的恶性肿瘤FNA标本。     

纯化小鼠腹水中抗富含组氨酸糖蛋白单克隆抗体方法的比较

用羟基磷灰石柱层析法，辛醚－硫酸铵沉淀法以及辛酸－硫酸按沉淀法加羟基磷灰石柱层析法从小鼠腹水中提取纯化抗富含组氨酸糖蛋白单克隆抗体。结果表明，羟基磷灰石柱层析法简便，快速，其单克隆抗体产量和纯度均高，适合大多数实验室采用。     

银染端粒重复扩增法的建立及初步应用

目的：建立检测端粒酶活性的银染端粒重复扩增法。方法：以银染替代放射性核素分析结果，加人标防止假阴性结果出同而建立银染端粒重复扩增技术，并运用此法检测３６例乳腺癌组织和２４例乳腺良性病变组织标本端粒酶活性，同时与溴乙锭染色的端粒重复扩增法进行比较。结果：３６例乳腺癌组织中３３例阳性（９１．７％），２４例乳腺良性病变组织无１例阳性。与溴乙锭染色端粒重复扩增技术相比，银染端粒重复扩增技术可见到更多更清晰