大炎肽与乳腺肿瘤恶化的关系

 目的 检测大炎肽在各类乳腺肿瘤组织中的分布,并验证它是否和乳腺肿瘤恶化相关。方法采用免疫组化辣根过氧化物酶染色检测。结果 乳腺癌的阳性染色率为90%,良性肿瘤的阳性率为20.5%。和其他肿瘤相比,乳腺癌着色差异显著（P〈0.005）。淋巴结转移癌中也有大炎肽分布。而良性组织中基本不表达。在乳腺癌样本中,大炎肽免疫着色强度随着组织增生、不典型增生和癌变的恶化而加深。结论 大炎肽可能在乳腺肿瘤的恶化过程中起到了一定的作用。     

应用原位杂交检测乳腺癌中大炎肽基因的表达

目的:探讨生物素标记的寡核苷酸探针,检测乳腺癌石蜡切片中大炎肽(daintain)基因的应用价值.方法:应用原位核酸杂交(ISH)和免疫组化(IHC)技术进行检测,并进行比较.结果:230例乳腺癌石蜡切片中,ISH检出的大炎肽基因阳性率为55%.ISH 法检测大炎肽基因阳性率高于IHC法测出的大炎肽阳性率(53%).大炎肽原位杂交信号主要出现在乳腺癌细胞核周边及其内外,相比之下,胞质区域的原位杂交信号较弱.原位杂交阳性率随乳腺癌淋巴结转移数目的增多而增高.结论:生物素标记的大炎肽寡核苷酸探针作为一种分子检测技术,可以较为理想地检测出乳腺癌组织中的大炎肽基因表达.     

应用原位杂交检测乳腺癌中大炎肽基因的表达

目的：探讨生物素标记的寡核苷酸探针,检测乳腺癌石蜡切片中大炎肽（daintain）基因的应用价值。方法：应用原位核酸杂交（ISH）和免疫组化（IHC）技术进行检测,并进行比较。结果：230例乳腺癌石蜡切片中,ISH检出的大炎肽基因阳性率为55%。ISH法检测大炎肽基因阳性率高于IHC法测出的大炎肽阳性率（53%）。大炎肽原位杂交信号主要出现在乳腺癌细胞核周边及其内外,相比之下,胞质区域的原位杂交信号较弱。原位杂交阳性率随乳腺癌淋巴结转移数目的增多而增高。结论：生物素标记的大炎肽寡核苷酸探针作为一种分子检测技术,可以较为理想地检测出乳腺癌组织中的大炎肽基因表达。     

人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达

目的构建人同种异体移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)基因的真核表达载体并在小鼠成纤维细胞系(NIH3T3)中表达,为进一步研究AIF-1蛋白的功能奠定基础。方法利用基因重组技术,构建带有AIF-1基因的2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1。利用脂质体法将2种重组质粒分别转染NIH3T3细胞,用荧光倒置显微镜及Western blot方法观察及鉴定AIF-1在细胞中的稳定表达及瞬时表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实,AIF-1基因片段被分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)与pEGFP-C1。荧光显微镜观察到NIH3T3细胞中有绿色荧光分布。Western blot结果表明,转染重组质粒的NIH3T3细胞中,AIF-1表达量明显增高。结论成功构建了2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1,经转染NIH3T3细胞株获得了AIF-1蛋白的瞬时表达及稳定表达。     

抗豌豆白蛋白1b单克隆抗体的制备与特性鉴定

豌豆白蛋白1b(peaalbumin1b,PA1b)最初从豌豆种子中分离获得[1],后来从大豆中也分离到其同源物-豆类胰岛素[2],二者均为含37个氨基酸的单链肽,第3、7、15、20、22、32位的氨基酸均为半胱氨酸。其三级结构也已研究清楚,属于富含半胱氨酸的肽类家族,因其具有潜在的新型抗生素特性和抗艾兹病毒特性而备受关注[3]。PA1b在牛胃液中能够保持完整的结构[4],水煮后仍能够保持其生物学活性[5]。是一种可杀灭谷类象鼻虫,对人和环境没有危害的昆虫毒剂。也能促进细胞的分裂[6],对损伤组织的生长具有明显的促进作用。豆类胰岛素是一种7S的碱性球蛋白(b…     

安定结合抑制因子影响大鼠胃酸分泌的初步观察

安定结合抑制因子(diazepam binding inhibitor,DBI)是1983年由大鼠脑发现的一种86肽(Proc Natl Acad Sci USA 80∶3531)。它的定名来自于它对安定结合γ-氨基丁酸A型受体的拮抗作用。陈正望等新近由猪小肠纯制出DBI,并发现它可抑制高糖刺激的     

胰岛素单克隆抗体制备及在2型糖尿病患者胰岛素测定中的应用

目的制备胰岛素单克隆抗体，用此抗体检测2型糖尿病患者血清胰岛素水平。方法以交联胰岛素-牛血清清蛋白为免疫原，免疫Balb／c小鼠，用杂交瘤技术制备得到4株稳定分泌胰岛素抗体的单克隆细胞株，对单抗效价、亚类、亲和常数进行了分析。利用所得单抗，通过竞争性抑制酶联免疫吸附法（ELISA）随机检测90例2型糖尿病患者血清和90例正常人血清中胰岛素的含量。结果制备的单抗亲和常数达10^11，除1株属IgGzh（k）外，其余3株为IgG1（k），检测发现2型糖尿病患者血清胰岛素含量低于正常人水平。结论2型糖尿病患者血清胰岛素平均低于正常人水平，可能由于胰腺功能衰竭所致，仍可用补充胰岛素缓解病情。约10％患者血清胰岛素含量高于正常人平均水平，可能由于体内胰岛素拮抗所致，不宜用胰岛素治疗。     

大炎肽与乳腺肿瘤恶化的关系

大炎肽（daintain）是从猪肠中纯化、含146个氨基酸的活性肽,基因定位于人类主要组织相容性复合体（MHC）区域,参与自身免疫和炎症反应。大炎肽分布在肠黏膜固有层、肝巨噬细胞、中枢神经系统和淋巴等免疫器官,可能是上述器官中的一种强抗原性标记物,因此称之为大炎肽。大炎肽不仅和炎症反应相关,而且参与细胞介导的自身免疫反应。实验证明,大炎肽存在于老鼠和人类肿瘤的活化细胞中。本研究用免疫组织化学方法研究大炎肽与乳腺肿瘤恶化的关系。     

靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移

目的构建靶向daintain/AIF-1的siRNA表达载体pRNAT-H1.1-daintain/AIF-1(pRNAT-DT),研究靶向daintain/AIF-1的siRNA对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和迁移的影响。方法设计合成靶向dain-tain/AIF-1的siRNA模板双链,将其克隆入siRNA空载体pRNAT-H1.1,用脂质体法导入乳腺癌细胞MDA-MB-231中;RT-PCR和Western印迹方法检测daintain/AIF-1以及cyclinD1的表达;MTT方法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Trans-well细胞板检测细胞迁移。结果针对序列1和序列2的siRNA表达载体pRNAT-DT均能有效抑制daintain/AIF-1的表达。靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制细胞增殖和cyclinD1表达,阻滞细胞周期由S期向G2/M期转变。同时,daintain/AIF-1表达的下调抑制了细胞的迁移。结论靶向daintain/AIF-1的siRNA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移。     

一个新的炎性细胞因子——大炎肽

胃肠道是人体内最大、最复杂的分泌器官,可分泌一系列具有生物学活性的多肽激素,因这类激素在脑中也有合成,故称为脑-肠肽。目前已确定的有60种,如血管活性肠肽(VIP)、生长抑素(SS)及大炎肽(daintain/AIF-1)等。脑-肠肽主要用于基础医学、生命科学研究和临床诊断试剂的开发。脑