清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化肺组织中iNOS表达的影响

目的：观察清肺化痰通络方对博莱霉素所致大鼠肺纤维化中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法：通过气管内灌注博莱霉素A5（BLMA5）复制大鼠肺纤维化动物模型，于灌服该方后3、7、14、28天，分别观察肺组织病理变化及iNOS的表达。结果：清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况，减轻病变的程度，并抑制iNOS的表达。结论：清肺化痰通络方可能通过抑制iNOS的异常表达。对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β1表达的影响

目的:观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5(BLMA5),对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果:对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β_1表达的影响

目的：观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5（BLMA5）,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果：对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

莪术瓜蒌汤含药血清诱导PGLH7 细胞凋亡的实验研究

 目的 探讨莪术瓜蒌汤含药血清对人肺癌细胞凋亡的诱导作用. 方法 不同剂量的莪术瓜蒌汤含药血清分别作用于PGLH7细胞,采用倒置显微镜、光学显微镜和激光共聚焦扫描显微镜观察PGLH7细胞凋亡的形态学特征并进行凋亡细胞鉴定;流式细胞仪观察含药血清与PGLH7凋亡的量效关系. 结果 经莪术瓜蒌汤含药血清处理后,倒置显微镜下可见PGLH7细胞变小变圆,悬浮于培养液中;HE染色光镜观察到PGLH7细胞体积缩小变圆,胞核内染色质呈半月形凝集在核膜周边;激光共聚焦扫描显微镜观察到凋亡早期细胞呈Annexin V高染而PI低染,细胞膜呈绿色而细胞核不着色;凋亡中,晚期细胞则Annexin V和PI均为高染,细胞膜呈绿色而细胞核呈红色;部分细胞的核呈碎片状或梅花状,为典型的细胞凋亡形态;流式细胞仪定量检测莪术瓜蒌汤含药血清中剂量、高剂量组随着作用时间的延长,诱导细胞凋亡的比例明显增加,有统计学差异（P〈0.05）. 结论 莪术瓜蒌汤具有一定的抗肺癌作用,其机制可能与诱导肺癌细胞凋亡有关.     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

Annexin法在分析肺癌细胞凋亡中的应用

目的：探讨Annexin法在检测肺癌细胞凋亡中的应用．方法：AnnexinV／PI染色后，在激光共聚焦显微镜下观察含中药血清诱导人肺癌细胞凋亡的情况。结果：凋亡早期肺癌细胞呈AnnexinV^＋／PI^-，细胞膜呈绿色而细胞核不着色；凋亡中、晚期细胞则AnnexinV^＋／PI^-，细胞膜呈绿色而细胞，陔呈红色；部分细胞的核呈碎片状或梅花状，为典型的细胞凋亡形态．结论：Annexin法是目前观察凋亡的理想方法，特别适用于凋亡细胞的早期检测．     

含中药莪术瓜蒌汤兔血清诱导人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨莪术瓜蒌汤含药血清对人肺癌细胞凋亡的诱导作用。方法 :用莪术瓜蒌汤不同剂量的水煎剂、全反式维甲酸乳剂和生理盐水给家兔灌胃 ,制备高、中、低剂量莪术瓜蒌汤含药血清 ,全反式维甲酸血清和对照血清 ,分别作用于PGLH7细胞 ,流式细胞仪观察含药血清与PGLH7凋亡的量效关系。结果 :莪术瓜蒌汤含药血清中剂量、高剂量组随着作用时间的延长 ,凋亡细胞所占的比例明显增加 ,有统计学差异 (P <0 .0 5)。结论 :莪术瓜蒌汤具有一定的抗肺癌作用 ,其机制可能与诱导肺癌细胞凋亡有关。