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目的:探讨lncRNA XIST 通过miR-32-5p/果蝇Zeste 基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)分子轴调控结直肠癌HCT-8 细胞的恶性生物学行为。方法:收集2014 年7 月至2018 年8 月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28 例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST 和miR-32-5p 的表达水平,双荧光素酶报告基因验证lncRNA XIST、miR-32-5p 和EZH2 的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2 的表达水平。CCK-8、Transwell 及Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测HCT-8 细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果:lncRNA XIST 在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8 细胞中表达最高(P<0.05 或P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST 靶向负调控miR-32-5p(P<0.05),且EZH2 是miR-32-5p 的靶基因。敲降lncRNA XIST 抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡(P<0.05或P<0.01);进一步实验证明,敲降lncRNA XIST 上调miR-32-5p 的表达水平,从而下调EZH2 表达水平,进而抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论:lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2 分子轴促进HCT-8 细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。 相似文献
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目的:探讨肝X受体α(LXRα)与蛋白酶体激活因子28γ(PA28γ)在胃癌中的表达以及两者对胃癌细胞生长的影响。方法:用qRT-PCR和免疫组织化学方法检测LXRα与PA28γ的mRNA与蛋白在35例胃癌和癌旁组织中的表达,分析LXRα与PA28γ蛋白表达与患者临床病理因素的关系以及两者的相关性。分别用流式细胞术、qRT-PCR、Westernblot检测过表达LXRα对胃癌AGS细胞的细胞周期、裸鼠体内生长以及细胞中LXRα对PA28γ表达的变化。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中LXRα的mRNA与蛋白表达明显降低,而PA28γ的mRNA与蛋白表达明显升高(均P0.05);两者蛋白的表达与胃癌患者主要临床病理因素均无明显关系(均P0.05);LXRα与PA28γ蛋白表达在胃癌组织中呈明显负相关(r=-0.452,P=0.006)。过表达LXRα后,AGS细胞的LXRα的mRNA表达明显升高,而PA28γ的mRNA与蛋白表达明显降低;细胞周期进程受到明显阻滞;在裸鼠体内的生长明显抑制,且移植瘤组织中的LXRα的mRNA与蛋白表达明显上调、PA28γ的mRNA与蛋白表达明显下调(均P0.05)。结论:LXRα在胃癌中表达下调,同时伴随PA28γ表达上调,两者之间的消长可能通过影响细胞周期进程而调节胃癌细胞的生长。 相似文献
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