恒河猴骨髓间充质干细胞分离培养及其生长特性

采用密度梯度离心和贴壁筛选方法分离纯化了恒河猴骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells from bone marrow of Rhesus monkey,RhBMSCs);通过表面抗原检测和核型分析对细胞进行了初步鉴定;通过生长曲线的绘制和细胞凋亡的检测探讨了细胞的生长特点。本实验获得的RhBMSCs形态以梭型为主,核型正常,CD29表达率为99.2%,CD34、CD45、HLA-DR表达率均低于3.2%,RhBMSCs表型符合间充质干细胞的特点,且纯度较高,细胞生长旺盛,但倍增时间有随传代数的增加而逐渐延长的趋势。本实验探讨了RhBMSCs的体外分离、扩增培养及鉴定的方法,并对其生长特点进行了初步观察,这不仅有助于进一步了解与之近似的人的骨髓间充质干细胞的相关特性,而且为以猕猴为对象的BMSC定向分化和组织修复等动物体内实验打下了基础。     

添加特需营养素的营养支持对手术创伤后肠黏膜形态和屏障功能的影响

目的 探讨补充益生菌等特需营养素对手术应激后机体肠道屏障功能、上皮紧密连接及微生态的影响.方法 SD大鼠70只随机分成对照组、全肠外营养组(TPN组)、普通肠内营养组(EN组)和生态免疫肠内营养组(EEN组).建立创伤应激模型,接受等氮、等能量营养支持后光镜和电镜下观察肠黏膜形态和紧密连接,比较肠道细菌脏器易位率、肠道菌群数量及肠黏膜occludin蛋白免疫组织化学表达.结果 (1)电镜下观察,TPN组肠上皮损伤程度较严重,而EN组和EEN损伤程度较轻,肠上皮紧密连接、微绒毛较完整;光镜下chiu分级,TPN组和EN及EEN组比较差异有统计学意义(P<0.05).(2)EEN组和EN组肠道跨膜结合蛋白表达明显优于TPN组,且EEN和EN组间差异也有统计学意义(P<0.05).(3)EEN组和EN组肝、肺和肠系膜淋巴结的肠道细菌易位率低于TPN组,差异有统计学意义(P<0.05).(4)EEN组和EN组肠道内乳酸杆菌和双歧杆菌数量均高于TPN组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 联合益生菌、肠道黏膜营养素、免疫营养素的营养支持能明显改善肠道微生态环境,维持肠道黏膜屏障和紧密连接,从而防止肠道菌群易位.     

免疫酶法检测血清EB病毒─IgA／VCA对鼻咽癌诊断的价值

应用免疫酶法对放疗前鼻咽癌病人９９０例、放疗后临床缓解鼻咽癌病人１１６８例、放疗后复发的鼻咽癌病人７６例、头颈部其它恶性肿瘤病人９６例、鼻咽部非癌疾病２１９２例和正常人２３２１名血清的ＥＢ病毒ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体进行了检测，阳性率分别为９５．９５％、７７．３９％、９８．６８％、３２．２９％、１２．５４％和０．１７％。结果提示免疫酶法检测ＩｇＡ／ＶＣＡ抗体对鼻咽癌诊断及监测病情有重要的临床价值。     

小鼠肺癌B7疫苗细胞FLB2C诱导的抗肿瘤免疫应答

目的：研究小鼠肺癌细胞与活化B淋巴细胞融合的疫苗细胞FLB2c诱导细胞免疫反应情况。方法：用母本细胞LA795作对照，采用体外混合淋巴细胞培养，观察FLB2c细胞刺激T细胞增殖情况，通过CTLL细胞MTT法测定FLB2c刺激T细胞产生分泌IL－2的作用，用FLB2c免疫小鼠，观察疫苗体内诱导小鼠CTL活性的能力。结果：FLB2c细胞在体外刺激T细胞增殖的作用明显比LA795强；FLB2c能刺激T细胞分泌IL－2，而LA795则不能；FLB2c细胞在体内能诱导CTL活性，其诱导CTL在体外对FLB2c细胞和LA795的杀伤率分别为34％－25．3％，而LA795诱导的CTL对FLB2c和LA795杀伤率分别为10．5％和12．25％，两者的杀伤率有显著性差异。结论：FLB2c细胞在体内外均能刺激T细胞免疫应答，其以能力明显强于未融合的LA795小鼠肺癌细胞，将其作为疫苗细胞将有可能通过提高机体免疫应答而达到治疗肺癌的效果。本研究为进一步探讨该疫苗的应用价值奠定了免疫学基础。     

不同分离及培养方法对大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖和生物学特性的影响

目的 探讨获得大量、高纯度、高活性骨髓间充质干细胞(BMSCs)的有效途径.方法 用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化BMSCs,在无血清、含小牛或胎牛血清以及不同体积分数的胎牛血清的培养基中培养,传代扩增,观察各组细胞形态、生长特性,测定生长曲线,免疫细胞化学染色鉴定表面抗原,电镜观察细胞显微结构.结果 密度梯度离心法可获得较纯的原代细胞,但细胞增殖缓慢,容易老化;贴壁法分离的细胞生长增殖迅速,经传代换液,第4代细胞基本纯化;小牛和胎牛血清均能促进BMSCs生长增殖,但在体积分数为0.12的胎牛血清中集落形成率最高(46.50%);细胞表达CD44、CD90,而CD14、CD45阴性;电镜下BMSCs符合干细胞的一般特性.结论 经多次换液、严格控制传代消化时间(2～3 min)和酶浓度(2.5 g/L),采用贴壁纯化法在含体积分数为0.12的胎牛血清L-DMEM培养液中培养可获得大量、高纯度、高活性的BMSCs.     

癌胚抗原单克隆抗体在肺癌的应用

Gold等在1965年首先发现癌胚抗原(CEA)是结肠癌的特异性抗原。随着对CEA的深入研究,证明在肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤其含量也增高、且其含量与肿瘤的消长相平行。我们采用CEA单克隆抗体(McAb)酶免疫法(EIA)对145例肺癌患者进行了血清CEA测定,以探讨CEA检测在肺癌的应用价值。对象和方法一、研究对象 1.经组织和/或细胞学检查证实的肺癌患者145例(其中疗前患者     

IL-3对小鼠骨髓来源树突状细胞分化发育的影响

比较 GM- CSF IL- 4与 IL- 3 IL- 4两种方法培养制备的树突状细胞 (Dendritic cell,DC)在形态、产量、免疫表型和抗原摄取能力方面的差异。用 GM- CSF IL- 4和 IL- 3 IL- 4分别诱导小鼠骨髓来源的前体细胞分化为成熟树突状细胞 ,通过相差显微镜、扫描电镜、激光共聚焦扫描显微镜进行形态观察 ,流式细胞术分析细胞免疫表型和摄取抗原能力。结果表明 ,IL- 3 IL- 4诱导的 DC产量高 ,细胞纯度好 ,形态上与 GM- CSF IL- 4诱导的DC类似 ;细胞免疫表型显示高表达 MHC 类分子 ,但低表达或不表达 CD80、CD86 ;IL- 3 IL- 4诱导的 DC具有强大的摄取抗原能力。 IL- 3替代 GM- CSF可诱导低表达共刺激分子的耐受型 DC     

异种胰岛移植临床研究专家共识(2019专家建议版)

为了顺利推进异种胰岛移植的临床研究,根据相关法律和规范,中华医学会器官移植学分会异种移植学组从总则、异种胰岛移植临床研究项目的申请与审批,对供体的要求、伦理要求,临床研究的技术和相关设备标准、生物安全性标准、项目的实施、项目管理等方面,制定了异种胰岛移植临床研究专家共识(2019专家建议版)。     

rhGH和IFN-γ对肝硬化大鼠肝组织中蛋白合成代谢的影响

目的 了解重组生长激素(rhGH)及γ-干扰素(IFN-γ)对肝硬化蛋白合成代谢的影响.方法 采用Proctor改良法,建立CCl4致大鼠肝硬化模型,合格模型随机分为空白对照组(NS,1 mL·d-1,sc)、阳性对照组(马洛替酯100 mg· kg-1·d-1,ig)、rhGH组(rhGH 0.8 IU· kg-1·...     

肺癌DC融合细胞诱导的抗肿瘤免疫应答

目的 研究肺癌DC融合细胞FLD－A11体内外诱导免疫应答的能力,方法 用MTT法测定FLD－A11细胞诱导淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测其诱导淋巴细胞分泌IL－2的水平;LDH释放法测定FLD－A11细胞免疫后小鼠脾淋巴细胞的特异性CTL活性。结果 FLD－A11有有效刺激淋巴细胞的增殖反应（SC：RC＝1：50时,SI＝2.38）,诱导淋巴细胞分泌IL－2。FLD－A11细胞免疫后,小鼠的胸腺和脾脏重量均高于对照组（P＜0.05）,脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著高于对照组。结论 FLD－A11细胞具有诱导初次抗肿瘤免疫应答的能力,不仅能在体外诱导淋巴细胞的增殖和IL－2的分泌,而且体内免疫接种也能引起小鼠免疫器官的增生反应,产生针对Lewis肺癌的特异性CTL杀伤作用。