复方熊胆眼药水对大鼠的慢性毒性

复方熊胆眼药水对大鼠的慢性毒性邓旭明梁焕春阎继业阮承迈韩红伟张金子（解放军农牧大学药学教研室，长春１３００６２）用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重１５０－１８０ｇ，♀♂各半，随机分为高剂量，中剂量，低剂量和空白对照４个组，分别给予复方熊胆眼药水０．１，１．０，...     

端粒酶突变体对肝癌细胞端粒酶活性的作用

目的　观察端粒酶突变体对肝癌细胞端粒酶活性和生长抑制的作用。方法　利用质脂体转染法在培养的肝癌细胞中导入端粒酶突变体，并与维甲酸和人参皂甙对照，利用TRAP－银染方法对不同时期肝癌细胞进行了端粒酶活性的测定，并观察各期细胞生长情况。结果　在加入端粒酶突变体后肝癌细胞端粒酶活性明显降低，细胞出现明显凋亡现象，其作用效果与维甲酸基本相同。结论　端粒酶突变体对肝癌细胞的抑制作用可能是通过抑制端粒酶活性途径实现的。     

四价流感病毒亚单位疫苗的制备和检定

目的建立四价流感病毒亚单位疫苗制备方法。 方法将4株毒种分别接种于9～11日龄的健康鸡胚尿囊腔中,在33～35 ℃培养箱培养48～72 h后,冷胚处理,收获尿囊液,经澄清、病毒灭活、裂解和纯化,除菌过滤制成单价疫苗原液;利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法,分析有效成分及纯度。将收获的4种单价疫苗原液进行混配,制成四价流感病毒亚单位疫苗。最终按《中华人民共和国药典》2015年版对成品疫苗进行全面检定。 结果成功制备出四价流感病毒亚单位疫苗,其有效成分血凝素含量占总蛋白比例为91.4%。4种疫苗株血凝素含量分别为H1N1：30 μg/ml、H3N2：34 μg/ml、B1：36 μg/ml、B2：30 μg/ml,对成品的检定完全合格。 结论本研究所制备的四价流感亚单位疫苗符合生产和检定规程要求。     

乳腺癌的hTERT基因表达和端粒酶活性关系分析

目的为了分析端粒酶催化亚基在乳腺癌组织中的表达情况.方法对52例各型乳腺癌病理样本进行了端粒酶活性(TRAP-ELISA方法)和端粒酶催化亚基(hTERT)mRNA表达检测(RT-PCR).同时还比较了同一样本的癌组织和癌组织端粒酶活性和hTERT的表达情况.结果表明乳腺癌组织样本中94%呈端粒酶阳性,癌旁组织中有部分样本(2/35)呈弱阳性;hTERT(P＜0.01).结论认为端粒酶活性可能成为乳腺癌恶性程度或肿瘤易发指标,并且有可能采用更为廉价的RT-PCR进行辅助诊断.     

人喉癌细胞端粒酶催化亚基cDNA片段的扩增与克隆

目的 :测定人喉鳞状上皮癌 hep- 2细胞的端粒酶活性水平并获得 hep- 2细胞中 h TERT c DNA片段的克隆。方法 :采用 TRAP- ELISA法测定酶活性水平 ,RT- PCR技术扩增获得目的片段。利用酶切法、PCR法和序列分析法对所获克隆进行检测。结果 :hep- 2细胞具有较高的端粒酶活性水平 ,获得含h TERT c DNA片段的克隆。结论 :利用 RT- PCR法能够从具有较高端粒酶活性水平的 hep- 2细胞中扩增获得 h TERT c DNA片段     

肾癌组织的端粒酶活性和端粒长度的测定

目的 :探讨肾癌组织端粒酶活性和端粒长度变化。方法 :分别用 TRAP- EL ISA及 Southernblot方法对 4 0例各型肾癌病理样本进行端粒酶活性和端粒长度的测定。结果 :肾癌组织样本中 90 %呈端粒酶阳性 ,癌旁组织中有部分样本 (2 / 2 2 )呈弱阳性。结论 :端粒酶活性及端粒长度可能成为判定肾癌恶性程度或肿瘤易发性的检测指标。     

用长距PCR法构建恶性疟原虫cDNA表达文库

目的 构建恶性疟原虫cDNA表达库。方法用Trizol试剂盒提取总RNA，以经修饰的SMART寡聚核昔酸引物－CDSⅢ引物直接用总RNA选择性地反转录成单链cDNA，再用长距PCR(LD)方法选择性地扩增出双链cDNA，经蛋白酶K消化和酶切后，用玻璃奶试剂盒回收200bp以上DNA片断，经与载体λTeiplEX2连接和蛋白抽提物体外包装，构建成cDNA库并对库进行了初步的鉴定。结果 构建了高滴度，高重组率的恶性疟原虫cDNA表达库。结论 所构建的疟原虫cDNA库适合进一步筛选抗疟原虫药物结合蛋白基因。     

国产四价流感病毒亚单位疫苗在小鼠体内的安全性和免疫原性

目的  评价国产四价流感病毒亚单位疫苗在小鼠中的安全性和免疫原性。方法  首先，按中国药典2015年版三部的方法对疫苗进行鉴别试验和急性毒性试验。然后，采用随机区组法将40只无特定病原体级雌性昆明小鼠分为4组，每组10只，分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 g疫苗和PBS（对照），1.0 ml/只。注射后21 d对小鼠眼眶采血，用血凝抑制法检测小鼠血清抗体水平，并统计抗体阳转率。采用t检验对各组数据进行比较。结果  鉴别试验结果表明疫苗的抗原性与推荐病毒株一致。急性毒性试验显示，疫苗组和对照组小鼠的外观、行为、分泌物、排泄物均无异常，无小鼠死亡。在14 d观察期内，疫苗组和对照组小鼠的体重分别为22.0～33.0和21.8～33.7 g，差异无统计学意义（t=－1.90～1.03，P值均>0.05），且均较免疫前（21.4～23.6和21.2～23.4 g）有不同程度增加。小鼠心、肺、脑、肝等脏器均无明显病理改变。3个剂量疫苗均可诱导小鼠产生较高滴度的血清抗体（1:69～1:998），而对照组仅为1:6～1:25（t=3.68~4.88，P值均<0.01），其中15.0、30.0 g剂量组的抗体阳转率达到100%。结论  四价流感病毒亚单位疫苗具有较好的安全性和免疫原性。     

端粒(酶)同癌症与衰老关系的研究进展

端粒是真核生物染色体的天然末端,具有稳定染色体结构,避免遗传信息在复制过程中丢失的作用.端粒酶是端粒复制所必须的一种特殊的DNA聚合酶,在大多数的正常人体细胞中没有活性.在近年来的研究中,人们发现“衰老者的端粒缩短”,而且在约85％的肿瘤细胞中检测到了端粒酶活性.这些事实提示人们:端粒、端粒酶同癌症与衰老之间存在相关性.