白血病端粒酶活动度与三氧化二砷治疗观察

目的观察白血病端粒酶活性与三氧化二砷的治疗效果。方法端粒重复扩增法结合光密度测定和临床治疗观察。结果急性白血病均表现出较高的端粒酶活性，用三氧化二砷治疗后，获得临床血液学缓解及端粒酶活性降低，并在维持缓解间保持较低水平。结论观察端粒酶活动度有助于l临床判断病情转归及三氧化二砷的治疗反应。     

基于腺相关病毒血清型8型介导的Gjb2基因c.109G>A纯合突变耳聋小鼠的基因治疗

目的·探究腺相关病毒血清型8型(adeno-associated virus serotype 8,AAV8)介导的野生型缝隙连接蛋白β2 (gap junction protein β 2,Gjb2)基因在Gjb2基因c.109G>A纯合突变小鼠(简称Gjb2纯合突变小鼠)耳蜗支持细胞区域的表达情况及安全性,以及对呋塞米引起的听力下降的影响。方法·将带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的AAV8-GFP病毒,经耳蜗中阶注射入新生Gjb2纯合突变小鼠的内耳,注射14 d后取小鼠耳蜗,荧光显微镜观察基底膜GFP的表达情况。将载有野生型Gjb2基因的AAV8-GJB2-GFP病毒经中阶注射入新生Gjb2纯合突变小鼠内耳后,于4周后通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测耳蜗Gjb2 mRNA及其编码的连接子蛋白(connexin 26,CX26)的表达水平,通过免疫荧光法观察其具体表达位置。通过听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)实验评价新生纯合突变小鼠中阶注射AAV8-GJB2-...     

不同月龄C57BL/6J小鼠耳蜗线粒体和NAD+水平比较

目的·研究不同月龄小鼠耳蜗中线粒体及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD⁺)水平的变化,探索年龄相关性听力下降可能的机制。方法·分别选取1月龄、4月龄、8月龄及12月龄4组C57BL/6J雄性小鼠各10只,采用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)和畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emission,DPOAE)测定4组不同月龄小鼠听觉功能;通过实时荧光定量PCR (RT-qPCR)比较4组不同月龄小鼠耳蜗中线粒体能量代谢相关基因Ndufb5 (NADH:ubiquinone oxidoreductase subunit B5)、Sdha (succinate dehydrogenase complex flavoprotein subunit A)、 Sdhc (succinate dehydrogenase complex subunit C)和Atp5b (ATP synthase, H+transporting mito...     

电离辐射诱导人肠上皮细胞焦亡机制

目的 探讨消皮素E(GSDME)介导的细胞焦亡参与辐射诱导的肠损伤分子机制及消皮素（GSDM）蛋白家族是否通过通用的信号通路调控细胞焦亡。方法 利用人正常结肠上皮NCM460细胞和人结肠癌HT-29细胞辐射不同剂量及辐射后不同时间,通过观察焦亡小泡、细胞存活、焦亡执行蛋白的切割进行焦亡指标的检测,对HT-29细胞过表达GSDME并辐射后通过RNA测序技术,对焦亡相关差异基因进行富集分析,筛选相关通路差异基因进行验证。结果 辐射诱导NCM460细胞发生显著的细胞焦亡,HT-29细胞过表达GSDME后辐射诱导GSDME激活发生显著的细胞焦亡。成功模拟人肠细胞焦亡状态,过表达GSDME-N和GSDMD-N具有超过50%的焦亡状态下的差异基因;测序分析显示,焦亡状态下的基因主要富集在免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路等。结论 GSDME激活介导了辐射诱导肠细胞焦亡的发生,GSDM蛋白家族通过通用的调控模式参与细胞焦亡,辐射通过免疫反应、炎症反应和Rap1信号通路诱导GSDME/D激活调控细胞焦亡。     

全髋关节置换术治疗髋臼骨折后继发创伤性髋关节炎的中远期疗效分析

目的 研究对髋臼骨折后继发创伤性髋关节炎患者进行全髋关节置换术治疗的中远期效果。方法 选择2020年2月至2022年3月东部战区总医院秦淮医疗区收治的150例髋臼骨折内固定术后继发创伤性髋关节炎患者的临床资料,根据治疗方式不同分为对照组65例（采用保守治疗）和观察组85例（采用全髋关节置换术治疗）。随访1年,评估治疗前、术后3个月、术后1年的Harris髋关节功能评分,比较两组并发症发生率。结果 治疗前,两组患者Harris评分差异无显著性（P>0.05）;治疗3个月及1年后,观察组Harris评分均高于对照组,差异有显著性（P<0.05）;随访1年后,观察组优良率高于对照组,并发症发生率低于对照组,差异有显著性（P<0.05）。结论 对髋臼骨折后继发创伤性髋关节炎患者进行全髋关节置换术治疗,可显著提高髋关节功能评分,改善髋关节功能,降低并发症发生率。     

端粒酶催化亚基启动子调控osm基因表达对瘤细胞抑制作用的研究

为了探讨端粒酶催化亚基(hTERT)启动子调控抑瘤素(oncostatin M,osm)基因在端粒酶表达阳性的瘤细胞中的特异性及对瘤细胞和正常细胞增殖的影响,构建了phTERTosm表达载体,分别转染瘤细胞和正常细胞,用MTT法检测osm基因表达对瘤细胞和正常细胞增殖的影响。结果表明,hTERT启动子调控osm基因对端粒酶表达阳性瘤细胞HepG2、HeLa、Glc和A549的增殖有明显的抑制作用,抑制率为12.4%～46%;而对端粒酶阴性的正常人胚肺成纤维细胞没有明显的影响,提示hTERT启动子能明显限制osm的毒性作用仅在端粒酶阳性表达的瘤细胞中,而对端粒酶表达阴性细胞则无抑制作用。     

端粒酶催化亚基脱氧核酶抑制A549/DDP耐药细胞生长的实验研究

背景与目的 端粒酶在多种肿瘤中均有表达，并且可能参与肿瘤耐药。本研究的目的是观察端粒酶催化亚基脱氧核酶对A549／DDP耐药细胞生长的抑制作用，探讨端粒酶作为耐药肿瘤细胞治疗新靶标的可能性。方法 合成针对端粒酶催化亚基mRNA的脱氧核酶，脱氧核酶体外切割端粒酶催化亚基mRNA片段。采用TRAP法检测转染脱氧核酶的A549／DDP细胞端粒酶活性，采用MTT法分别检测脂质体转染脱氧核酶、顺铂及其混合物对A549／DDP细胞生长的作用。结果 端粒酶脱氧核酶在体外可以切割端粒酶催化亚基RNA，并具有剂量依赖关系；转染脱氧核酶可抑制A549／DDP细胞端粒酶活性；端粒酶脱氧核酶0．25umol／L作用72h，A549／DDP耐药细胞生长抑制率可达32．9％，同3mg／L顺铂联合使用时抑制率可达60．5％，两者相互作用指数CDI=0、9。结论 端粒酶催化亚基脱氧核酶可明显降低端粒酶活性，显著抑制人肺腺癌A549／DDP耐药细胞的生长，并且与化疗药物顺铂有协同作用，提示端粒酶有可能成为耐药肿瘤细胞新的治疗靶标。     

正常人白细胞与急性白血病细胞端粒酶分析

目的探讨端粒酶活性检测在白血病临床病情分析中的价值。方法采用改进的端粒重复扩增法（ＴＲＡＰ）分析正常人白细胞和急性白血病细胞的端粒酶活性。结果急性白血病细胞表现出很高的端粒酶活性,并与白血病病情及异常染色体核型密切相关,而正常白细胞活性很低或无。结论分析白血病细胞异常端粒酶活性,对白血病诊断和临床治疗具有一定意义。     

端粒酶催化亚基启动子调控caspase-3基因表达对瘤细胞抑制作用的研究

通过构建端粒酶催化亚基（hTERT）启动子调控caspase3基因的真核表达载体,采用RT-PCR、短时转染、MTT、流式细胞和动物实验等研究方法,探讨hTERT启动子调控caspase3基因在端粒酶阳性的瘤细胞中表达的特异性及在体内外的抑瘤作用。结果表明,hTERT启动子调控caspase3基因在端粒酶阳性的瘤细胞HepG2中明显表达,而在正常人胚肺成纤维细胞（human embryonic lung fibroblast,HEL）中未见表达;caspase3的表达能明显对端粒酶阳性的瘤细胞HepG2、HeLa、Glc和A549的增殖产生明显的抑制作用,抑制率为10.5%～37.9%;同时也明显诱导HepG2、HeLa、Glc和A549细胞发生凋亡,凋亡率为15.39%～35.19%;而对端粒酶阴性的正常细胞HEL没有明显的影响。动物实验结果显示,caspase3基因转染对HepG2细胞的体内生长产生了明显的抑制作用。