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背景:血管内皮生长因子基因转染治疗组织损伤的研究倍受关注,构建稳定可靠的人血管内皮生长因子真核表达载体有重要意义。目的:克隆人血管内皮生长因子基因血管内皮生长因子165片段,构建pcDNA4-HisMax-C/VEGF165真核表达质粒,并验证其转染大鼠骨骼肌细胞的可靠性。方法:采用反转录-聚合酶链反应技术,从人卵巢癌患者外周血中提取并扩增出血管内皮生长因子165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA4-HisMax-C真核表达载体上,构建成pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒,聚合酶链反应扩增,分别用酶切电泳分析和DNA测序的方法对提取和重组DNA进行鉴定。pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒转染骨骼肌细胞1周后反转录-聚合酶链反应提取血管内皮生长因子基因并酶切电泳鉴定。结果与结论:构建的重组质粒目的基因片段为人血管内皮生长因子165cDNA,对大鼠骨骼肌细胞转染后检测到血管内皮生长因子165基因片段。提示成功地克隆了血管内皮生长因子165基因并构建了其真核表达质粒,能以此为载体转染至骨骼肌细胞,并已整合到骨骼肌的基因组参与转录,证明了其转染的有效性。 相似文献
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随着社会的进步,人民生活水平的不断提高,人们对美的追求也越来越迫切,要求做美容手术的人有日益增多的趋势。个别牙齿畸形由于影响美观及功能,要求外科整复的患者很多。对于个别牙齿的外科矫治,我们认为不应看做是简单的小手术,不予以重视。要认识到矫治的成功与否,直接影响到患者的身心健康。针对我们收治的患者,有必要对以下问题进行探讨。 1 手术适应证的选择;患者的年龄一般为18岁以下,年龄过小,由于颌骨正在发育,既使进行外科矫治,术后也易复发。被矫治的牙齿要求无严重龋坏,无牙周病;牙周不健康的牙齿矫治后,因暂时的血运欠佳,易 相似文献
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