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目的探索TSGF和hMAM表达指标对乳腺癌细胞外周血微转移诊断的应用价值。方法分离受检者外周血单个核细胞,TRIZOL液提取总RNA,作RT-PCR并用-βactin监控;确认的cDNA先作普通PCR扩增,再作荧光定量PCR扩增。血清作TSGF检测。结果64例标本有63例确认转录为cDNA,其中乳腺癌43例、良性乳腺肿瘤和正常对照各10例。经普通PCR后再作荧光定量PCR,乳腺癌hMAM表达阳性率为53.3%、良性乳腺肿瘤和正常对照均无阳性,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤或正常对照组间hMAM表达有显著差异;淋巴结转移组与未转移组,hMAM表达有显著差异。TSGF阳性率为1.6%,乳腺癌组与良性乳腺肿瘤组及正常对照组间无显著差异。结论二次PCR的灵敏度可成功检出外周血hMAM的表达,而单次PCR法的灵敏度不够;外周血hMAM表达指标可用于监测乳腺癌细胞微转移,但未见TSGF指标对乳腺癌微转移的监测价值。 相似文献
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乳腺癌患者外周血CK19基因表达的检测及临床价值分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探索外周血CK19基因表达的检测及在乳腺癌诊断中的应用价值。方法应用逆转录结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌MDA-MB453细胞株血液标本模型和280例临床标本的CK19表达,同时检测三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)表达作为PCR方法的监控指标。结果逆转录结合FQ-PCR检测MDA-MB453细胞株血液标本模型的灵敏度为107个血细胞中含1个乳腺癌细胞的水平。280例外周血临床标本的CK19表达,乳腺癌组(38/120)与非乳腺癌组(20/80)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组(38/120)与正常对照组(2/80)比较,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(21/53)与未见淋巴结转移组(17/67)比较,差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌术后2年以上者,复发组(3/9)与未复发组(6/31)比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。GAPDH表达均阳性。结论CK19是上皮细胞性癌细胞的较特异指标,诊断乳腺癌的特异性不强,但可用作病理学检查的补充,或结合其他特异性指标共同诊断乳腺癌微转移和复发,具有一定的价值。 相似文献
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前列腺癌雄激素依赖转化后细胞内雄激素受体表达变化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨雄激素受体(AR)在前列腺癌雄激素依赖特性转化过程中的作用。方法:对33例晚期前列腺癌患者进行雄激素阻断治疗并作长时间随访,其间有18例发生了雄激素依赖转化.15例未发生雄激素依赖转化。采用免疫组织化学及RT—PCR法测定18例患者雄激素依赖转化前后及15例患者雄激素阻断治疗前后癌细胞内AR蛋白及AR基因的表达情况。结果:18例患者雄激素依赖转化前后AR蛋白及AR基因的表达分别为(1.33±0.97VS3.11±0.76)和(28.41±3.38Ct vs 36.73±1.81Ct),两者之间差异有统计学意义(P〈0.01);15例患者雄激素阻断治疗前后AR蛋白及AR基因的表达分别为(1.47±0.83 vs 1.40±0.99)和(29.50±3.08Ct vs29.14±3.23Ct),两者之间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:AR基因及AR蛋白表达增强是前列腺癌雄激素依赖转化的原因之一。 相似文献
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目的探讨原发性甲状腺功能减退症患者血清中25-羟基维生素D[25-(OH)D]变化及临床意义。方法用电化学发光法检测86例原发性甲状腺功能减退症患者与56例健康人群(正常对照组)血清25-(OH)D水平,用化学发光法检测上述人群血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、甲状腺素(T4)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)及甲状旁腺激素(PTH)水平,用邻甲酚酞络合酮分光光度法检测两组人群血清总钙。结果原发性甲状腺功能减退症患者血清25-(OH)D和总钙水平明显低于正常对照组(P<0.05),两组间PTH差异无统计学意义(P>0.05)。原发性甲状腺功能减退症患者组中,25-(OH)D正常和缺乏者的FT4和TSH比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论原发性甲状腺功能减退症患者的维生素D和总钙水平较低,需及时检测并补充维生素D。 相似文献
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目的:筛选能高效抑制乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453端粒逆转录酶(hTERT)基因表达的RNA干扰靶点,为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法:构建针对hTERT基因的三种siRNA(siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3),分别转导入乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-453.同时以无同源性的siRNA-hTERT4作阴性对照,含GFP基因的载体作阳性对照.应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和Western Blot技术检测siRNA处理前后hTERT基因表达变化;MTT法检测细胞生长率;流式细胞术分析基因沉默对细胞凋亡的影响.结果:与阴性对照组相比,siRNA-hTERT1,siRNA-hTERT2和siRNA-hTERT3三个实验组siRNA转染细胞后,hTERT的mRNA表达量下调至21%~40%,蛋白表达下降至50%,而三个实验组间差异无统计学意义(P>0.05).转染48 h后,MCF-7细胞抑制率分别为(57±4.3)%,(61±4.3)%,(65±6.0)%;MDA-MB-453细胞抑制率分别为(45±5.1)%,(45±4.1)%,(50±4.0)%.流式细胞仪检测结果显示,细胞凋亡率有所增加,MCF-7细胞为(18.90±0.11)%,(27.30-I-0.18)%,(27.00 4-0.16)%;MDA-MB-453细胞为(12.25 4-0.17)%,(17.80±0.19)%,(20.60 4-0.21)%.结论:经siRNA-hTERTl,siRNA-hTERT2,siRNA-hTERT3处理均可明显抑制MCF-7和MDA.MB-453乳腺癌细胞的增殖及hTERT基因的表达,能够明显促进细胞的凋亡. 相似文献
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我们以乳腺癌MDA-MB-453细胞株为模型,用小片段RNA(siRNA)特异性抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,了解其促肿瘤细胞凋亡的效果. 相似文献
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目的分析和评价循环增强荧光免疫技术(cyclic enhanced immunofluorescent assay,CEIFA)与化学发光免疫法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)在血浆B型脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)检测中的应用价值。
方法采用CEIFA和CLIA法分别检测50例心内科患者血浆BNP的水平,对检测结果的相关性、回收率、精密度、样本稳定性进行评估。
结果与CLIA法比较,CEIFA法回归方程为Y=0.975X+2.910 (r=0.987,P<0.01),回收率为94.49%~100.53%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.85%~6.66%和6.21%~12.52%,高值和中值样本结果的稳定性更高。
结论CEIFA法检测BNP具有较好的性能,较CLIA法有一定的优势,可满足临床试验室需求。 相似文献
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前列腺癌雄激素依赖转化后雄激素受体基因表达变化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
背景与目的:前列腺癌雄激素依赖性转化的机制目前尚不完全清楚,多数认为雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的变化可能起重要作用,本研究主要探讨AR基因表达变化在前列腺癌雄激素依赖转化过程中的作用.方法:通过对33例晚期前列腺癌患者进行雄激素阻断治疗并长时间的随访,期间有18例患者发生了雄激素依赖转化,15例患者未发生雄激素依赖转化.采用RT-PCR法测定18例患者雄激素依赖转化前后及15例患者雄激素阻断治疗前后癌细胞内AR基因的表达情况.结果:18例患者雄激素依赖转化前后AR基因的表达分别为[(28.4±3.4) Ct vs (36.7±1.8)Ct],两者之间差异有统计学意义(t=14.43,P<0.001),15例患者雄激素阻断治疗前后AR基因的表达分别为[(29.5±3.1)Ct vs (29.1±3.2)Ct],两者之间差异无统计学意义(t=0.409,P>0.05).结论:AR基因表达增强是前列腺癌雄激素依赖转化的原因之一. 相似文献