人类染色体17p13.3位点新克隆基因HC56,HC71 和HC90在白血病细胞的表达

为研究人类染色体17p13．3位点新克隆的基因HC56，HC71和HC90在白血病细胞中的表达，应用同位素标记的、以βM2基因作为内参的半定量RT—PcR法，检测35例急性白血病和4株白血病细胞系的Hc56，Hc70和HC90基因的表达。结果显示，急性淋巴系白血病病人的HC90基因和T淋巴系白血病细胞系Jurkat细胞HC90基因表达水平降低。急性髓系白血病病人HC71基因表达水平降低。HC56基因表达在急性白血病和正常对照间未见显差异。结论：在人类白血病有HC70和HC90的基因表达异常。     

几种免疫抑制剂联合方案治疗重型再生障碍性贫血的疗效比较

重型再生障碍性贫血(ＳＡＡ)进展迅速,预后凶险,免疫功能紊乱在其发病机制中起重要作用[1]。近年发现联合运用免疫抑制剂(ＩＳ)可提高疗效,但组合方案及疗效报道不一[2,3]。我科以含抗胸腺细胞球蛋自(ＡＴＧ)、环胞霉素(ＣｓＡ)及大剂量甲基强的松龙(ＨＤＭＰ)方案,并用大剂量免疫球蛋白(ＨＤＩＶＩｇＧ)或重组人粒细胞集落刺激因子(ＧＣＳＦ)联合康力龙或达那唑治疗,比较不同联合方案的合理应用。现将结果报道如下。对象与方法1.对象:1995年12月～2000年1月住院的14例初诊患者,重型再生障碍性贫血Ⅰ型(ｓＡＡⅠ)5例,重型再生障碍性贫血Ⅱ型…     

应用RT-PCR分析真性红细胞增多症病人TCRVβ亚家族T细胞的表达

近几年,国外相继报道对T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的分析,从而了解肿瘤或自身免疫性疾病病人的细胞免疫功能状态,并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的实验依据。本文利用RT-PCR方法分析3例真性红细胞增多症病人Vβ亚家族T细胞的表达情况。     

急性单核细胞白血病病人外周血TCR Vβ T细胞克隆性增殖特点

目的:了解急性单核细胞白血病(ANLL-M5亚型)病人TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法:利用RT-PCR分别扩增9例M5病人外周血单个核细胞的TCR Vβ 24个亚家族基因的CDR3,了解病人各Vβ亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞克隆性。结果:9例病人仅存在1-10个Vβ亚家族T细胞。基因扫描分析显示,8例病人外周血中的某些Vβ亚家族出现寡克隆性T细胞,Vβ2寡克隆T细胞发现于6例病人中,2例分别存在Vβ7或Vβ9克隆性T细胞,2例除Vβ2外,还分别出现Vβ7或Vβ21的寡克隆T细胞。结论:结果提示M5病人外周血Vβ亚家族T细胞的倾斜性分布特点,并存在克隆性增殖的T细胞,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性免疫反应,并以Vβ2的克隆性增殖T细胞为主,提供了明显的趋向性,它可能与M5细胞相关抗原有关。     

病例组合4及讨论

改良M_2方案治疗多发性骨髓瘤13例报告我科于1994年1月～1998年12月采用改良的M_2方案治疗13例Ⅲ期多发性骨髓瘤病人,取得了较好的临床效果,现总结报告如下.1 资料与方法1.1 资料 初治患者13人,其中男9人,女4人,中位年龄57岁(33～76岁).诊断符合kyle提出的多发性骨髓瘤最低诊断标准.按 Durie-Salmon分期,属Ⅲ期 A10人,Ⅲ期B3人.1.2 治疗方案组成和具体用法 环磷酰胺600～800mg/天,静滴,第1天,;长春新碱2mg/天,静注,第1天;米托蒽醌10～15mg/天,静滴,第1天;司莫司汀 50～100mg/天,口服,第1天;马法兰 12～18mg/天,口服,第 1～4天;强的松 50～80mg/天,口服,第1～7天.一个疗程后间隔5～6周,重复治疗一次,若2个疗程无效者或有效者以后出现耐药复发情况时,改换由长春新     

CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化

在我们前期研究发现慢性髓系白血病（CML）病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病个外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR Green I实时荧光定量RT—PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和（链的表达水平,以132微球蛋白基因（132MG）作为内参照,采用相对定量公式：2^-△Ct×100％,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明：CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2．344％,0．515％和3．516％（中位数）,与健康对照组比较（3．093％,0．853％和2．302％）并没有显著性差异（P=0．072,P=0．190,P=0．615）,而CML中CD3ζ链基因的表达水平（0．395％）则明显低于健康对照组（1．538％）（P〈0．001）。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε〉CD3γ〉CD3δ〉CD3ζ,而对照组中则为CD3γ〉CD3ε〉CD3δ〉CD36ζ结论：本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。     

APL患者外周血TCR Vα亚家族T细胞分布和增殖特点

目的:了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者外周血TCRVα亚家族T细胞的分布及其克隆性。方法:利用RT-PCR扩增9例APL患者和10例正常人外周血单个核细胞中29个TCRVα亚家族基因的互补决定区3(CDR3),了解TCRVα亚家族T细胞的分布;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性。结果:9例患者外周血T细胞所能检测到的Vα亚家族T细胞分别为1~9个亚家族,以Vα3和Vα19出现频率较高;克隆性增殖T细胞可在8例患者中检测到,以Vα3、Vα26和Vα27出现克隆性T细胞频率较高(3/8)。正常人外周血T细胞中表达绝大多数Vα亚家族,呈多克隆性增殖特点。结论:APL患者外周血Vα亚家族T细胞存在明显的倾斜性分布和克隆性增殖特点,后者可能是对APL细胞抗原的反应性增殖,是否具有特异性杀伤作用,有待进一步检测。     

急性髓系白血病中eIF4E高表达与疾病进展相关

本研究检测未治疗、未缓解/复发及缓解期间急性髓系白血病(AML)和其他良性血液病患者骨髓细胞中eIF4E基因表达水平并分析其与疾病进展的关系。采用SYBR Green I荧光定量PCR和相对定量分析法检测30例AML患者(M2型6例,M3型5例,M4型8例,M5型10例,M6型1例),11例AML化疗后完全缓解患者和20例非肿瘤性血液病患者骨髓单个核细胞的eIF4E表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算eIF4E基因表达水平。结果表明:AML未治疗及未缓解/复发组患者骨髓细胞eIF4E表达水平(7.098±5.544)%明显高于非肿瘤患者(0.248±0.163)%(P<0.01)和化疗后完全缓解患者(0.964±0.312)%(P<0.01),各AML亚型之间不存在统计学差异,尽管M4、M5亚型的表达水平相对较高。非白血病患者与缓解患者比较,eIF4E表达水平不存在显著性差异。结论:eIF4E基因在急性髓系白血病细胞中出现高表达,并随着疾病的缓解而明显降低,因此eIF4E有可能作为监测白血病进展的一项参数。     

APL细胞诱导脐血TCR Vα和Vβ亚家族T细胞增殖和细胞毒性研究

目的 了解急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞体外诱导脐血T细胞的TCR Vα和Vβ亚家族克隆性增殖及针对APL细胞特异性杀伤情况.方法 采用混合淋巴细胞和肿瘤细胞培养(MLTC)方法,利用APL细胞体外诱导脐血T细胞增殖,用RT-PCR和基因扫描分析MLTC后T细胞的29个TCR Vα亚家族基因和24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解各亚家族的T细胞克隆性增殖特点,并应用LDH法分析诱导增殖的T细胞针对APL细胞特异性杀伤作用.结果 经APL细胞刺激后增殖的脐血T细胞表达部分Vα和Vβ谱系基因,并在Vα10、Vβ5和Vβ15出现有克隆增殖趋势,诱导后T细胞对APL细胞的杀伤性均高于未诱导组的T细胞.结论 APL细胞体外诱导脐血T细胞出现抗原相关的TCR Vα和Vβ亚家族优势利用和克隆性增殖;诱导后的T细胞对APL细胞具有特异性细胞毒性作用.     

AML-M1相关TCR Vβ克隆性增殖T细胞的研究

目的：了解急性髓细胞白血病M1亚型（AML－M1）患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法：采用RT－PCR扩增9例M1患者外 周血的单个核细胞的TCR Vβ24个亚家族基因，分析其TCR Vβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析，了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果：不同标本中可检测到2－5个Vβ亚家族T细胞，以Vβ2、Vβ3、Vβ17和Vβ19为常见，并在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ8、Vβ9和Vβ19中发现克隆性生长T细胞。结论：M1病人外周血TCR Vβ亚家族T细胞表达呈现明显的选择性和克隆性增殖情况，这可能与M1细胞相关抗原有关，且克隆性增殖Vβ亚家族分布以个体特异性为主。