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RNAi沉默结肠癌细胞LOVO中livin基因的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断结肠癌细胞系LOVO中livin基因的表达,并研究livin基因沉默后对LOVO细胞增殖和克隆形成产生的影响。方法:用真核转录载体pSilencerTM4.1-CMV neo构建针对livin基因的重组RNAi真核转录载体pSilencer4.1-L1和pSilencer4.1-L2,脂质体法转染结肠癌细胞系LOVO,通过RT-PCR、免疫印迹实验检测livin的表达变化,并用克隆形成实验、MTT法检测转染后LOVO细胞在细胞增殖、克隆形成等方面的变化。结果:重组载体pSilencer4.1-L1有效地阻断了LOVO细胞中livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P〈0.01)。pSilencer4.1-L1转染LOVO细胞后,与对照组相比细胞生长速度明显变慢,其细胞数在72h时与对照组相比减少约30%;克隆形成率仅为15%,与对照组相比下降了约70%。结论:成功构建了可有效沉默livin基因的RNAi干涉载体,初步证明livin基因在结肠癌细胞的分化增殖等方面所起的重要作用,为进一步阐明livin基因与结肠癌的关系以及以livin基因为靶点的结肠癌基因治疗研究奠定了基础。 相似文献
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分析西安市及郊县就诊的70例老年人缺铁性贫血患者的特点,结果表明:随贫血程度不同,骨髓增生程度,中晚幼细胞的病态改变及巨核细胞的吞噬现象均有非常显著差异。 相似文献
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<正> 关于宫内节育器的作用机理,只是从六十年代以来,才进行了相当大量的工作。并广泛地看到,在所有被观察的动物和人身上,宫内节育器都有高度的抗生育作用。但迄今为止,还没有阐明其确切的作用机理。78年我们对放置节育器妇女宫腔洗液和环涂片的细胞学进行了观察,发现放置节育器妇女的宫腔洗液白细胞总数比正常妇女多。涂片中只见极少巨噬细胞,未见巨噬现象。根据这些研究和国外报导,我们推测,宫内节育器的作用主要是改变子宫环境,即某些细胞(主要是中性白细胞)崩解产物、释放因子或 相似文献
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目的 了解血培养标本病原菌分布及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供实验室依据。方法 回顾性分析长安医院2012年~2014年血培养标本中主要病原菌分布、变迁及耐药情况。结果 2012~2014年送检血培养4 792例,检出病原菌512株,其中革兰氏阴性菌62.50%(320/512),以大肠埃希菌25.20%(129/512)、肺炎克雷伯菌14.26%(73/512)、铜绿假单胞菌8.20%(42/512)为主; 革兰氏阳性菌29.30%(150/512),以金黄色葡萄球菌11.52%(59/512)、凝固酶阴性葡萄球菌10.16%(52/512)为主; 真菌7.62%(39/512)。药敏结果显示:大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物敏感性较高,对其他多种抗菌药均有不同程度耐药; 革兰氏阳性球菌对青霉素、红霉素、克林霉素普遍耐药,未发现耐万古霉素、利奈唑胺的菌株。结论 血培养病原菌种类分布广,耐药形势严峻,及时准确检测病原菌分布及耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。 相似文献
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目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)在脑梗死患者发病过程中的含量变化及其意义.方法检测53例脑梗死急性期患者和40例健康对照组血清中的NO、NOS和HDL-c的含量,并进行显著性检验和相关性分析.结果与对照组比较,脑梗死患者NO和NOS含量显著高于对照组(P<0.01,P<0.05),其中皮层动脉梗死组高于腔隙性梗死组(P<0.01,P<0.05).而脑梗死组HDL-c显著低于对照组,其中皮层动脉梗死组低于腔隙性梗死组(P<0.01),NO与HDL-c呈现负相关关系(r=-0.556,P<0.01).结论脑梗死患者体内自由基反应及HDL-c合成失去平衡,观察NO、NOS及HDL-c值的变化具有重要意义. 相似文献
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原发性肝癌患者红细胞免疫和T细胞亚群的变化及相关性分析 总被引:5,自引:2,他引:3
80年代初,Siegel[1]提出红细胞免疫的概念,引起国内外有关学者的关注。红细胞不仅参与呼吸功能,而且具有清除循环免疫复合物,增强T细胞反应等多种免疫功能。此外,红细胞在肿瘤患者免疫方面亦发挥着重要的作用[2]。我们测定了59例原发性肝癌患者红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)、红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)及T细胞亚群,以探讨患者红细胞免疫功能和淋巴细胞免疫功能的变化以及两者间的相互关系。1材料和方法1.1材料59例原发性肝癌病例均为本院住院患者,其中男49例,女10例,… 相似文献
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一氧化氮、一氧化氮合成酶及血小板参数与脑梗死面积的相关性研究 总被引:4,自引:4,他引:4
目的:探讨脑梗死患发病过程中一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)及血小板(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)的意义及与梗死面积的相关性。方法:检测53例脑梗死患和40例健康对照血清中NO、NOS、PLT、PDW、MPV的含量。结果:脑梗死急性期MPV、NOS显增高(P<0.05);PDW、NO显增高(P<0.01);PLT显减低(P<0.01);NO、NOS分别与PDW、MPV之间呈显正相关,与PLT呈负相关。结论:PDW、MPV、NO、NOS的变化值随梗死面积的增加而增加,PLT则随梗死面积增加而减少。 相似文献
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目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断结肠癌细胞系LOVO中livin基因的表达,并研究livin基因沉默后对LOVO细胞增殖和克隆形成产生的影响。方法:用真核转录载体pSilencerTM4.1-CMV neo构建针对livin基因的重组RNAi真核转录载体pSilencer4.1-L1和pSilencer4.1-L2,脂质体法转染结肠癌细胞系LOVO,通过RT-PCR、免疫印迹实验检测livin的表达变化,并用克隆形成实验、MTT法检测转染后LOVO细胞在细胞增殖、克隆形成等方面的变化。结果:重组载体pSilencer4.1-L1有效地阻断了LOVO细胞中livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P<0.01)。pSilencer4.1-L1转染LOVO细胞后,与对照组相比细胞生长速度明显变慢,其细胞数在72h时与对照组相比减少约30%;克隆形成率仅为15%,与对照组相比下降了约70%。结论:成功构建了可有效沉默livin基因的RNAi干涉载体,初步证明livin基因在结肠癌细胞的分化增殖等方面所起的重要作用,为进一步阐明livin基因与结肠癌的关系以及以livin基因为靶点的结肠癌基因治疗研究奠定了基础。 相似文献
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目的:克隆BLCAP基因cDNA并构建和鉴定针对于BLCAP基因的siRNA真核表达载体.方法:从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得BLCAP基因.将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,酶切及测序鉴定.将合成的siRNA核酸片段退火形成双链后连接到经BamHI和HindⅢ双酶切后的pSilencer4.1真核表达载体,命名为pSilencer4.1-B1以及pSilencer4.1-B2,并进行酶切及测序鉴定.脂质体法转染SOSP-9607细胞系,G418筛选以及RT-PCR验证构建的真核表达载体对目的基因的干涉情况.结果:经酶切及测序鉴定,所获得的目的片段序列BLCAP基因完全相符.重组质粒中含有与理论值相符的插入片段,其测序结果与设计序列一致.经脂质体法转染后pSilencer4.1-B2可明显抑制SOAP-9607细胞的BLCAP表达.结论:成功克隆了BLCAP基因并cDNA构建和验证了其siRNA真核表达载体. 相似文献