3D_5卵巢癌抗独特型单链抗体基因克隆及表达

目的：降低３Ｄ＿５抗独特型抗体鼠源性，促进临床应用。方法：用ＰＣＲ及基因重组技术，扩增并构建单链可变区抗体基因，与表达载体连接后转化大肠杆菌。结果：ＥＬＩＳＡ检测３７个克隆，其中１７个表达产物与相应抗体呈特异免疫反应；重组体限制性内切酶酶切分析及ＰＣＲ扩增均见特异ＤＮＡ条带。结论：克隆表达了３Ｄ＿５抗独特型单链抗体基因，为进一步人源化改造奠定了基础。     

卵巢癌基因工程抗独特型疫苗6B11和3D5的基础研究

抗独特型抗体(Ab_2βb)能够模拟肿瘤抗原,调节机体免疫功能,又被称为“抗独特型疫苗”,6B11为本中心制备的鼠单克隆抗独特型抗体,可模拟卵巢癌单抗OC166-9;3D5杂交瘤是用抗卵巢癌单抗OC125免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合而成,分泌的抗体能模拟卵巢癌相关抗原CA125.两种抗独特型抗体均可在体内外诱导产生特异性抗卵巢癌体液和细胞免疫反应.有可能作为“卵巢癌疫苗”用于卵巢癌的治疗.本研究利用分子克隆技术,对6B11和3D5在基因水平进行改造,构建6B11和3D5卵巢癌基因工程疫苗.     

6B11卵巢癌抗独特型单链抗体表达及序列分析

目的：克隆和表达６Ｂ１１卵巢癌抗独特型抗体单链可变区基因，并进行序列分析。方法：采用逆转录ＰＣＲ和基因重组技术，扩增并构建６Ｂ１１鼠抗独特型抗体单链可变区基因，重组至噬菌体表面表达载体，在大肠杆菌表达，并利用双脱氧末端终止法进行核苷酸序列分析。结果：阳性克隆表达产物与卵巢癌单克隆抗体ＣＯＣ１６６－９特异结合；ＤＮＡ序列分析表明重链和轻链可变区分属小鼠免疫球蛋白重链第Ｉ亚群和轻链第Ⅱ亚群。结论：自６Ｂ１１小鼠杂交瘤细胞成功地克隆表达了该抗独特型单链抗体基因，为进一步人源化改造，推进卵巢癌的免疫治疗奠定了良好基础。     

抗人胰腺癌单克隆小分子抗体基因的构建

鼠单克隆抗体用于人体的诊断和治疗时,人体会产生抗鼠蛋白抗体和对鼠单抗的排斥反应,因而影响使用效果。近年来随着生物工程技术的发展,人们试图通过人-鼠嵌合抗体及小分子抗体的研究以解决单克隆抗体在治疗中存在的免疫反应问题。抗体的最