乙醛脱氢酶1酶活性对多西他赛诱导的多倍体肿瘤巨细胞血管生成和迁移影响

目的探究乙醛脱氢酶1(ALDH1)酶活性变化对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)血管生成和迁移的影响。方法常规培养的非小细胞肺癌细胞(A549、H1299细胞)为常规组, 10 mmol/L的4-(N, N二乙基)氨基苯甲醛(DEAB)处理细胞12 h, 撤除药物后在完全培养基中继续培养细胞至第3天为DEAB组;1 mmol/L多西他赛处理细胞24 h, 撤除药物后在完全培养基中培养至第3天为多西他赛组;10 mmol/L的DEAB预处理细胞12 h后, 1 mmol/L多西他赛处理24 h, 撤除药物后在完全培养基中培养至第3天为多西他赛+DEAB组。流式细胞术检测细胞DNA含量;乙醛脱氢酶(ALDH)测定试剂盒测定ALDH1活性;细胞划痕实验检测迁移能力;血管生成拟态(VM)实验和小管形成实验检测血管生成能力;蛋白印迹法(WB)检测细胞中N-cadherin、Vimentin、血管内皮生长因子(VEGF)A抗体和VE-cadherin蛋白表达水平。结果多西他赛组A549细胞、H1299细胞PGCC亚群比例高于常规组;多西他赛组A549细胞、H1299细胞ALDH1酶活性高于常规组;多...     

放射治疗诱导的多倍体肿瘤细胞在三阴性乳腺癌复发中作用的研究

目的:分析放射治疗诱导的多倍体肿瘤细胞在三阴性乳腺癌(TNBC)复发中的潜在作用。方法:将培养的人TNBC细胞系MDA-MB-231分为3组。在6MV-X射线模式下对其中两组的MDA-MB-231细胞分别给予7 Gy、14 Gy的放射剂量,继续孵育3 d后,收集的细胞分别为7 Gy组和14 Gy组,未经放射处理的细胞作...     

间充质干细胞条件培养基增强肺癌多倍体肿瘤巨细胞化学治疗药物敏感性的研究

目的:探讨间充质干细胞条件培养基(MSCs-CM)对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)化学治疗药物敏感性的影响。方法:使用1 μmol/L多西他赛处理A549细胞24 h(多西他赛A组),撤除药物后继续在完全培养基中培养至第3天(多西他赛B组),建立肺癌PGCC模型,使用MSCs-CM培养PGCC 48 h(PGCC+M...     

蛋白激酶A抑制剂H-89通过调节核糖体蛋白S6激酶1的磷酸化阻断SP600125诱导的CMK细胞多倍体化北大核心CSCD

目的研究核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)翻译后修饰在巨核细胞倍体化调控方面的作用。方法 c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89单独或联合处理CMK原始巨核细胞白血病细胞。碘化丙啶(PI)染色,结合流式细胞术检测DNA的相对量,从而进行DNA倍体分析;Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)下游靶分子S6K1表达和磷酸化修饰(Thr389和Thr421/Ser424)的变化。使用分子对接和激酶活性检测分析H-89与S6K1结合的关系以及对激酶活性的影响。结果 SP600125以时间和剂量依赖的方式诱导CMK细胞多倍体化,同时,上调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和下调Thr389的磷酸化。H-89不但部分阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化,而且下调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化。分子对接和激酶活性分析发现H-89通过占据ATP结合位点,抑制S6K1活性。值得注意的是,H-89和SP600125均抑制PKA的活性,而且两者联合进一步抑制了PKA的活性,表明H-89阻断SP600125诱导CMK多倍体化与其对PKA的作用无关,而与S6K1磷酸化修饰状态的改变有关。结论 H-89通过调节S6K1磷酸化阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化。     

人脐带间充质干细胞及其条件培养液对非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的:探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）及其条件培养液对人非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:取对数生长期的A549细胞,采用1 μmol/L多西他赛诱导24 h后,更换为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液继续培养3 d,建立多倍体A549细胞模型。分离与培养hUC-MSC,制备hU...     

间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇诱导多倍体肺癌细胞衰老表型的研究

目的:探讨间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇(Doc)诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型的影响。方法:人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞分为3组,常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组。常规组为二甲基亚砜处理细胞24 h;Doc(24 h)组为100 nmol/L的Doc处理细胞24 h;Doc(24 h...     

自噬和衰老在放射诱导的多倍体宫颈癌细胞中的作用

目的：探讨自噬和衰老在放射诱导的多倍体宫颈癌细胞中的作用。方法：用 ７Ｇｙ剂量的 Ｘ射线处理 Ｈｅｌａ 细胞,在第 ３天、５天、７天、１１天和 １９天观察细胞形态,流式细胞术观察倍性变化,β 半乳糖苷酶试剂盒检测细胞衰 老情况,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测自噬和衰老相关蛋白表达。通过 ＧＥＰＩＡ工具对 ＰＬＫ１在宫颈癌组织的表达差异进行分析。 结果：７Ｇｙ处理后 Ｈｅｌａ细胞出现多倍体化并体积增大,细胞发生衰老和自噬。Ｄａｙ３组、Ｄａｙ５组、Ｄａｙ７组和 Ｄａｙ１１ 组多倍体细胞（＞４Ｎ）比例高于对照组细胞,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。Ｄａｙ３组、Ｄａｙ５组和 Ｄａｙ７组细胞发生 衰老。Ｄａｙ３组、Ｄａｙ５组和 Ｄａｙ７组的 ＤＮＡ损伤修复蛋白 ＰＡＲＰ、ＤＮＡ合成相关蛋白 Ｅ２Ｆ １、Ｅ２Ｆ ２表达下调;ＤＮＡ损 伤应答相关蛋白 ＰＬＫ１表达上调;自噬相关蛋白 ＬＣ３ ＩＩ／ＬＣ３ Ｉ比值升高;自噬特异性底物蛋白 Ｐ６２表达下调。Ｄａｙ１９ 组 Ｐ６２表达下调。与正常组织相比,ＰＬＫ１在宫颈癌组织中表达增高。结论：衰老和自噬现象可能有助于放射诱导 的宫颈癌细胞形成并维持多倍体,并帮助损伤的多倍体细胞进行自我修复。     

肿瘤来源的外泌体在肿瘤进展、耐药性及临床诊断中的研究现状

外泌体是一种球形纳米级细胞外囊泡,内含多种生物活性物质,在生理和病理条件下,外泌体都可以被一些细胞以胞吐的方式释放,如免疫细胞、干细胞、肿瘤细胞等。因其起源于相应的母细胞,故由肿瘤细胞分泌的外泌体被称为肿瘤来源的外泌体(TEX)。近年来,TEX在肿瘤的发生、发展、相关免疫反应、化学治疗抗药性及转移中均发挥着重要作用。本...     

肿瘤细胞多倍体化和衰老与肿瘤耐药关系的研究进展

肿瘤细胞、机体正常细胞及肿瘤微环境构成了肿瘤生态系统,其依赖于一种罕见的细胞群,该细胞群能够在肿瘤微环境的恶劣条件下生存(如缺氧、低营养、低pH等),转移并通过存活介导耐药性,然后通过耐药肿瘤细胞重新繁殖肿瘤。如果能够识别并消除关键的肿瘤细胞,肿瘤生态系统将会崩溃。越来越多的证据显示,肿瘤微环境中的多倍体肿瘤巨细胞(p...