Matrigel三维培养模型对乳腺癌细胞整合素β１的定位及胞外基质粘附的影响

目的：观察Matrigel三维（3D）培养模型对乳腺癌细胞形貌、细胞整合素β1的定位及其介导的细胞与胞外基质（ECM）层粘连蛋白,纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白粘附能力的影响。初步探索在二维（2D）和3D不同培养模式下乳腺癌细胞与ECM的相互作用,揭示肿瘤微环境对肿瘤细胞的影响。方法：分别在2D及3D培养模型下进行乳腺癌细胞MDA-MB-435S及MDA-MB-231的体外培养,钙黄绿素Calcein AM检测细胞存活力,免疫荧光分析整合素β1的定位,粘附率实验检测细胞对ECM各成分的粘附变化。结果：整合素β1在2D及3D培养模型中的定位具有显著差异,其介导的细胞与层粘连蛋白的黏附能力在3D模型中显著下降,而细胞与纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的粘附能力明显上升。结论：与2D培养结果不同,3D培养模型更能模拟体内3D微环境,可做为新的研究模式揭示肿瘤细胞与ECM的相互作用,以及肿瘤微环境在肿瘤进展中的作用。     

Ⅰ型鼠尾胶原三维培养模型对乳腺癌细胞耐药性的影响研究

【摘要】目的 探讨基质材料Ⅰ型鼠尾胶原三维（3D）培养对乳腺癌细胞MCF 7耐药性的影响。方法 根据细胞培养方法的差异将细胞分为2D组及3DⅠ型鼠尾胶原培养组。CCK8实验检测MCF 7在2D和3D组中对顺铂和紫杉醇的药物敏感性;采用流式细胞术检测MCF 7在各组中的干性表面标记CD44+/CD24-细胞亚群比例及细胞周期分析;荧光定量PCR（qPCR）检测各组MCF 7的肿瘤细胞干性标记SOX2和KLF4的表达,以及耐药性相关ABC转运蛋白ABCC1和ABCB1的表达。结果 与2D组相比较,MCF 7在3DⅠ型鼠尾胶原培养模型中的耐药性显著增强;同时,流式细胞结果显示3D组CD44+/CD24 亚群细胞比例高于2D组,且细胞周期出现G1期阻滞。qPCR结果显示较2D组细胞,3D胶原组细胞的干性相关指标SOX2和KLF4,耐药相关ABC转运蛋白ABCC1和ABCB1 mRNA的表达显著提高。结论Ⅰ型鼠尾胶原3D培养后乳腺癌细胞MCF 7干性增加,细胞周期G1期阻滞,耐药性增强。Ⅰ型鼠尾胶原可望作为新的3D药物筛选模型并用于抗耐药性肿瘤细胞意义重大。