SEN病毒D亚型ORF1-C端基因的克隆、表达和鉴定

目的:获得SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,并进行表达,为进一步研究及诊断、治疗应用奠定基础.方法:用PCR法从SENV阳性血清中获得SENV-DORF1C端基因,测序验证后,构建了pQE30-SENV-D重组表达质粒,并经过转化E.coli M15,IPTG诱导表达,Western blot分析表达结果.结果:获得了正确序列的SENV-D亚型ORF1-C端蛋白基因序列,表达出Mr约为38×103的蛋白.表达蛋白能与患者血清中相应的抗体结合,发生抗原抗体反应.结论:成功获得并表达了SENV-D-ORF1-C端蛋白,并经Western blot印迹法证实能与阳性血清中的抗体发生抗原抗体反应,有可能用于检测SENV-D抗体.为今后进一步研究有助于疫情监测及早期发现感染者的抗体奠定了坚实的基础.     

陕西、青海、新疆三省(区)部分人群庚型肝炎病毒血清学调查

目的：调查陕西、青海、新疆三省（区）部分人群庚型肝炎病毒（HGV／GBV）血清学特征。方法：采用ELISA方法，共调查三省（区）1469份血清中GBV－IgG抗体。结果：少数民族血清GBV－IgG抗体的阳性率（藏族4．11％，蒙古族5．36％，维吾尔族4．55％，回族4．00％）略高于汉族（1．36％－1．73％），但差异无显著性（P＞0．05）；吸毒人群GBV－IgG阳性率（11．30％，34／301）明显高于正常人群（2．44％，18／736），（P＜0．01）；献血员GBV－IgG阳性率为1．02％－7．68％。结论：三省区民族间GBV－IgG抗体阳性差异无显著性，血源性传播是其重要途径，应加强对献血员及吸毒人员的监管。     

饰胶蛋白（Decorin）基因的cDNA克隆与表达

目的 通过基因克隆技术获得饰胶蛋白基因ｃＤＮＡ克隆并表达。为研究饰胶蛋白的生物学功能及应用打基础。方法 应用ＰＣＲ技术从Ｔ细胞ｃＤＮＡ文库获得饰胶蛋白全长基因ｃＤＮＡ片段。并克隆到ｐＵＣ１９载体中,采用Ｓａｎｇｅｒ双脱氧末端终止法测定全部ｃＤＮＡ序列,将测序正确的饰胶蛋白ｃＤＮＡ序列插入ｐＧＥＸ－４Ｔ－１表达载体中,经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切后１．２％凝胶电泳鉴定,ＩＰＴＧ诱导表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果 克隆的饰胶蛋白ｃＤＮＡ序列与ＧｅｎＢａｎｋ中ＡＦ１３８３００记载的序列完全一致,所表达的融合蛋白质分子量与理论计算值（６５．６ＫＤ）也一致并为可溶性蛋白。结论 本研究成功地克隆了饰胶蛋白基因和表达了ＧＳＴ－Ｄｅｃｏｒｉｎ融合蛋白。     

HPLC-MSn法筛选丹参中丹酚酸类成分的SPE预处理工艺

目的:研究丹参药材中丹酚酸类成分的固相萃取预富集方法.方法:使用C-18固相萃取柱和液相色谱-离子阱多级质谱联机检测技术,通过固相萃取小柱预处理样品,电喷雾多级质谱负离子模式全扫描检测,考察影响回收率的4个主要因素,即泵真空度、固相萃取小柱上样量、洗脱剂用量及洗脱速率,利用正交实验进行萃取条件的优化.结果:最佳萃取条件为:真空度0.02×106Pa,上样量0.75mL,洗脱剂用量15mL,洗脱速率1.0mL·s-1.结论:本方法操作简单,准确可靠,可作为丹参中丹酚酸类成分的前处理方法.     

还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害的双盲随机对照研究

目的：观察还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害（mildcognitiveimpairment，MCI）的疗效并探讨其作用机制。方法：对各组试验药进行盲法要求包装，采用随机、双盲、阳性平行对照法共观察90例老年MCI患者，并选45例老年健康者进行治疗前对照分析相关指标。治疗组45例（剔除1例）用药为还脑益聪胶囊（每次3粒，3次／d），同时加服三乐喜模拟药（每次2粒，3次／d）；对照组45例（剔除2例）用药为三乐喜胶囊（每次2粒，3次／d），同时加服还脑益聪胶囊模拟药（每次3粒，3次／d），温开水送服。两组疗程均为16周。于治疗前后进行临床记忆、中医症状、脑血流、自由基、炎性介质及脂代谢变化等情况的分析。结果：老年MCI患者临床记忆量表各项指标积分与老年健康对照组比较明显降低（P〈0．01），血清乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AchE）、白细胞介素-1a（interleukin-1a，IL-1a）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量较健康对照组明显增高（P〈0．01，P〈0．05），而超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）的活性明显降低（P〈0．05）。除指向记忆-项外，还脑益聪胶囊治疗组老年MCI患者治疗后的临床记忆量表积分值均较对照组明显提高（P〈0．01），中医临床症状明显改善，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者大脑前、后动脉的平均血量参数均有明显提高作用（P〈0．01，P〈0．05），并且显著改善脑动脉的阻力指数（P〈0．01）；还脑益聪胶囊还能显著升高老年MCI患者血清SOD活性，同时降低Ache、IL-1α及IL-6的血清含量（P〈0．01，P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者血脂的改善作用与三乐喜比较差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。结论：还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害有较好疗效，效果优于阳性对照药?     

光、赤霉素和乙烯利对贯叶连翘种子萌发的影响

目的 研究光，赤霉素和乙烯利对贯叶连翘Hypericum perforatum种子萌发的影响，为贯叶连翘的人工栽培提供理论依据。方法 直接发芽法，结果 贯叶连翘种子光下萌发率达79%，而暗中不萌发，赤霉素和乙烯利不仅能促进种子光下萌发，而且能诱导种子暗萌发，但乙烯利处理对幼苗胚根生长有明显的抑制作用。结论 贯叶连翘种子为需光种子，其需光性与赤霉素和乙烯利有关。     

血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症临床病理观察

目的：探讨血管淋巴样增生伴嗜酸性粒细胞增多症(angiolymphoid hyperplasia with eosinopilia, ALHE)的临床病理学特征、免疫组织化学染色(immunohistochemical stain,IHC)及鉴别诊断。方法：对3例ALHE进行临床病理分析及免疫组化研究,并进行文献复习。结果：2例ALHE为女性患者,1例为男性患者,病变位于头面部真皮内,组织形态以小到中等大小血管增生为主,血管内衬胞浆丰富的上皮样内皮细胞,血管周围见大量炎细胞浸润。免疫组化染色显示CD34、CD31、CD3阳性,CD20及CK阴性。结论：ALHE是一种少见的、良性的血管瘤,诊断主要依靠特征性组织学特点。     

硫酸镁的新用途

硫酸镁又称泻盐,有近三百年制取历史,是一种古老的盐类泻药。临床上内服用作导泻、利胆和十二指肠引流,外敷用作消炎、镇痛,注射用作镇静、止痉。尽管目前硝普钠、阿方那特取代了硫酸镁在高血压危象中的治疗作用,但硫酸镁仍是治疗妊娠高血压综合症的首选药物。近年来由于镁在生化学中得到较多的研究,其盐类硫酸镁又有了许多新用途。本文将硫酸镁新用途作一介绍,有助于临床参考。一、治疗心律失常:     

异基因造血干细胞移植术后环孢素A血药浓度的监测分析

目的 对2012年4月至2013年5月在河南省人民医院血液内科所进行的异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者全血中环孢素A（CsA）浓度的监测结果 进行收集和分析,来探讨其在临床应用中的有效性及安全性,为在临床和药学工作的同仁更好地开展CsA浓度监测及相关科研工作提供一定的参考。方法 采用荧光偏振免疫法对9例异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者进行常规CsA血药浓度监测,并结合临床进行归纳、分析、统计。结果 监测异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）患者CsA血药浓度共159例次：达到有效血药浓度范围内的（100—400μg／L）为107例,占总监测人数的67．3％;低于100μg／L有33例次,占到20．8％;而高于400μg／L的有19例次,占11．9％。9例Allo—HSCT患者CsA平均血药浓度为（210．89±149．87）μg／L,每位患者的血药浓度波动较大,且个体差异也较大。结论 临床上对CsA剂量、剂型的调整皆以其血药浓度为依据,并发现排斥反应与移植物抗宿主病（GVHD）以及CsA毒副作用的发生均与全血CsA浓度改变密切相关。     

还脑益聪方对早期认知功能障碍大鼠血浆P-选择素、血浆纤溶酶原激活物抑制剂和血液流变学指标的影响

目的观察中药复方还脑益聪方对复合因素所致早期认知功能障碍大鼠行为学及血浆P-选择素、血浆纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）和血液流变学指标的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖及喂饲半高脂饲料（6周）的方法造成大鼠认知功能障碍,Morris水迷宫行为学测试确定模型成功的动物,随机分成四组（每组12只）：模型对照组给予等量水,盐酸多奈哌齐（hydrochloricdonepezil）组（0．4mg／kg,体质量,下同）,还脑益聪方低剂量组（7g生药／kg）,还脑益聪方高剂量组（14g生药／kg）,同时灌胃给药,并设立正常对照组,给予等量水。4周后,对大鼠行为学检测,应用酶联免疫法（ELISA法）检测大鼠血浆P-选择素及PAI-1含量和血液流变学各项指标。结果与正常对照组大鼠比较,造模后大鼠水迷宫测试,潜伏期显著延长（P〈0．05）,寻台路程明显延长和穿台次数显著减少（P〈0．01）,存在空间学习记忆能力减退。同时,血清P-选择素含量和PAI-1含量显著升高（P〈0．05,P〈0．01）,血液黏度及血小板聚集性增加（P〈0．05,P〈0．01）等流变学指标改变。与模型组比较,还脑益聪方高剂量组可增加大鼠穿台次数和减少寻台路程（P〈0．01）,降低P·选择素及PAI-1的含量（P〈0．05）,降低低剪切率下的血液黏度（P〈0．05,P〈0．01）,降低红细胞聚集指数（P〈0．01）和血浆纤维蛋白原（FDP）含量（P〈0．05）。结论还脑益聪方对D-半乳糖及半高脂饲料造成的大鼠认知功能障碍有明显的改善作用,显著提高动物的空间学习记忆能力,并能抑制大鼠P-选择素和PAI-1水平,改善血液的流变性。