白念珠菌生物被膜耐药株麦角甾醇检测的方法学研究

目的：分别采用高效液相色谱法和气相色谱质谱联用法测定白念珠菌麦角甾醇含量,并对这两种方法进行比较。方法：采用浓度梯度递增法诱导白念珠菌耐药株,采用KONT真菌显色MIC药敏系统鉴定耐药性。构建6、12、24h生物被膜,采用高效液相色谱法和气相色谱质谱联用法测定麦角甾醇含量。结果：高效液相色谱法检测出麦角甾醇含量,最低检出浓度为0.05mg/L,而气相色谱质谱联用法未检测出麦角甾醇含量。结论：高效液相色谱法能准确测定白念珠菌麦角甾醇含量。与气相色谱质谱联用法比较,高效液相色谱法简单、高效和可靠。     

BGL2和XOG1与白念珠菌生物被膜耐药性的研究

目的:研究白念珠菌生物被膜耐药性与BGL2和XOG1基因表达之间的关联。方法:利用浓度梯度递增法诱导构建白念珠菌氟康唑耐药株,采用KONT真菌显色MIC药敏系统鉴定耐药株模型。构建耐药株和对照株生物被膜,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测白念珠菌耐药株和对照株生物被膜细胞中葡聚糖相关基因BGL2和XOG1,并比较耐药株和对照株中BGL2和XOG1表达的差异。结果:KONT真菌显色MIC药敏系统证实耐药株最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)≥128μg/ml。与对照株相比,耐药株XOG1的表达明显降低(P<0.05),BGL2的表达则没有明显差异。结论:葡聚糖相关基因XOG1与白念珠菌生物被膜耐药性相关。     

Farnesol对变形链球菌脱矿作用的体外研究

目的 研究Farnesol（法尼醇）对变形链球菌脱矿作用的影响。方法 BHI培养变形链球菌,将常规预备好的牙釉质切片放置于菌悬液中。实验组分别加入Farnesol浓度为0、50、100、200 μmol/L,对照组中加入无菌去离子水。采用原子吸收分光光度法检测不同时间点（24、48及72 h）菌悬液中钙离子的浓度。结果 随着Farnesol浓度的递增,菌悬液中钙离子浓度逐渐降低,当Farnesol浓度为200 μmol/L时菌悬液中钙离子的浓度与其余3组相比有显著性差异,实验组与对照组相比也有显著性差异（P<0.05）。结论 Farnesol可抑制变形链球菌对牙釉质的脱矿作用。     

lncRNAXIST/miR-34a-5p/SIRT6 分子轴调控口腔鳞癌细胞的增殖及转移

[摘要] 目的：探究lncRNA XIST/miR-34a-5p/SIRT6 分子轴调控口腔鳞癌细胞增殖和转移及其分子机制。方法：收集2013年3 月至2018 年3 月在青岛市口腔医院就诊的OSCC患者47 例癌组织和癌旁组织标本,采用qPCR检测OSCC患者组织及细胞系中lncRNA XIST、miR-34a-5p、SIRT6 mRNA 的表达,WB检测OSCC 患者组织及细胞系中SIRT6、Ki67、pcDNA、cleaved-caspase3、cleaved-caspase8、E-cadherin、Vimentin 蛋白的表达,采用CCK-8 实验检测敲降lncRNA XIST对Cal-27 及Tca-8113 细胞增殖的影响,Transwell 小室法检测Cal-27 及Tca-8113 细胞迁移及侵袭;流式细胞术检测Cal-27 及Tca-8113 细胞凋亡情况,双荧光素酶报告基因检测lncRNA XIST与miR-34a-5p、miR-34a-5p 与SIRT6 靶向结合关系。结果：lncRNA XIST和SIRT6 在OSCC患者癌组织及细胞系中高表达（均P<0.05）,miR-34a-5p 则呈低表达（P<0.01）;敲降lncRNA XIST抑制OSCC细胞的增殖、迁移及侵袭并促进细胞凋亡（均P<0.01）,同时转染miR-34a-5p 抑制剂或pcDNA-SIRT6 载体作用则相反;敲降lncRNA XIST 促进OSCC细胞中增殖及转移相关蛋白表达（均P<0.01）,同时转染miR-34a-5p 抑制剂或pcDNA-SIRT6 载体作用则相反;lncRNA XIST 与miR-34a 靶向结合,miR-34a 与SIRT6 靶向结合;lncRNA XIST 通过靶向miR-34a-5p 上调SIRT6 表达（P<0.01）。结论：lncRNA XIST/miR-34a-5p/SIRT6 分子轴能够调控OSCC细胞增殖及转移,为OSCC治疗提供潜在靶点。     

不同培养基对白念珠菌生物被膜产生法尼醇的影响

目的:检测不同培养基对白念珠菌生物被膜产生法尼醇的影响。方法:白念珠菌标准株SC5314分别接种到含有RP-MI1640、YPD、RPMI1640+10%胎牛血清(fetal calf serum,FCS)培养基的培养皿中,形成白念珠菌生物被膜。在接种1.5～48h内,使用气相色谱-质谱联用法检测法尼醇产生的情况。结果:在RPMI1640、YPD培养基中,法尼醇分泌量随生物被膜的成熟而逐渐增加,在生物被膜形成后期至成熟期达到高峰;在RPMI1640+10%FCS培养基中,法尼醇的产生在48h内呈增长趋势。12h时,YPD培养基中法尼醇的分泌量高于其它两组(P<0.05);48h时,RPMI1640+10%FCS培养基中法尼醇分泌量最高(P<0.05)。结论:白念珠菌生物被膜法尼醇分泌量与培养基种类存在相关性。     

储存条件对离体牛牙釉质粘接剪切强度的影响

目的：比较不同储存条件下牛牙的釉质粘接剪切强度，探讨适合储存离体牛牙的条件。方法 ：选择新鲜拔除的牛下前牙130颗，随机分为13组，每组10颗；其中，1组为对照组，12组为实验组。参照组在牛牙获取当天开始进行实验。实验组储存条件如下：4%甲醛溶液（4℃、30天，23℃、30天，4℃、90天，23℃、90天）、1%氯胺-T溶液（4℃、30天，23℃、30天，4℃、90天，23℃、90天）、蒸馏水（4℃、30天，23℃、30天，4℃、90天，23℃、90天）。储存完成后，将树脂粘接于牛牙釉质表面，测定其粘接剪切强度。采用SPSS 20.0软件包对测试结果进行统计学分析。结果：在23℃储存条件下，4%甲醛溶液和1%氯胺-T溶液储存30天和90天，粘接强度与新鲜牙釉质无显著差异。在4℃储存条件下，蒸馏水溶液储存30天和90天，粘接强度与新鲜牙釉质无显著差异。在4℃储存条件下，4%甲醛溶液和1%氯胺-T溶液储存30天，釉质粘接强度高于新鲜牛牙；90天时，与新鲜牛牙釉质粘接强度无显著差异。在23℃储存条件下，蒸馏水储存30天时粘接强度与新鲜牛牙釉质无显著差异；但到90天时，釉质粘接强度低于新鲜牛牙...