荧光检测技术在蛋白酪氨酸激酶抑制剂高通量筛选中的应用

介绍荧光共振能量转移技术、荧光偏振免疫分析技术、荧光素酶-激酶检测技术和毛细管电泳-激光诱导荧光技术在酪氨酸激酶抑制剂高通量筛选模型中的应用情况。蛋白酪氨酸激酶与多种疾病的发生和发展密切相关,通过高通量筛选寻找其抑制剂已成为新药研发的热点之一。荧光检测技术因具有灵敏、易于检测、适于微量化和安全性高等优势,在药物的高通量筛选中被广泛使用。     

瑞舒伐他汀联合氯吡格雷对不稳定型心绞痛患者血管内皮功能及尿酸、血脂水平的影响

目的 探讨瑞舒伐他汀联合氯吡格雷对不稳定型心绞痛患者血管内皮功能及尿酸、血脂水平的影响。方法 96例住院治疗的不稳定型心绞痛患者随机分为观察组（n=48）和对照组（n=48）,对照组患者给予常规治疗和晨服硫酸氢氯吡格雷75 mg,联合组在对照组基础上睡前口服瑞舒伐他汀钙10 mg,均治疗4周。治疗后评估疗效,记录治疗前后心绞痛发作频率和持续时间,不良反应发生情况,检测两组患者治疗前后血清血管内皮生长因子（VEGF）、内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）、尿酸（UA）和血脂水平。结果 观察组患者治疗后总有效率95.8%,高于对照组的83.3%,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者治疗后心绞痛发作频率和持续时间均较治疗前减少,且观察组优于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。与治疗前相比,对照组患者治疗后血清VEGF和NO水平升高,而UA水平降低,观察组的VEGF和NO水平均升高,而ET-1、UA、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗后观察组血清VEGF和NO水平均升高,而ET-1、UA、TC、TG和LDL-C水平均降低,与对照组相比差异均有统计学意义（P<0.05）。两组患者均未出现横纹肌溶解,转氨酶升高及消化道反应发生率均无统计学意义。结论 瑞舒伐他汀联合氯吡格雷可有效提高不稳定型心绞痛患者临床疗效,改善血管内皮功能、抑制炎性反应、降低血脂水平,且不增加不良反应的发生。     

还原响应荧光探针的研制

基于荧光共振能量转移(FRET)原理和胞质中的还原环境,对载体在细胞胞质中的稳定性进行了表征。首次合成了同时具有FRET效应和还原响应性的新型荧光探针偶联物:3-羧酸-7-羟基-香豆素-硫-硫-异硫氰酸荧光素(CHC-SS-FITC)。以脂质体为模型载体,制备了荷载荧光探针偶联物的脂质体,并评价了探针偶联物的荧光共振能量转移效应和还原响应性。以巨噬细胞为模型细胞,通过激光共聚焦显微技术考察了载药纳米脂质体在巨噬细胞中稳定性。结果表明,本研究设计的新型荧光探针偶联物CHC-SS-FITC,由于同时具备FRET效应的高灵敏度和还原环境触发式响应的强抗干扰能力,克服了传统表征手段的不足,为纳米载体在细胞胞质中的稳定性表征开辟了新的道路。     

基于肝微粒体和指纹图谱研究六味地黄丸与硝苯地平的药物相互作用

本研究建立了基于体外肝微粒体和中药代谢指纹图谱研究六味地黄丸与硝苯地平的药物相互作用的方法。体外肝微粒体温孵采用加入六味地黄丸和硝苯地平置37 ℃水浴中温孵60 min。指纹图谱测定采用C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长240 nm;测定温孵前后微粒体中六味地黄丸的代谢指纹图谱,通过相似度比较评价两者的相互作用。结果显示六味地黄丸与硝苯地平共孵前后,代谢指纹图谱无明显差异。在体动物试验显示,六味地黄丸与硝苯地平联合给药前后,典型成分的主要药代动力学参数无显著差异。     

中西医结合治疗重症肺炎临床研究

目的:观察清金化痰汤联合常规抗生素序贯疗法治疗重症肺炎的临床疗效。方法:86例重症肺炎患者随机分为对照组和观察组,每组43例。对照组患者采用常规抗生素序贯疗法治疗,观察组在对照组治疗基础上加服清金化痰汤加减,方药组成:黄芩20 g,栀子10 g,桔梗12 g,生石膏30 g,川贝母10 g,鱼腥草30 g,橘红9 g,茯苓30 g,桑白皮15 g,知母15 g,栝楼仁20 g,甘草6 g。比较两组患者临床疗效,肺功能和生活质量评分。结果:两组患者的体温恢复时间(t=6.323,P0.01)、呼吸恢复正常时间(t=9.552,P0.01)、咳嗽消失时间(t=9.578,P0.01)、肺啰音消失时间(t=3.661,P0.01)、机械通气时间(t=12.845,P0.01)、住院时间(t=5.827,P0.01)均存在统计学差异;治疗后,对照组和观察组的白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)(t=2.555,P=0.0120.01)、IL-6(t=14.985,P0.01)、C反应蛋白(t=3.110,P=0.0030.01)、第1秒用力呼气量(t=-4.747,P0.01)、用力肺活量(t=-4.104,P0.01)、第1秒用力呼气量(t=-5.461,P0.01)、临床肺感染评价(t=-10.299,P0.01)均存在统计学差异;两组体征分数均有改善,但观察组显著优于对照组;治疗后,对照组和观察组的Barthel指数评估量表评分(t=-8.987,P0.01)和Rankin神经功能康复情况评估量表评分(t=-8.500,P0.01)均存在统计学差异,两组的生活质量评分均提高,但观察组评分显著高于对照组。结论:清金化痰汤联合常规抗生素序贯疗法治疗重症肺炎临床疗效显著,能明显改善临床症状,提高患者的生活质量。