lncRNA HOTAIR通过miR-519d-3p/CCND1 分子轴促进乳腺癌SKBR3细胞的恶性生物学行为

目的：探究lncRNA HOTAIR/miR-519d-3p/CCND1 分子轴对乳腺癌细胞增殖和转移的影响及其可能机制。方法：收集2017 年3 月至2019 年2 月南昌市第三医院乳腺外科手术切除的乳腺癌患者的乳腺癌组织及配对癌旁组织各50 例,qPCR检测癌及癌旁组织中HOTAIR 的表达水平,乳腺正常上皮细胞及乳腺癌细胞系中HOTAIR 和miR-519d-3p 的表达水平。将乳腺癌SKBR3 细胞分为NC 组、si-HOTAIR 组、miR-519d-3p mimics 组,miR-519d-3p mimics+pcHOTAIR 组、miR-519d-3p mimics+pcCCND1 组和si-HOTAIR+pcCCND1 组,CCK-8 法检测各组SKBR3 细胞增殖能力、Transwell 检测细胞侵袭和迁移能力、Western blotting 检测SKBR3 细胞中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin 以及CCND1 表达水平。双荧光素酶报告基因检测HOTAIR 和miR-519d-3p 以及miR-519d-3p 和CCND1 的靶向关系。结果：HOTAIR在癌组织以及乳腺癌细胞系中呈高表达,且在SKBR3 细胞系中表达最高。敲降HOTAIR可显著抑制SKBR3 细胞增殖、侵袭和迁移,并显著增加E-cadherin 的表达水平、降低N-cadherin 和Vimentin的表达水平（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因检测显示,HOTAIR 靶向下调miR-519d-3p 的表达,miR-519d-3p 靶向下调CCND1 的表达。敲降HOTAIR可增强miR-519d-3p 对CCND1 的下调作用,抑制SKBR3 细胞EMT、增殖、侵袭和迁移能力（均P<0.05）。结论：敲降HOTAIR可抑制SKBR3 细胞增殖和转移,其机制是通过调控miR-519d-3p/CCND1 分子轴实现的。     

生酮饮食对小鼠EMT-6乳腺癌生长影响的实验研究

目的 研究生酮饮食(ketogenic diet,KD)对小鼠EMT-6乳腺癌生长的影响及其机制.方法 取40只BALB/c雌性小鼠,建立小鼠EMT-6乳腺癌模型后,随机平均分配到4个饮食组,每组10只,分别给予标准饮食(standard diet,SD),20％糖生酮饮食(20％糖KD),10％糖生酮饮食(10％糖KD)及无糖生酮饮食(NCKD)饲养.观察小鼠肿瘤生长情况、生存时间及血糖和血酮的变化.采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测血胰岛素和血胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)的变化.当小鼠肿瘤体积超过1 000 mm3时即为观察终点,处死小鼠.从接种到观察终点之间的天数记为小鼠生存时间.结果 接种后第16天,各KD组肿瘤体积显著小于SD组,SD组肿瘤平均体积为(319.59±36.03) mm3,20％糖KD组为(205.11±42.68) mm3,10％糖KD组为(217.03±35.80) mm3,NCKD组为(248.36±44.01) mm3,差异有统计学意义,F=176.123,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P值均＜0.001.接种后第7天各KD组血糖水平较SD组降低,SD组为(6.16±0.33) mmol/L,20％糖KD组为(2.93±0.20) mmol/L,10％糖KD组为(3.02±0.26) mmol/L,NCKD组为(2.89±0.17) mmol/L,F=421.529,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P＜0.001.接种后第7天各KD组血酮水平较SD组升高,SD组为(0.60±0.15) mmol/L,20％糖KD组为(2.54±0.25) mmol/L,10％糖KD组为(2.67±0.34) mmol/L,NCKD组为(2.65±0.16) mmol/L,F=183.395,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P＜0.001.SD组、20％糖KD组、10％糖KD组和NCKD组的中位生存时间分别为26、34、32和32 d,Log-rank检验显示,SD组与20％糖KD组差异有统计学意义,x2=14.044,P＜0.001;SD组与10％糖KD组差异有统计学意义,x2=10.199,P=0.001;SD组与NCKD组差异有统计学意义,x2=8.038,P=0.005.运用多因素Cox比例风险回归模型分析接种后第14天各KD组血糖、血酮及体质量增长量发现,血糖(P=0.026,RR=2.548,95％CI为1.062～3.064)及血酮(P=0.013,RR=0.272,95％CI为0.059～0.503)均对生存有影响.结论 生酮饮食可抑制小鼠EMT-6乳腺癌的生长,其机制与血糖及血酮的变化相关.