关于住院医师规范化培训的现状与思考

住院医师规范化培训是毕业后医学教育的重要组成部分,是培养高质量医疗卫生人才的重要手段,大大提高了我国整体医疗水平。近年来,住院医师规范化培训逐渐成熟,但仍存在一些问题。文章就住院医师规范化培训中学员自身问题、教学内容及体制方面等的问题进行初步的讨论,并就问题的解决对策提出理论层面的建议,旨在更好地进行住院医师规范化培训,进一步提高住院医师的医疗水平。     

注射用盐酸万古霉素和亚胺培南-西司他汀钠对肿瘤全抗原致敏的DC细胞的灭菌处理

目的 寻求肿瘤全抗原致敏树突状细胞( dendritic cell,DC)的无菌处理方法.方法 将提取的肿瘤抗原按比例加入4组DC培养液,同时梯度添加注射用盐酸万古霉素和注射用亚胺培南-西司他汀钠,分别培养24、48小时后抽取培养液做细菌、真菌检测.结果 对照组39例标本均未检出真菌,其中7例检出细菌.实验组均未检出真菌、细菌.结论 在DC细胞培养液中添加肿瘤全抗原的同时添加一定浓度的注射用盐酸万古霉素和亚胺培南-西司他汀钠可以获得安全的肿瘤全抗原致敏的特异性DC细胞.     

基于NLRP3炎症小体介导的巨噬细胞焦亡探究黄芩-黄连对动脉粥样硬化的干预机制

目的：探究黄芩-黄连(SRCR)对动脉粥样硬化(AS)小鼠的治疗作用及通过NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体对斑块内巨噬细胞焦亡的影响。方法：载脂蛋白敲除(Apo E^-/-)小鼠通过高脂饲料喂养构建AS模型,随机分为模型组、立普妥组(5 mg·kg^-1)、SRCR低、中、高剂量组(1.95、3.9、7.8 g·kg^-1),正常C57BL/6J小鼠作为正常组。给药8周后,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块病理情况;油红O染色观察主动脉斑块中脂质含量;检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;免疫荧光双染检测小鼠主动脉根部斑块组织中小鼠含生长因子样模体黏液样激素样受体(EMR1/F4/80)/NLRP3与F4/80/gasdermin D(GSDMD)共定位表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测N...     

如何上好《人类疾病实验动物模型的建立与应用》这门课

在人类疾病谱不断变化的时代里,实验动物模型对医学的发展起到巨大的推动作用,被广泛应用到医学的各个领域,因此,对于医学生而言,上好《人类疾病实验动物模型的建立与应用》这门课非常重要。这门课程中,学生除了掌握部分疾病模型建立方法之外,其科研思维、操作能力、创造性思维以及伦理道德方面将得到很大程度提升,但怎样才能提升《人类疾病实验动物模型的建立与应用》这门课的教学质量还需要我们深入探讨。本文将从学校、教师与学生的角度分别谈一谈如何上好这门课。     

肿瘤生物治疗研究进展

伴随生物分子技术和免疫实验技术的飞速发展,肿瘤生物治疗作为一种安全而有效的治疗手段,在肿瘤综合治疗中的作用越来越突出,已逐步发展为继手术、化疗和放疗之后的第四大治疗方法。目前肿瘤生物治疗手段主要包括非特异性免疫刺激     

稳定过表达人MGST1基因抑制肺腺癌细胞SPC A 1的凋亡

目的:建立稳定过表达微粒体谷胱甘肽S转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1,MGST1)基因的市腺癌SPC-A-1细胞系,探讨MGST1在肺腺癌中的作用及其机制.方法:重组质粒pcDNA3-MGST1和空载体pcDNA3以脂质体介导的方法转染至SPC-A-1细胞中,经过G418筛选稳转细胞系,标记为pcDNA3-MGST1细胞和空载体pcDNA3细胞.实时荧光定量PCR及Western blotting鉴定稳转细胞中MGST1 mRNA和蛋白的表达情况.MTS法检测稳转细胞的活力;流式细胞仪和Western blotting检测H2O2诱导下稳转细胞的凋亡率和下游凋亡相关蛋白水平变化.结果:酶切鉴定和测序结果显示pcD-NA3-MGST1重组质粒构建成功,并获得具有G418抗性的稳转细胞株.pcDNA3-MGST1细胞中MGST1在mRNA和蛋白水平表达均显著升高(P＜0.01),且细胞活力明显增加(P＜0.05).H2O2诱导下,pcDNA3-MGST1细胞的早期凋亡率明显低于pcDNA3组[(3.30±0.40)％vs(6.50±0.95)％,P＜0.05];pcDNA3-MGST1细胞凋亡相关蛋白caspase 9、caspase 3、PARP表达增多,cleaved-caspase 9、cleaved-caspase 3、cleaved-PARP表达明显减少.结论:本研究成功构建了稳定过表达MGST1的SPC-A-1肺腺癌细胞系,MGST1可能通过调节caspase凋亡通路抑制肺腺癌细胞的凋亡.     

肺癌中细胞外囊泡的研究进展

细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)是细胞旁分泌产生的一种亚细胞成分,主要分为外泌体(exosome)、微囊泡(microvesicle)两种类型,正常细胞和肿瘤细胞均可分泌EVs。肺癌细胞分泌的EVs参与肺癌生物学功能和肿瘤微环境调节,对肺癌的发生发展发挥重要作用。由于EVs包含的物质及特殊的分子结构决定其在肺癌的早期诊断、作为免疫调节剂、化疗药物载体等方面具有独特的临床应用价值,因此本篇综述主要介绍肺癌中EVs 研究的进展,为肺癌的早期诊断、治疗及预后提供重要的依据。     

中国ART行政管理现状与伦理问题思考

<正>我国不孕不育患病率已从上世纪70年代的2%以下上升到10%～15%^[1]。随着不孕人群数量的快速增长,人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)^[1]成为越来越多中国家庭的选择。ART技术从诞生之始就因为伦理冲突而引发很多社会争议,因为与传统的自然生殖相比,     

人IL-29的定点改造及抗肿瘤活性分析

【目的】 对野生型人IL-29受体结合区域的氨基酸残基进行定点改造,以期获得抗肿瘤活性更高的IL-29变异体。 【方法】 采用SWISS-MODEL网络服务器对IL-29与IL-28进行同源建模,再用Z-dock软件对IL-29与其受体结合亚基(IL-28R1)进行刚性蛋白质-蛋白质对接,然后用RosttaDOCK软件对获得的IL-29-受体复合物结构模型进行精细对接及优化。用PyMol软件分析确定IL-29肽链中与受体结合部位的关键氨基酸位点,然后以不同氨基酸进行置换和分子对接分析,用MM-PBSA法计算各位点氨基酸置换前后的结合自由能差(ΔΔG),选择ΔΔG差值大的氨基酸种类和位点为改造位点。设计定点突变引物,采用大引物PCR方法,将拟改变的氨基酸的编码碱基通过PCR扩增引入野生型IL-29基因进行置换,然后将获得的IL-29变异体基因插入质粒pPIC9K构建重组表达质粒,经测序鉴定后转化毕赤酵母进行发酵表达,发酵液经超滤浓缩和除盐后,采用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析纯化表达产物,用SDS-PAGE和蛋白质印迹分析鉴定表达产物。将重组野生型IL-29、重组IL-29变异体设置高(1 000 ng/mL)、中(500 ng/mL)、低(50 ng/mL) 三个剂量组,分别对胃癌细胞SGC 7901、结肠癌细胞 HCT-8进行培养,同时设置空白对照和阴性对照组,以重组人IFN_α2b药品为阳性对照组。用WST-8法检测各组样品对肿瘤细胞增殖的抑制率,统计分析各组样品对肿瘤细胞抑制效应的差异。 【结果】 经定点改造和重组表达及纯化,获得2个变异体IL-29 L (33Lys→33Arg单点突变体)和IL-29 Z (33Lys→33Arg、35Arg→35Lys双点突变体);WST-8法预试验结果显示,与阴性对照组比较,重组野生型IL-29高剂量组对胃癌细胞SGC 7901、结肠癌细胞 HCT-8的增殖抑制率分别为15.76% (P<0.05)、10.70% (P<0.05);重组变异体IL-29 Z高剂量组对SGC 7901的抑制率为52.17 (P<0.01),对HCT-8无明显抑制效应;重组IL-29 L 高剂量组对SGC 7901、HCT-8的抑制率分别为12.74% (P<0.05)、11.80% (P<0.05)。 【结论】 通过定点突变方法对人IL-29进行定点改造,可望获得抗肿瘤活性更高的IL-29变异体。