重症肌无力患者造血干/祖细胞及其亚群富集纯化的研究

目的:获得高纯度造血干/祖细胞及其亚群,用于重症肌无力(MG)造血干细胞移植治疗和生物学特性的研究。方法:用免疫磁珠法(MiniMACS)从MG骨髓中富集CD34+细胞后再用荧光激活细胞分选(Fluorescent activatedcell sorter,FACS)纯化CD34+/CD38+和CD34+/CD38-细胞亚群。结果:MiniMACS分选的CD34+细胞群纯度达90％,FACS分选的CD34+/CD38-和CD34+/CD38+两细胞亚群纯度可达95％以上。结论:联合使用MiniMACS和FACS可迅速大量纯化HSC/HPC及其重要细胞亚群,可用于临床造血于细胞移植、基因治疗和研究HSC/HPC及其亚群生物学特性。     

Ad5F35-LMP2重组腺病毒免疫效果的研究

目的了解含有EB病毒潜伏膜蛋白2的非复制型重组腺病毒(Ad5F35-LMP2),免疫恒河猴的特异性细胞和体液免疫的效果。方法分别使用高剂量(1.5×1010TCID50/只)、中剂量(1.5×109TCID50/只)、低剂量(1.5×108TCID50/只)Ad5F35-LMP2重组腺病毒,同时设对照组(PBS4.0ml/只)。肌内注射免疫恒河猴,每个月一次,共免疫3次,第0、4、8、12周时使用Elispot方法检测猴外周血EBV-LMP2细胞毒性T细胞应答,同时应用免疫酶方法检测血清中LMP2抗体。结果3个剂量Ad5F35-LMP2腺病毒免疫恒河猴均可以诱导出有效的细胞免疫应答及一定的抗体应答,免疫应答水平的高低与病毒剂量的高低有一定的关系,较高剂量产生的细胞及体液免疫应答水平比低剂量的高。结论Ad5F35-LMP2非复制型重组腺病毒疫苗可以有效的诱导恒河猴产生EBV-LMP2特异性细胞和体液免疫反应。     

定量蛋白质组学分析SDF2L1过表达后鼻咽癌细胞中的差异蛋白

目的：分析基质细胞衍生因子2样1(SDF2L1)过表达对人鼻咽癌（NPC）细胞5-8F中蛋白表达谱的影响。方法：提取SDF2L1基因过表达细胞株（5-8Fg）及空载细胞株（5-8F1）的总蛋白,利用非标记定量（LFQ）蛋白组学技术和串联质谱分析技术筛选差异表达蛋白（DEPs）,应用R软件对DEPs进行GO和KEGG富集分析,Cytoscape软件筛选关键的DEPs,Oncomine数据库对关键DEPs进行验证,RT-qPCR和western blotting法对筛选出来的关键DEPs进行验证。结果：在5-8Fg细胞中共筛选出730个DEPs,其中296个DEPs上调,434个DEPs下调。富集分析结果显示,DEPs主要定位在核糖体中,参与核糖体合成和内质网蛋白加工等过程,发挥黏附蛋白和催化活性等功能。通过Cytoscape和Oncomine数据库验证出核糖体蛋白L14(RPL14)、RPS15A等9个关键DEPs。SDF2L1过表达后RPL14基因（P<0.05）表达下调。结论：SDF2L1过表达后显著改变了NPC细胞中的蛋白表达特征,RPL14可能是NPC的促癌因子。     

COULTER流式细胞仪采用自配试剂在CD55、CD59水平检测中的应用探讨

目的探讨美国COULTER流式细胞仪试剂国产化问题。方法将自配鞘液及清洗液的理化性质、精密度、准确度、稳定性与原装试剂进行对比分析。结果自配试剂与原装试剂理化性质一致,采用自配试剂测定15份患者标本CD55、CD59水平并与原装试剂对比,差异无统计学意义（P〉0．05）,两者呈高度正相关（r〉0．95）。自配试剂稳定性好,放置1年后,用原装试剂分别测定15份标本,结果差异无统计学意义（P〉0．05）,两者呈高度正相关（r〉0．95）。结论自配美国COULTER流式细胞仪试剂完全可以代替原装进口试剂进行CD55、CD59的检测。     

骨髓中马尔尼菲青霉菌及荚膜组织胞浆菌的形态鉴别

目的提高马尔尼菲青霉菌病及荚膜组织胞浆菌深部感染的诊断.方法分析送检的马尔尼菲青霉菌病及荚膜组织胞浆菌病各1例中菌体形态.结果骨髓中马尔尼菲青霉菌大小不一致,有腊肠状细胞,单个或2个以上的核,而荚膜组织胞浆菌大小较一致,单个核.结论骨髓中菌体的形态检查对两病的诊断起重要作用.     

急性淋巴细胞白血病49例染色体核型和免疫分型的分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者染色体异常及免疫分型与疗效的关系。方法对49例ALL患者骨髓进行染色体及免疫分型分析。结果儿童ALL伴有t(9;22)异常核型的检出率明显低于成人ALL(P0.05),但疗效差异无统计学意义(P0.05);伴有t(9;22)的异常核型与正常核型ALL疗效比较差异有统计学显著意义(P0.05);伴或不伴有髓系抗原表达的ALL疗效比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 ALL患者染色体核型异常的检出率较高,较常见的核型异常为t(9;22);核型异常与疗效有一定的关系,伴有t(9;22)核型异常的ALL疗效差,而其它异常核型的ALL疗效间差异无统计学意义(P0.05)。     

AFP、5′-NT、γ-GGT、PA联合检测对原发性肝癌的诊断效能评估

目的 通过血清学指标联合检测,降低甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)低、中浓度原发性肝癌(primary liver cancer, PLC)患者的漏检率。方法 收集140例PLC患者(病例组)、72例肝硬化患者和80例慢性肝炎患者(对照组)的一般资料及相关检查结果,运用SPSS 19.0统计软件对病例组和对照组的血清学指标等进行秩和U检验分析,使用显著差异的血清学检测指标建立联合诊断模型。采用受试者工作特征曲线评价诊断模型的效能。结果 病例组的AFP、5′核苷酸酶(5-nucleotidase, 5′-NT)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glutamyl transpeptidase, γ-GGT)、前白蛋白(prealbumin, PA)浓度与对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。在所有受试者中,使用这4个指标联合检测时,诊断效能有效提高,其中二联诊断模型“AFP+5′-NT”的曲线下面积(area under the curve, AUC)=0.804,三联诊断模型“AFP+5′-NT+γ-GGT”的AUC=0.817,四联诊断模型“AFP+5′-NT+...     

胸腔积液CD14~+细胞表达白介素-16的研究

目的:探讨胸腔积液中CD14~+细胞能否合成和分泌白介素-16(IL-16)。方法:采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测细胞内细胞因子,即在胸腔积液中单个细胞水平上进行细胞膜表面抗原的染色和细胞内IL-16的测定;磁珠分选(Magneticcell sorting,MACS)法从胸腔积液中分离出CD14~+细胞,然后进行细胞培养并收集培养上清液,采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定IL-16的浓度。结果:胸腔积液中CD14~+细胞内IL-16显阳性的细胞百分率为(16.28±13.63)%(n=35);磁珠分选出胸腔积液CD14~+细胞,其培养上清液中IL-16的浓度为(58.51±25.38)ng/L(n=5)。结论:在一定条件下,CD14~+细胞(单核/巨噬细胞)有部分能合成和分泌IL-16。     

流式细胞术用于急性白血病免疫分型及其影响因素的分析

目的：探讨流式细胞术在急性自血病(AL)分型诊断上的应用价值及其影响因素。方法：用流式细胞术方法对经形态学诊断为AL的50例患者的骨髓细胞进行免疫分型。结果：形态学及免疫学分型结果相符合41例，占82％，不符合9例，占18％。抗体标记用直接法和选用CD45／SS设门检测及分析有助于减少分型误差。结论：流式细胞术免疫分型，对AL分型诊断有较大帮助，但制定规范的实验操作步骤及分析方案，才能获得较准确的诊断。     

广西地区1783例遗传疾病咨询者的染色体分析

目的：探讨染色体核型与遗传疾病的关系。方法：采集1783例遗传疾病咨询者的外周血，对其外周血淋巴细胞行培养制片，胰酶消化，作G带显色分析，对异常核型行电脑摄像及染色体分析。结果：染色体G带显色分析表明异常核型232例，为受检人数的13．0％，其中常染色体数目、结构异常145例，占62．5％，性染色体数目、结构异常87例，占37．5％。结论：染色体数目、结构出现核型异常与常见的染色体疾病有直接的关系。