雄激素应答元件陷阱DNA抑制PSA基因启动子的作用并诱导LNCaP细胞凋亡(英)

目的：研究雄激素应答元件陷阱DNA（ARE decoy）对前列腺特异抗原（PSA）基因启动子的抑制作用及其对前列腺癌细胞LNCaP细胞生长活性的影响，为前列腺癌的基因治疗寻求新的策略。 方法:联合运用报告基因和陷阱DNA策略，构建含PSA基因5’侧启动子区640 bp DNA的荧光素酶表达载体pGL3-PSA， ARE陷阱DNA共转染前列腺癌细胞株PC3-M。应用双荧光素酶测定系统，检测荧光素酶的表达活性。然后，应用2 mg/L ARE decoy转染LNCaP细胞，通过相差显微镜观察细胞超微结构变化，MTT比色法检测细胞生长活性，DNA ladder和流式细胞技术（FCM）检测细胞凋亡以研究ARE decoy DNA对前列腺癌细胞LNCaP细胞生长活性的影响。同时提取LNCaP细胞核蛋白，应用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测ARE decoy DNA与雄激素受体的特异结合。结果:ARE decoy DNA显著抑制报告基因荧光素酶的表达，抑制率可达95%。EMSA显示ARE decoy DNA能特异与核蛋白中雄激素受体结合。LNCaP细胞转染ARE decoy DNA后，镜下观察部分细胞出现凋亡形态学的改变，细胞体外生长受到抑制，染色体DNA凝胶电泳可见明显梯形条带。转染48h的凋亡率为22.4%。 结论:实验表明ARE decoy DNA能竞争结合雄激素受体(AR)，阻断AR的作用而诱导LNCaP细胞凋亡，有可能为前列腺肿瘤的治疗提供新的策略。     

培养神经细胞的氧自由基损伤及银杏叶提取物的治疗作用

目的 探讨氧自由基在Alzheimer病(AD)发病中的作用和评价银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract，EGb)的临床应用价值。方法 以产生超氧阴离子系统黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶(X／XO)作用于PC12细胞，并以EGb拮抗其作用，电镜观察细胞形态变化，MTF法检测细胞存活率，流式细胞术分析细胞凋亡情况，RT-PCR技术分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达变化。结果 经X／XO损伤后，细胞存活率降低，凋亡率增加，促凋亡基因Bax表达上调。EGb(20mg／L)能改善凋亡情况。结论氧 自由基可诱导神经细胞凋亡而促进AD发生，EGb对神经细胞有保护作用，提示可用于AD的临床治疗与预防．     

地梢瓜化学成分的研究

从萝藦科鹅绒藤属植物地梢瓜(Cynanchum thesioides)的全草中共分离到十四个化合物,本文报道已鉴定的七个化合物。其中两个新化合物分别为1,3-二棕榈酸-2-山梨酸-甘油三酯(4)和地梢瓜甙(7)。五个已知化合物鉴定为β-香树脂醇乙酸酯(1),羽扇豆醇乙酸酯(2),α-香树脂醇正辛烷酸酯(3),柽柳素(5),柽柳素-3-O-β-D-半乳糖甙(6)。     

人PDLIM4基因启动子报告基因载体的构建及其在人类肿瘤细胞中的表达

目的构建人PDLIM4基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒pGL3-promoter,检测其在不同肿瘤细胞中的表达。方法据Genebank中人PDLIM4基因启动子序列分别设计上下游引物,扩增其启动子片段,并插入到pGL3-Basic报告基因载体,分别得到含有3kb和1.2kb的PDLIM4基因启动子的两个报告基因质粒pGL3-PD-LIM4-3kb和pGL3-PDLIM4-1.2kb。序列为1.2kb的启动子利用Erase-a-base试剂盒,经外切酶Ⅲ从5’端逐步酶切得到5个含不同长度启动子序列的报告基因载体:pGL3-PDLIM4-1.2D1、pGL3-PDLIM4-1.2D2、pGL3-PDLIM4-1.2D3、pGL3-PDLIM4-1.2D4、pGL3-PDLIM4-1.2D5。将构建的报告基因载体分别瞬时转染以下细胞株:Hela、MDA-MB231、KB、PC-3、LNCaP,检测其荧光素酶表达活性。结果所构建质粒经酶切、测序鉴定,其片段长度及序列均正确。转染结果显示,长片段的3kb和1.2kb启动子序列在所测试的细胞株中均有表达,但在人激素非依赖前列腺癌PC-3细胞株、人激素依赖前列腺癌LINCaP细胞株中表达较低。而不同长度的启动子报告基因质粒转染PC-3、LNCaP的结果显示,pGL3-PDLIM4-1.2kb表达活性最强,pGL3-PDLIM4-970bp表达活性最弱。结论成功构建了7个分别含有不同长度的PDLIM4启动子报告基因载体,其在不同的肿瘤细胞株中均有不同程度的表达,而在前列腺癌细胞中表达较低。     

c-Jun和CBP在槲皮素抑制前列腺癌中的作用

目的探讨槲皮素抑制前列腺癌的作用机制。方法应用蛋白印迹技术检查槲皮素(quercetin)对雄激素受体(androgen receptor，AR)的辅调节因子c-Jun和cAMP应答元件结合蛋白的结合蛋白［cAMP response element binding protein (CREB)-binding protein，CBP］蛋白表达的影响；利用细胞转染技术检测c-Jun和CBP对AR功能的影响； 免疫沉淀技术检验c-Jun与AR的蛋白-蛋白相互作用。结果槲皮素能够明显诱导c-Jun的高表达， 高表达的c-Jun能够抑制AR的功能。槲皮素对CBP的蛋白表达水平无明显影响，而增加CBP的表达并不能逆转槲皮素对AR功能的抑制作用。免疫沉淀结果表明，c-Jun与AR存在蛋白-蛋白相互作用。结论槲皮素抑制前列腺癌的机制可能是通过c-Jun与AR的蛋白相互作用，而不是通过c-Jun竞争结合AR的辅激活因子CBP来实现的。     

纳米技术在国内药学领域中的研究和应用进展

本文介绍了近年来纳米技术在药学领域中的研究和应用现状 ,并对其前景进行展望。     

新型抗真菌药（Terbinafine）

新型抗真菌药（Ｔｅｒｂｉｎａｆｉｎｅ）张玮，张桂玉，苑辉卿，王光芳（山东省潍坊市人民医院临床药物研究室２６１０４１）抗真菌药Ｔｅｒｂｉｎａｆｉｎｅ（商品名Ｌａｍｉｓｉｌ，简称ＴＢＦ）为烯丙胺类第一个口服有效的药物，由英国Ｓａｎｄｏｚ公司研制成功并于１...     

红藻海头红药效学及化学成分的研究(Ⅰ)

对红藻门海藻海头红的不同极性部位进行了抗肿瘤活性研究 ,其中石油醚部位在 12 5～ 50 0 mg·kg-1剂量范围内 ,对小鼠 S180 肉瘤、H2 2 肝癌、艾氏腹水癌均具有明显的抑制作用 ,并具有一定的剂量依赖性 ,在对肿瘤生长产生抑制作用的同时 ,不影响动物的体重增长。对人宫颈癌 He L a细胞、白血病 HL60 细胞也具有一定的体外细胞毒作用 ;氯仿部位及正丁醇部位抑瘤作用稍差 ,水部位毒性较大。对海头红全藻进行了化学成分的分离 ,现已从石油醚部位分离得到 5个化合物 ,经化学方法和光谱分析鉴定了其中 4个化合物的结构 ,分别为 β-谷甾醇 ( )、硬脂酸 ( )、十八烷酸三十四烷醇酯 ( )和 β-谷甾醇十六烷酸酯 ( )。     

莲子心化学成分的研究

从莲子心（Ｎｅｌｕｍｂｏｎｕｃｉｆｅｒａ）弱极性部位分离得到７个化合物，通过波谱解析和理化性质测定确定其结构分别为棕榈酸（Ⅰ），β－谷甾醇（Ⅱ），β－谷甾醇正辛烷酸酯（Ⅲ），β－谷甾醇棕榈酸酯（Ⅳ），β－谷甾醇－３－Ｏ－β－Ｄ－萄葡糖甙（Ⅴ），莲心碱（Ⅵ）和甲基莲心碱（Ⅶ），化合物Ⅲ和Ⅳ系首次自该属植物中分得。     

地梢瓜化学成分的研究

从萝藦科鹅绒藤属植物地梢瓜的干燥全草中分得7个化合物,经光谱分析及化学方法确定各化合物的结构为β-谷甾醇,胡萝卜甙,阿魏酸,琥珀酸,槲皮素,1,3-O-二甲基-肌-肌醇和蔗糖。