不同超声辐照时间和微泡剂量介导HepG2细胞基因转染的实验研究

目的 探讨不同超声辐照时间和微泡剂量与基因转染效率之间的关系,初步摸索适宜转染的参数条件.方法 质粒DNA用增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP),以人肝癌细胞(HepG2)为研究对象.超声频率1 MHz.声强0.5 W/cm2,对加入pEGFP和不同剂量微泡的HepG2细胞辐照不同的时间,24 h后用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测基因转染率,台盼蓝染色检测细胞存活率.结果 各实验组均可见不同程度荧光蛋白表达,辐照时间为20 5和微泡剂量为60μl时可达到较理想的转染效率.结论 在超声频率和声强一定的条件下,不同超声辐照时间和微泡剂量有不同的基因转染效率,20 s、60 μl是一个较理想的参数,为基因治疗进一步研究提供了参考.     

高校学生毒品知识及知识来源的调查

目的 了解当代大学生的毒品知识及毒品知识的来源,探讨适合当代大学生拒绝毒品、远离毒品的教育模式。方法 在衡阳市五所高校随机抽取349名大学生,采用不记名问卷的方式对其进行毒品知识及知识来源的调查。结果 被调查者对有关毒品危害的问题,平均得分77分（总分100分）,各问题正确回答率从34.48-94.56%不等,有78.51%的人知道吸毒能传播艾滋病（AIDS）;有关毒品的知识主要来源于电视（74.21%)、报纸（73．93％）、书籍（66．76％）等大众媒介;3．72％的学生想尝试毒品,2．29％的学生敢吸毒、认为凭自己的意志可以控制不上瘾。结论 高校学生对毒品的危害有一定认识,但认识不全面、不深刻,有必要把禁毒健康教育纳入大学生素质教育的课程。     

基于无人机和深度学习的大型垃圾填埋场覆膜病害智能识别方法研究

为提高大型生活垃圾卫生填埋场的堆体覆膜穿刺、撕裂等常见病害的巡检效率,以广州市兴丰生活垃圾卫生填埋场为研究对象,基于无人机航拍和深度学习模型,考察了无人机的选型和巡航参数,使用无人机采集病害样本并在病害图像识别模型中采用过采样的训练策略。并在YOLOv5模型上增加细微目标识别层,可实现较高的识别准确率与召回率。研究结果表明：在病害图库样本数量相对有限的前提下利用过采样的策略提升了样本的代表性与均衡性,显著提高了模型病害识别的准确率。无人机结合高精度RTK定位技术能准确定位航拍照片坐标,解决了无明显参照物下覆膜病害定位困难的问题。通过查询病害缺陷照片的地理信息,可以快速找到病害位置,有助于及时开展修复作业。     

原发性肝细胞肝癌组织分化程度与超声造影的关系

目的探讨原发性肝细胞肝癌（HCC）超声造影与组织学分化程度的关系。方法回顾术前应用SonoVue超声造影剂的47例HCC患者超声造影表现,将所获得曲线形态和灌注参数与术后标本的组织分化程度进行对照分析。结果9例高分化HCC均为快上慢下型;24例中分化HCC,15例呈快上慢下型（20.80%）,19例（79.20%）呈快上快下型;14例低分化HCC,8例（57.10%）呈快上慢下型、6例（42.90%）呈快上快下型;不同分化程度HCC病灶始增时间、增强时间、峰值强度组间差异无统计学意义（P〉0.05）,始消时间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论不同分化程度HCC超声造影TIC形态和声学定量参数变化特征不同,有助于术前无创性了解肿瘤分化程度。     

不同浓度超声微泡结合共聚物P85对人肝癌细胞HepG2基因转染的影响

目的 不同浓度超声微泡造影剂(MB)结合共聚物P85后联合一定强度超声(US)辐照,初步摸索最适人肝癌细胞HepG2质粒转染及表达的MB浓度。 方法 以人肝癌细胞HepG2为研究对象,以绿色荧光蛋白(EGFP)质粒为报告基因,添加共聚物P85和不同浓度的MB后进行脉冲多普勒US辐照。24 h后台盼蓝染色评价细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞的基因转染率。 结果 MB浓度在30%时达到较理想的转染率(22.14±3.06)%,且细胞存活率无明显下降(55.73±3.32)%。添加MB后基因转染率均较pEGFP+P85+US转染率高。 结论 MB与共聚物P85结合同时给予US辐照可增强基因转染率,且在MB浓度为30%时达到较理想的转染率。     

肝源性腹泻106例临床分析

对106例各种肝脏疾病合并腹泻的住院病人资料进行总结和分析。结果:(1)各种肝脏疾病中,肝源性腹泻发生率由高到低依次为:各型肝硬化(64.15%)、慢性乙型病毒性肝炎(18.87%)、原发性肝癌(11.32%)、脂肪肝(3.77%)和药物性肝病(1.89%),其临床表现无特征性;(2)腹泻发生在肝病早期的较少,大多出现在肝病的中后期;(3)腹泻的严重程度与肝功能密切相关。早期诊断和改善肝功能是治疗肝源性腹泻的关键。     

不同超声辐照时间和微泡剂量介导HepG2细胞基因转染的实验研究

Objective To investigate the relationship of gene transfection efficiency with different ultrasound exposure time and different dose of microhuhble,and to find the appropriate ultrasound parameters for gene transfection. Methods Plasmid encoding enhanced green fluorescent protein(pEGFP) was chosen as a report gene and HepG2 cells were chosen as research object. The HepG2 cells plus pEGFP and different dose of microbubble were exposed to ultrasound(1 MHz,0.5 W/cm2) with varying time. Twenty-four hours later, the expression of EGFP in the cells was observed by fluorescence microscope,the transfection efficiency was assessed by FACS and the cell viability was observed by trypan blue exclusion. Results The expression of EGFP in all experimental groups was different,and the approving transfection efficiency was got by ultrasound exposed for 20 s when the dose of microbubble was 60 μl. Conclusions With fixed ultrasound frequency and power, different transfection efficiency was got when the exposure time and dose of microbubble were different. The appropriate parameter was 20 s,60 μl, which can supply information for further study.     

造影剂、超声波与肿瘤基因治疗

近年,超声医学不仅在诊断领域取得了突飞猛进的发展,而且在治疗领域也呈现出潜在的应用前景,尤其在基因治疗方面愈来愈受到超声医学和分子生物学工作者的关注并取得了理想的基因转染效果[1].基因治疗是把目的基因转移入细胞内,并通过调控目的基因的表达,抑制、替代或补偿缺陷基因,从而恢复受累细胞、组织或器官的生理功能,达到治疗疾病的目的[2].研究[3]表明,超声造影剂作为一种新的基因转染载体,在超声辐照下促进基因转染治疗肿瘤方面具有潜在的应用价值.     

共聚物P85联合超声微泡介导基因转染的体外实验研究

目的 探讨共聚物P85与黏附增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresent protein,EGFP)质粒的微泡造影剂(microbubble,MB)结合后联合一定强度的超声(ultrasound,US)辐照,是否增强人肝癌细胞(HepG2)的质粒转染及表达.方法 以人肝癌细胞(HepG2)为研究对象,质粒DNA是可表达绿色荧光蛋白的pEGFP,添加微泡造影剂或共聚物P85后进行脉冲多普勒超声辐照(频率1 MHz,声强1 W/cm2,工作周期20%,时间20 s).24 h后台盼蓝染色评价细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞的基因转染率.结果 有超声辐照组的pEGFP转染率明显高于无超声辐照组(P＜0.01),有超声辐照组中pEGFP+30%MB+P85+US组转染效率(22.14±3.06)%优于单独使用微泡组(11.34±2.2)%或P85组(9.72±1.21)%(P＜0.01).结论 微泡造影剂与共聚物P85结合同时给予超声辐照可增强基因转染效率,在基因治疗上有待于进一步关注和研究.     

大学生对毒品KAP调查分析

吸毒 ,2 0世纪 80年代初在我国死灰复燃 ,正以惊人的速度向四处蔓延。国外一些高等院校已把预防吸毒纳入课程教育 ,我国有些学者也建议采用类似方法 ,以提高人群自我保护力。为此 ,笔者于 2 0 0 0年 1 0月对衡阳市几所高校大学生进行了有关毒品知识 ( K)、态度 ( A)、行为 ( P)的状况调查 ,为探讨在高校大学生中开展毒品预防教育提供基础资料 ,并探索适合高校大学生拒绝毒品 ,远离毒品的教育模式 ,为戒毒研究提供参考。1　调查对象和方法1 .1　调查对象 :随机抽取衡阳市 5所不同性质的本专科院校的学生 35 0人 ,专业包括医学、师范、艺术…