阻断乳腺癌细胞PD-L1减弱对共培养树突状细胞成熟的抑制作用

目的探讨表达PD-L1的乳腺癌细胞是否通过激活树突状细胞的PD-L1/PD-1信号通路抑制树突状细胞成熟。方法人单 核细胞用GM-CSF和IL-4诱导为不成熟树状突细胞,再用TNF-α诱导为成熟树状突细胞;表达PD-L1的乳腺癌细胞系MDAMB- 231与树状突细胞接触共培养;PD-L1阻断抗体处理共培的的乳腺癌细胞和树状突细胞;重组人PD-L1蛋白处理TNF-α诱 导的树突状细胞;流式细胞仪检测乳腺癌细胞膜PD-L1的表达和树突状细胞的成熟分化标志HLA-DR和CD83。结果乳腺癌 细胞MDA-MB-231细胞系中,细胞膜表面PD-L1阳性细胞高达（99.7±0.15）%;HLA-DR和CD83阳性细胞在成熟树状突细胞对 照组分别为（88.8±6.96）%和（18.36±3.07）%,在MDA-MB-231共培养实验组树状突细胞群分别降至（42.76±10.52）%和（9.93± 2.74）%,两组比较差异有统计学意义（P<0.01,P<0.05）;HLA-DR和CD83 阳性细胞在PD-L1 抗体同型对照组分别为（45.17± 10.19）%和（10.15±2.54）%,在PD-L1抗体处理组分别升至（63.46±1.72）%和（16.46±2.58）%,两组相比差异均有统计学意义（P< 0.05）;和成熟树状突细胞对照组相比,人重组PD-L1蛋白处理组HLA-DR和CD83阳性细胞率较低,组间统计学差异有统计学 意义（P<0.05）。结论PD-L1抗体对三阴性乳腺癌患者的治疗的效果,可能部分基于抗体阻断乳腺癌细胞表面的PD-L1,从而 减弱其对肿瘤微环境中的树突状细胞成熟的抑制作用。     

靶向人CD70的嵌合抗原受体巨噬细胞制备及其对肾癌的杀伤作用的研究

目的:本研究旨在探讨稳定感染靶向人CD70蛋白的嵌合抗原受体巨噬细胞(chimeric antigen receptor macophages, CAR-M)对人肾癌细胞系(786-O、OS-RC-2和ACHN)的体外杀伤作用,开发靶向人CD70的肾癌细胞的新型细胞疗法。方法:将含人CD70抗体scFv片段的CAR序列插入含有GFP序列的慢病毒质粒中,制备CD70-scFV-CAR-GFP的慢病毒。通过慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7制备CD70-CAR-M,通过流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CD70-CAR-M细胞并在体外筛选稳定表达细胞株。将CD70-CAR-M细胞与不同类型的肾癌类器官按照1∶1的比例分别共培养后,利用流式细胞术检测CD70-CAR-M对肾癌细胞的杀伤作用。qRT-PCR检测CD70-CAR-M在和肾癌细胞系共培养后TNF-α和TGF-β的表达水平改变情况。结果:通过测序确认了CD70-scFV序列,并成功制备了相应的慢病毒。利用该慢病毒感染巨噬细胞RAW264.7,通过qRT-PCR技术证明CD70-CAR分子稳定表达在RAW264.7。通过和不同类型...     

依达拉奉对矽肺大鼠的干预治疗作用研究

目的 观察自由基清除剂依达拉奉（edaravone）对矽肺大鼠造模后肺纤维化的影响,探讨其对矽 肺的治疗作用。方法 SPF 级Wistar 大鼠54 只随机等分为9 组：对照组,模型组以及依达拉奉干预组,后两 组依采样时间分为7、14、21 和28 d 4 个亚组,每组各6 只大鼠。除对照组外,其余各组大鼠采用非暴露法 气管内一次性注射二氧化硅（SiO2）悬液（250 mg/kg）复制矽肺动物模型;依达拉奉组自注射SiO2 后每天 腹腔注射依达拉奉（4 ml/kg）,对照组每天用生理盐水腹腔注射（4 ml/kg）,连续28 d。采用HE 染色技术观 察各组大鼠肺组织形态学变化,Western blot 检测肺组织中转化生长因子β（TGF-β）蛋白的表达;试剂盒检 测肺组织中羟脯氨酸（HYP）、还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量。结果 依达拉奉可改善矽肺 大鼠肺间质纤维化程度,提高矽肺大鼠肺组织匀浆GSH 活力,降低HYP、TGF-β 和MDA 含量。结论 依达 拉奉可降低大鼠体内自由基及TGF-β 水平,对矽肺大鼠有较好的治疗作用。     

北京市西城区女性盆底功能障碍性疾病影响因素分析

目的 分析北京市西城区女性盆底功能障碍性疾病(PFD)影响因素,并进行个体化干预.方法 选取316例行“两癌筛查”的女性为研究对象.采用整群抽样方法,综合调查问卷、盆腔器官脱垂定量分度法(pOP-Q)评分和盆底肌力检测对研究对象进行分析.结果 PFD患病率随年龄增加而增高,尿失禁的总患病率为48.42％,盆腔器官脱垂(...     

多囊卵巢综合征诊断指标的比较和筛选

目的通过对3种诊断标准的比较,筛选出更符合多囊卵巢综合征(PCOS)特点的评价指标,从而有针对性的进行个体化治疗。方法募集2016年10月至2017年10月间因月经异常就诊于北京市首都医科大学附属友谊医院妇科的中国境内汉族女性248例作为观察组,分别按照中国标准、日本标准和鹿特丹标准进行判别,比较3种标准诊断的PCOS与非PCOS患者之间各项指标的差异,并通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积分析LH、LH/FSH、T、DS 4个指标在PCOS诊断中的意义。另选同期就诊基础体温双相的因输卵管或子宫因素导致不孕症的47例患者作为对照组。结果 248例月经异常的患者中,按照鹿特丹标准确诊PCOS患者186例,非PCOS患者62例,4个评价指标的AUC分别为0.780、0.798、0.708、0.717;按照中国标准确诊PCOS患者176例,非PCOS患者72例,4个评价指标的ROC工作曲线下面积(AUC)别为0.722、0.718、0.679、0.705;按照日本标准确诊PCOS患者134例,非PCOS患者114例,4个评价指标的AUC分别为0.637、0.662、0.629、0.603。结论鹿特丹标准在诊断PCOS时最具有优势,更符合疾病代谢特点。