PEGFP-C1/U6质粒载体介导的表达MDR1 shRNA的质粒构建

为了构建pEGFP-C1／U6载体介导MDR1短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达的质粒，针对MDR1的19碱基大小的片段．分别设计2对寡核苷酸，形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pEGFP-C1载体（命名为pEGFP-C1／U6），两对DNA双链连接后形成中间由9个碱基序列间隔的反向互补序列，构建成能产生MDR1短发卡RNA的质粒。结果表明：经酶切、连接后构建成的质粒（pEGFP-C1／U6／A和pEGFP-C1／U6／B），经酶切与测序证实构建成功，无任何碱基突变。结论：成功构建了能表达MDR1 shRNA的质粒栽体pEGFP-C1／U6／A和pEGFP-C1／U6／B，此项研究结果可能为临床上逆转肿瘤多药耐药提供一种有效的方法。     

拮新康、甲基蓬心碱逆转K562/A02及原代白血病细胞MDR分子机制研究

血液系统恶性肿瘤治疗主要手段是化疗,肿瘤化疗失败的主要原因是多药耐药(multidrug resistance,MDR),是当今治疗最大难点,也是亟需解决的重要研究课题.     

三种蒽环类抗肿瘤药物对K562/A02细胞体外抑制作用

目的: 比较表阿霉素,柔红霉素和吡喃阿霉素对多药耐药细胞株K562/A02体外增殖的抑制作用. 方法: 利用MTT观察7.5～60μg/ml的表阿霉素或柔红霉素或吡喃阿霉素处理K562/A02细胞后细胞增殖的变化. 结果: 吡喃阿霉素剂量逐渐增大时,抑制率逐渐增强(P<0.05).吡喃阿霉素组对K562/A02细胞的抑制率较相同剂量表阿霉素组或柔红霉素组抑制率显著增加(P<0.01). 结论: 相同剂量的吡喃阿霉素较表阿霉素或柔红霉素有更强的抑制多药耐药细胞株K562/A02细胞的作用.     

拮新康、甲基莲心碱逆转K562／A02及原代白血病细胞MDR分子机制研究

血液系统恶性肿瘤治疗主要手段是化疗,肿瘤化疗失败的主要原因是多药耐药（multidrug resistance,MDR）,是当今治疗最大难点,也是亟需解决的重要研究课题。经过多年的努力,我们从中药中筛选高效低毒肿瘤耐药逆转剂“拮新康”,是由莲心、黄芪组成,2002年11月已获国家发明专利。经研究表明,拮新康有逆转耐药,增强化疗的作用,应用于临床治疗耐药白血病有一定的疗效,     

不典型慢性粒细胞白血病细胞形态学和组织病理学特征研究

不典型慢性粒细胞白血病(aCML)是Ph染色体及bcrabl融合基因均阴性的克隆性造血异常疾病[1].该病不是传统CML的变异,而是初诊时骨髓增生异常和骨髓增殖性疾病同时表现的白血病.     

急性髓细胞白血病转化为慢性粒细胞白血病1例

<正>慢性粒细胞白血病(CML)发病率相对较高,对治疗药物产生耐药性后易进展为急性白血病,其主要为急性髓细胞变,偶见急淋或急性双系列变[1-6]。由急性髓细胞白血病(AML)转化为CML的相关报道在国内外罕见。我院发现的1例AML转化为CML,报道如下。1病历资料患者,男,37岁。2005年于我院确诊为伴成熟型急性髓细胞白血病(AML-M2),染色体核型分析未见明显异常。治     

Survivin反义寡核苷酸诱导K562/A02细胞凋亡的实验研究

背景与目的:Survivin是最近发现的凋亡抑制基因,与白血病的发生和耐药有关,反义寡核苷酸可抑制survivin表达,诱导凋亡,增加药物的敏感性。本研究探讨survivin反义寡核苷酸对白血病耐药细胞K562/A02生长、凋亡和半胱氨蛋白水解酶3的活性的作用。方法:以脂质体转染survivin反义寡核苷酸,以MTT、RT-PCR、流式细胞术、荧光分光光度计分别检测survivin反义寡核苷酸对K562/A02细胞的生长抑制、survivin mRNA表达、凋亡和半胱氨蛋白水解酶3的活性。结果:survivin反义寡核苷酸对K562/A02细胞的生长抑制呈浓度-时间依赖性,与对照组相比,survivin mRNA表达降低36.2%(P<0.05),半胱氨蛋白水解酶3的活性增加67.6%(P<0.05);K562/A02细胞的凋亡率明显增加(14.48±2.65%vs 2.39±0.47%,P<0.005)。结论:survivin反义寡核苷酸通过抑制survivin表达,上调半胱氨蛋白水解酶3活性而诱导凋亡。     

接骨草药茶的炮制及黄酮类化合物含量的比较

目的：建立接骨草食疗药茶的炮制方法.方法：按照中药不同炮制方法将接骨草嫩茎尖制备成药荼,通过感官审评,用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法测定黄酮类化合物的含量并比较.结果：相对于生品,其余8种炮制方法的感观效果均较好,而清炒制的效果最好,其次为蜜麸炒制;清炒制、清麸炒制及生品药茶中黄酮类化合物含量之间差异极显著,并极显著地高于其他炮制方法（P＜0.01）.结论：9种炮制方法均可以用于接骨草食疗药茶的制备,其中清炒制和加麦麸炒制效果较好.     

TBL教学在住院医师规范化培训典型病例讨论中的应用

目的:探讨住院医师规范化培训中基于团队的学习(TBL)应用于典型病例讨论的带教方式。方法:选择浙大二院内科基地39名学员作为研究对象。对照组采用常规病例讨论形式;实验组采用TBL形式。分析两组出科考成绩,评价对TBL方式的满意度。结果:两组学员出科考核总成绩、临床思维与决策能力成绩,实验组显著高于对照组(P<0.05)。TBL在提高课堂学习专注度、提高临床思维与决策能力上评价较高。结论:TBL用于典型病例讨论更有助于提高临床带教效果。     

PDTC加强柔红霉素对多药耐药白血病细胞增殖的抑制作用

为了观察吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrroledithiocarbomate,PDTC)体外对柔红霉素的化疗增敏作用,利用MTT法观察联用PDTC和柔红霉素处理难治性白血病患者骨髓单个核细胞增殖的变化。结果表明,加入PDTC后柔红霉素对白血病耐药细胞的抑制率增强(P<0.05)。当PDTC的浓度为50μmol/l时柔红霉素对白血病耐药细胞的抑制最明显。结论:PDTC体外能增敏柔红霉素对耐药白血病细胞的抗肿瘤作用,其中以50μmol/L浓度的PDTC为最佳抑制浓度。