小鼠胚胎大脑皮质活化和静息神经干细胞的初步分离与鉴定

目的:从小鼠胚胎大脑皮质中分离并鉴定静息和活化的神经干细胞。方法:通过流式细胞术,从胚胎14.5 d的小鼠大脑皮质中分选出大小不同的细胞团;利用免疫荧光技术检测神经干细胞标志物Pax6以及增殖标志物Ki67的表达变化;借助RT-qPCR分析两组细胞中干细胞标志基因Pax6、Oct4、Sox2和Nanog的表达情况;采用流式细胞术及RT-qPCR分析两组细胞所处的周期;体外培养对大、小细胞组进行增殖能力检测。结果:免疫荧光结果表明,分离出的两类细胞均表达Pax6,且大细胞组Ki67为阳性,小细胞组为阴性。细胞周期分析显示,小细胞组G₀/G₁期比例高于大细胞组,而G₂/M期为0,且cyclin A和cyclin B的表达显著低于大细胞组(P<0.05)。体外培养显示,相对于大细胞,小细胞形成的微球数量少,速度慢;大、小细胞形成的微球消化后,Pax6和Ki67染色均阳性,且阳性率无显著差异(P>0.05)。结论:大、小细胞团分别为活化和静息的神经干细胞。活化的干细胞具有较强的增殖能力,而静息干细胞自我复制与增殖能力...     

p57KIP2、cyclin D1、cyclin E在男性乳腺癌组织中的表达及其临床意义

  目的  探讨p57KIP2、cyclin D1、cyclin E在男性乳腺癌（male breast cancer，MBC）组织中的表达及其临床意义。  方法  收集2000年1月至2016年12月60例温州医科大学附属第一医院MBC患者的组织标本，分为乳腺浸润性导管癌组（infiltrating ductal carcinoma，IDC）40例、乳腺导管原位癌组（ductal carcinoma in situ，DCIS）20例，选取20例男性乳腺发育症（gynecomastia，GYM）作为对照组。应用RT-PCR、免疫组织化学法分别检测IDC、DCIS、GYM组织中的p57KIP2、cyclin D1、cyclin E mRNA及蛋白的表达情况。  结果  IDC的p57KIP2 mRNA表达水平为0.18±0.07，低于DCIS的0.42±0.05、GYM的0.75±0.04；IDC的p57KIP2蛋白阳性率为25%（10/40），低于DCIS的60%（12/20）、GYM的90%（18/20）；p57KIP2 mRNA及蛋白表达三组间两两比较，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。IDC的cyclin D1、cyclin E mRNA表达水平分别为0.92±0.12、0.96±0.08，高于DCIS的0.72±0.06、0.64±0.01及GYM的0.38± 0.03、0.21±0.02；IDC的cyclin D1、cyclin E蛋白阳性率分别为90%（36/40）、88%（35/40），高于DCIS的80%（16/20）、85%（17/20）及GYM的25%（5/20）、20%（4/20），差异均具有统计学意义（P < 0.05）。在IDC组织中p57KIP2、cyclin D1、cyclin E表达均与临床分期、组织学分级相关（P < 0.05），p57KIP2蛋白的表达与淋巴结转移相关（P < 0.05）；p57KIP2与cyclin D1、p57KIP2与cyclin E呈负相关（P < 0.05），cyclin D1与cyclin E呈正相关（P < 0.05）。  结论  p57KIP2、cyclin D1、cyclin E可能参与了MBC的发生发展过程，联合检测p57KIP2、cyclin D1、cyclin E可为进一步发现MBC的发病机制及治疗提供重要参考。      

子宫内膜样腺癌组织中p57KIP2、cyclin E蛋白表达与临床病理特征的关系

 目的
研究子宫内膜样腺癌组织中p57^KIP2、cyclin E蛋白的表达与临床病理特征的关系。
方法
采用免疫组织化学Elivision法检测100例子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)、20例正常子宫内膜、20例子宫内膜增生性病变、20例子宫内膜上皮内瘤变(endometrial intraepithelial neoplasia,EIN)组织中p57^KIP2、cyclin E蛋白的表达情况。
结果
p57^KIP2蛋白在EIN中阳性表达最高,在增生性病变中表达最低,在正常内膜组织中表达稍高于EA,但仅在EIN与在增生性病变中阳性表达比较,差异有统计学意义(P≤0.05);cyclin E蛋白在正常子宫内膜组织中表达最低,在增生性病变、EIN中的阳性表达逐渐增高,在EA中表达最高(P≤0.05,P＜0.01)。在EA组织中,p57^KIP2、cyclin E蛋白的阳性表达均与组织学分级、肌层浸润深度、手术分期有关(P≤0.05,P＜0.01),cyclin E蛋白的表达还与盆腔淋巴结转移有关(P＜0.01);但两者的阳性表达均与患者年龄无关(P＞0.05)。p57^KIP2与cyclin E之间的阳性表达呈负相关(P＜0.01)。
结论
p57^KIP2、cyclin E均参与了EA的发生发展过程。联合检测p57^KIP2、cyclin E蛋白在子宫内膜癌组织中的表达情况,
对评估子宫内膜癌的生物学行为、判断预后有重要的意义。     

P57KIP2在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中表达的意义

目的 通过检测p57KIP2蛋白在子宫内膜癌及子宫内膜不同病变组织中的表达情况,探讨p57KIP2在子宫内膜癌发生、发展中的作用.方法 选取100例子宫内膜样腺癌( endometrioid adenocarcinoma,EA),以及子宫内膜增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生组织各10例,子宫内膜上皮内瘤变(Endometrial intraepithelial neoplasia,EIN) 20例,用免疫组织化学Elivision法检测这些病变组织中p57KIP2蛋白的表达情况.结果 p57KIP2蛋白在EA、子宫内膜增生期、分泌期、单纯性增生、复杂性增生、EIN组织中的阳性表达率分别为26.00％、0.00％、60.00％、0.00％、10.00％、40.00％.p57KIP2蛋白在EA组织中的阳性表达与在分泌期组织中的阳性表达比较,在分泌期组织中的阳性表达与在复杂性增生中的阳性表达比较,差异均有显著性(P＜0.05);在EA中,p57KIP2蛋白的阳性表达与组织学分级有关(P＜0.05),与年龄大小、盆腔淋巴结有无转移等无关(P＞0.05).结论 p57KIP2参与了子宫内膜癌的发生发展过程.     

胆囊癌组织中p57KIP2、cyclin D1和cyclin E的表达及临床意义

背景与目的：原发性胆囊癌（primary carcinoma of the gallbladder,PCG）是死亡率极高的恶性肿瘤,其恶变的机制目前尚未明确。前期研究发现,p57^KIP2在人类多种恶性肿瘤中异常表达。本研究拟进一步探讨p57^KIP2在PCG组织中的表达及临床意义。方法：运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）、免疫组织化学EliVision法分别检测60例PCG、20例胆囊腺瘤（adenoma of the gallbladder,AG）和20例慢性胆囊炎（chronic cholecystitis,CC）组织中p57^KIP2、cyclin D1、cyclin E mRNA表达及蛋白水平。结果：p57^KIP2 mRNA及蛋白在PCG、AG和CC中的表达逐渐升高,两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。Cyclin D1、cyclin E mRNA及蛋白在PCG、AG和CC中的表达逐渐降低,PCG与AG比较、PCG与CC比较,差异有统计学意义（P<0.05）。在PCG组织中,p57^KIP2蛋白的表达与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关（P<0.05）。Cyclin D1蛋白的表达与临床分期有关(P<0.05)。p57^KIP2与cyclin D1的表达呈负相关（P<0.05）,p57^KIP2与cyclin E的表达呈负相关（P<0.05）,cyclin D1与cyclin E的表达呈正相关（P<0.05）。结论：p57^KIP2表达的降低与cyclin D1、cyclin E表达的增加可能是PCG的发生机制之一;检测p57^KIP2、cyclin D1及cyclin E对PCG的预后判断有重要意义。     

人子宫内膜癌中p57 kip2、Cyclin D1的表达及意义

目的：探讨p57 kip2、Cyclin D1在人子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法选取子宫内膜样腺癌( endometrioid adenocar-cinoma, EA)100例、子宫内膜上皮内瘤变(endometrial intraepithelial neoplasia, EIN)20例、子宫内膜增生性病变20例、增生期子宫内膜组织20例;选取不同子宫内膜细胞[高分化子宫内膜癌细胞( Ishikawa)、中分化子宫内膜癌细胞( JEC)、低分化子宫内膜癌细胞(KLE)及正常子宫内膜细胞(ESC)]进行细胞培养。应用免疫组化EliVision法检测不同子宫内膜组织中p57kip2、Cyclin D1蛋白的表达;Western blot法检测不同子宫内膜细胞中p57 kip2、Cyclin D1蛋白的表达。结果 p57 kip2蛋白在EIN组织中表达最高,在增生期子宫内膜、EA、子宫内膜增生性病变组织中表达逐渐降低,子宫内膜增生性病变与EIN组织中p57 kip2蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。 Cyclin D1蛋白在EA组织中表达最高,在增生期子宫内膜组织中表达最低,在子宫内膜增生性病变组织、EIN组织中表达依次增高,差异均有显著性( P<0.01)。 p57 kip2、Cyclin D1蛋白在EA组织中的表达随着组织学分级的增高呈依次递减趋势,但仅p57 kip2蛋白表达和组织学分级有关( P<0.05)。 p57 kip2蛋白在KLE中表达最高,在ESC中表达最低,两组相比差异有显著性( P<0.05);Cyclin D1在JEC、Ishikawa中的表达高于ESC,差异均有显著性( P<0.05)。结论 p57kip2、Cyclin D1均参与子宫内膜癌的发生、发展。 Cyclin D1表达是子宫内膜癌发生的早期事件,可能还存在异常合成的p57 kip2蛋白,其协同Cyclin D1促进子宫内膜的恶性转化。联合检测p57 kip2、Cyclin D1在子宫内膜癌中的表达,对预测子宫内膜癌患者预后有一定的临床意义。