富马酸二甲酯对急性T淋巴细胞白血病影响的研究

目的:探讨富马酸二甲酯(DMF)对急性T淋巴细胞白血病的影响及潜在的作用机制,为临床治疗急性T淋巴细胞白血病提供实验基础和理论依据.方法:用不同浓度DMF处理Jurkat细胞24 h,然后采用流式细胞术检测Ki67+的Jurkat细胞比例和绝对计数;同时采用Western blot方法检测DMF处理24 h之后,Jur...     

T2N0M0三阴性乳腺癌患者复发的危险因素及不同局部治疗方案对预后的影响

[目的]探讨T₂N₀M₀三阴性乳腺癌(TNBC)患者复发的危险因素及不同局部治疗方案对预后的影响。[方法]采用回顾性病例分析方法，收集了167例T₂N₀M₀TNBC患者的临床病理资料并随访，其中101例患者接受乳房切除术，66例患者接受保乳手术和放疗，采用Kaplan-Meier法计算和绘制生存曲线，采用Cox比例风险回归模型对预后进行分析。[结果]患者中位随访时间为55个月。乳房切除术组和保乳术+放疗组的5年无局部复发生存(LRRFS)率分别为77.22%、93.90%(χ²=4.573,P=0.032),5年无病生存(DFS)率分别为69.30%、84.80%(χ²=3.981,P=0.046),5年总生存(OS)率分别为88.10%、89.40%(χ²=0.035,P=0.852)。Kaplan-Meier生存曲线提示保乳术+放疗组患者疾病进展主要出现在术后前2年，而乳房切除术组患者疾...     

沉默Ku70后PARP1参与DNA双链断裂修复

目的研究碱基切除修复途径(base excision repair,BER)关键因子PARP1在Ku70缺失的条件下是否参加DNA双链断裂(double-strand break,DSB)的修复。方法针对人类Ku70构建编码shRNA序列的重组表达载体并转染细胞,建立Ku70蛋白表达沉默的细胞株。以高效的DNA双链断裂诱导剂刺孢霉素calicheamycin诱导DSB形成,在Ku70沉默或联合PARP1抑制剂条件下,通过结晶紫染色法检测DSB对细胞存活率的影响,以及Western blot检测H2AX的磷酸化状态。根据与染色质相互作用的差别,分段提取细胞蛋白组分,Western blot检测PARP1在各组分的分布变化。结果细胞Ku70蛋白水平在Ku70 shRNA干扰后显著下调。Ku70沉默和PARP1抑制剂明显降低细胞在calicheamycin处理后的存活率(P<0.01),两者有明显协同效应。在Ku70沉默的细胞诱导DSB后,PARP1主要分布在与染色质紧密结合的组分。结论在Ku70缺陷时,PARP1可与染色质结合,且抑制其功能影响细胞生存,说明PARP1可能参与了不依赖于Ku的DNA双链断裂修复的替代途径。     

剪切波弹性成像技术评价颈动脉斑块易损性

【摘要】目的：探讨超声剪切波弹性成像技术对颈动脉斑块易损性的诊断价值。方法：76例颈动脉斑块患者共检出斑块94个。所有患者行常规超声、超声增强和剪切波弹性成像检查,测量斑块的杨氏模量值（包括平均值、最小值和最大值）,评估斑块的强化程度,根据二维超声和超声增强表现评估斑块的风险等级。结果：76例中,颈动脉常规超声检出94个斑块,其中软斑块43个,混合斑块35个,硬斑块16个。随着斑块硬度增加,斑块的杨氏模量（YM）值增加,三组斑块间YM平均值、最小值和最大值的差异均有统计学意义（F=296.28、259.09、252.81,P均<0.05）。超声增强显示Ⅰ级斑块13个,Ⅱ级斑块18个,Ⅲ级斑块21个,Ⅳ级斑块42个;随着强化程度的增加,斑块的YM值降低,不同强化程度之间斑块的YM平均值、最小值和最大值的差异均具有统计学意义（F=158.74、143.76、155.00,P均<0.05）。超声检查评估为低风险斑块30个,高风险斑块64个,两组斑块的YM平均值、最小值和最大值的差异均具有统计学意义（t=13.86、11.93、13.31,P均<0.05）,低风险斑块的杨氏模量值高于高风险斑块。结论：应用超声剪切波弹性成像技术可以较准确的评估颈动脉斑块的类型,在一定程度上可反映斑块内新生血管的数量,评估斑块风险等级,有助于更全面地评估颈动脉斑块的性质。     

沉默Ku70促进PARP1、ligase3和XRCC1在DNA双链断裂染色质聚集

目的 研究碱基切除修复途径(base excision repair,BER)关键因子PARP1、ligase3和XRCC1在Ku70缺失的条件下与DNA双链断裂(double-strand break,DSB)所在染色质的结合及抑制PARP1所产生的影响.方法 采用可经药物诱导Ku70 shRNA的细胞株,以高效的D...     

下调Ku70促进DDB1/2在双链断裂DNA聚集

目的 探讨DNA损伤结合蛋白DDB 1/2复合物在Ku70缺失的条件下与双链断裂DNA(double-strand breaks,DSB)亲和力的变化及下调DDB1对DSB修复的影响.方法 针对人类Ku70构建编码shRNA序列的重组腺病毒并感染细胞,建立Ku70蛋白表达沉默的细胞株,以博来霉素(bleomycin,Bleo)或新制癌菌素(neocarzinostatin,Ncs)诱导DNA双链断裂,利用DNA损伤修复蛋白与损伤染色质的高亲和力,分段提取细胞蛋白组分,Western blot检测DDB1/2在各组分的分布变化.免疫荧光检测诱导DNA双链断裂前后DDB1与损伤染色质亲和力的变化.沉默DDB1,Western blot检测在不同条件下γ-H2AX的去磷酸化效率.结果 人乳腺癌MDA-MB-231细胞Ku70蛋白水平在Ku70shRNA重组腺病毒感染后4d显著下调,6d达到最低.与Ku70正常细胞相比,在Ku70沉默后诱导DSB,Western blot检测结果显示DDB1/2主要分布在与染色质紧密结合的组分,免疫荧光同样表现出其与染色质亲和力增高.并且在Ku缺失的条件下,Western blot显示下调DDB1能显著降低γ-H2AX去磷酸化效率(P＜0.01).结论 下调Ku70可促进DDB1/2在双链断裂DNA聚集,且下调DDB1影响DSB修复,说明DDB1/2可能参与了不依赖于Ku的双链断裂的修复途径.     

无创心肌做功评价肺动脉高压患者右室功能的价值

目的 探究无创心肌做功(MW)技术评估肺动脉高压(PH)患者右室功能的价值。方法 选取PH患者112例为病例组,根据肺动脉收缩压(PASP)分为轻度组33例、中度组45例、重度组34例,同时选取健康志愿者44例为对照组。测量常规超声心动图参数,用无创性心肌做功技术获取右室心肌做功(RVMW)参数,包括右室整体做功指数(RVGWI)、右室整体有用功 (RVGCW)、右室整体无用功(RVGWW)、右室整体做功效率(RVGWE)。比较四组间各参数差异,同时分析右室心肌做功(RVMW)参数与常规超声右室功能参数间的相关性。结果 RVGWI、RVGCW及RVGWW随PASP增加逐渐增高,而RVGWE随PASP增加逐渐减低。RVGWI、RVGCW在各组间差异均具有统计学意义(P均<0.05)。与其余三组相比,RVGWE在重度组表现出明显降低(P均<0.05)。RVMW与常规超声右室功能参数间存在相关性(P均<0.01)。结论 无创RVMW可定量评估不同程度PH患者的右室功能。