固定后保存于缓冲液的人肝材料ATP酶活性的光电镜枸橼酸铅法的改良

肝脏是人体消化,解毒,免疫,代谢的重要器官。近年来肝癌、肝硬化、肝炎等各种肝脏疾病严重影响人们的生理和生存。ATP酶是肝脏的重要功能酶之一,对肝脏ATP酶的研究,有助于对肝脏的了解。以往关于酶组化研究方法的报导,几乎无1例不是要求取新鲜材料。而对固定后保存于缓冲液内的材料的酶活性存在时间的研究甚少,为解决这一问题,我们对固定后保存于缓冲液内的人肝材料的ATP酶活性应用枸橼酸铅法的改良法进行光电镜的系列实验探讨。     

丁基苯酞对帕金森模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响

目的研究丁基苯酞(dl-3n-butylphthalide,NBP)对由MPTP诱导的C57BL/6小鼠帕金森模型中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响,进一步探讨其保护机制。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分成3组:正常对照组,MPTP组,NBP治疗组。MPTP腹腔注射法制备帕金森模型,免疫组织化学法观察中脑黑质TH阳性神经元细胞数,蛋白质印迹法观察中脑黑质TH、TNF-α蛋白含量的变化。结果 (1)与正常对照组比较,MPTP组可见帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元明显减少(P0.01);与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元数目明显增加(P0.01);(2)与正常对照组比较,MPTP组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达减少(P0.01),而TNF-α蛋白表达增加(P0.05);(3)与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达明显增加(P0.01),而TNF-α蛋白表达减少(P0.05)。结论丁基苯酞可能通过提高中脑黑质中TH的含量及减少TNF-α炎性介质表达发挥对MPTP所致C57BL/6小鼠帕金森模型的神经元保护作用。     

胰岛淀粉样多肽对高糖刺激下INS-1细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的探讨高糖刺激下转染过表达人胰岛淀粉样多肽基因的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)细胞凋亡的影响及其相关基因表达。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测高糖刺激后INS-1及转染人胰岛淀粉样多肽的INS-1细胞(h IAPP/INS-1)上清液的胰岛素水平;利用Hoechst33258染色检测细胞凋亡百分率;采用RTPCR方法检测高糖刺激培养后的Bcl2、Bax m RNA的水平。结果高糖刺激下,与未转染人胰岛淀粉样多肽INS-1细胞相比较,h IAPP/INS-1细胞胰岛素分泌功能显著下降,凋亡细胞比例明显增加,抗凋亡基因Bcl2 m RNA表达水平下调,促凋亡基因Bax m RNA表达水平上调,Bcl2/Bax比例明显降低。结论人胰岛淀粉样多肽上调促凋亡基因表达和抑制抗凋亡基因表达可能与糖尿病的发生发展相关。     

低粘度Spurr树脂包埋剂在TEM生物样品制备过程中的应用

Spurr等人推荐使用一种低粘度的环氧树脂包埋剂,并通过对植物的根、果实等进行包埋及超薄切片,指出这是一种良好的植物样品包埋剂,此后一些文献将这种包埋剂称为Spurr树脂包埋剂。我室     

锌离子与锌转运体6在APP/PS1转基因小鼠小脑内的分布

 目的 研究游离锌离子和锌转运体6（zinc transporter 6,ZnT6）在APP/PS1转基因小鼠小脑内的分布。方法 应用浸入式金属自显影技术（AMG）和免疫组织化学染色标记游离锌离子、ZnT6和淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein,AYY）,通过免疫荧光染色和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT6和β-淀粉样蛋白（β-amyloid,Aβ）在老年斑内的定位,并分析锌离子、ZnT6与APP和Aβ分布的相关性。结果 游离锌离子、ZnT6和APP免疫阳性反应产物均定位于老年斑内,老年斑主要分布于小脑分子层,浦肯野细胞层和颗粒层分布较少;ZnT6和Aβ荧光双标的结果进一步证实两者共存于老年斑内。结论 APP/PS1转基因小鼠小脑Aβ老年斑内有大量的ZnT6蛋白表达,并聚集着大量的锌离子,提示锌离子可能参与小脑Aβ老年斑的形成,而ZnT6在老年斑内锌离子的聚集过程中起着重要的调节作用。     

骨质疏松大鼠椎间盘的超微结构研究

目的:观察骨质疏松大鼠椎间盘中髓核组织的超微结构改变,探讨其发病机理.方法:6月龄雌性SD大鼠64只,实验组32只,行双侧卵巢切除术;对照组32只,行假手术.术后3个月两组分别以Prodigy骨密度仪作大鼠腰椎骨密度值(BMD)测定;同时分别处死5只大鼠,摘取子宫组织,进行病理学检查;术后3个月分别取两组大鼠L4-L5椎间盘,应用电镜技术,对取出的髓核组织进行超微结构观察.结果:术后3个月大鼠腰椎BMD,实验组和对照组之间有非常显著性的差异(P＜0.01);同时实验组子宫病理学检查和对照组比较,明显萎缩.证实骨质疏松模型建立的成功.电镜结果显示:(1)软骨细胞减少,多呈不同程度地退变、死亡,细胞外用致密颗粒增多.(2)胶原纤维发生不同程度的变性、融合、扭结或钙化,胶原纤维束间裂隙增大.(3)弹力纤维数量减少,伴老化、变性.结论:骨质疏松大鼠椎间盘都有不同程度的退变.     

锌转运体8与小鼠睾丸间质细胞睾酮生成相关

目的锌转运体8(ZnT8)与胰岛素等激素的分泌有关,但其在睾丸的功能尚不清楚,本实验旨在探讨ZnT8在小鼠睾丸的分布与功能。方法通过免疫组织化学技术检测成年雄性小鼠睾丸ZnT8的分布;乳鼠腹腔注射hCG(human chorionic gonadotrophin,人绒毛膜促性腺激素),注射5d后,检测乳鼠睾丸ZnT8的分布;化学发光法检测乳鼠血清睾酮水平。结果 ZNT8主要分布在成年雄鼠睾丸间质细胞,hCG处理乳鼠在血清睾酮升高的同时伴有睾丸间质细胞ZnT8表达增加。结论 ZnT8的功能可能与小鼠睾丸间质细胞睾酮合成有关。     

锌缺乏导致小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量减少

目的研究锌缺乏对小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量的影响。方法锌缺乏饲养小鼠5周后,应用ZnSe金属自显影技术对小鼠睾丸和附睾进行染色,观察睾丸和附睾锌离子的分布,同时计数附睾精子数量,并与对照组小鼠的精子数量做对比。结果缺锌喂养后的小鼠睾丸游离锌离子明显减少,并且睾丸生精小管管腔狭小,生殖细胞层厚度增加,此外,附睾精子数量也明显低于对照组。结论睾丸和附睾内游离锌离子减少是锌缺乏小鼠精子数量下降的原因,本结果有助于改善男性生殖健康的状况。     

神经生长因子与运动神经再生

神经生长因子是周围神经再生微环境中的重要物质成份之一，在神经再生过程中具有重要的生物学功能。近年来的研究表明，神经生长因子除可维持交感、感觉神经元的存活及促进其轴突生长外，对运动神经元也具有潜在的生物学效应。尤其是随着神经生长因子在运动神经轴突内逆行运输的证实，神经生长因子及其同族物质对运动神经元的营养作用、促进轴突再生作用及其作用机理的研究已引起国内外学者的重视。本文仅就神经生长因子与运动神经再生的研究现状进行综述，供同行参考。