进出口植物产品中对硫磷残留酶联免疫检测试剂盒的研制

目的采用间接竞争ELISA法对进出口植物产品中对硫磷残留量进行快速筛选。方法将对硫磷还原成氨基对硫磷,利用适当的方法将其与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,制备免疫原免疫家兔并获得特异性抗体。结果采用传统的盐析法提取特异性免疫球蛋白(IgG)并建立了对硫磷间接竞争ELISA快速检测方法。抑制试验表明其检测范围在(100.0±1.56)ng/mL之间,可用于进出口植物产品中对硫磷的定量检测。该方法与气相色谱检测符合率为96%。样品的平均回收率为103%。交叉反应显示该抗体仅与对硫磷、氨基对硫磷反应,而与甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、乐果等结构类似物几乎无交叉反应。结论本试剂盒具有操作简便、快速、灵敏等特点。     

EphA2表达水平与食管鳞癌临床病理特征关系研究

目的 分析不同临床病理特征食管鳞癌患者EphA2表达水平的差异,探讨血清中EphA2表达水平对食管鳞癌临床病理特征的评估价值。方法 收集2010-2012年新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科行手术治疗的食管鳞癌患者100例为研究对象。取得患者手术切除癌组织标本100例,同时取得远隔癌旁组织标本100例。食管鳞癌患者血清标本由新疆肿瘤防治研究所标本库提供,同时选择新疆医科大学附属肿瘤医院体检科的体检健康者血清60份。采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测EphA2 mRNA表达水平、Western blotting法检测EphA2表达水平、酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中EphA2表达水平。采用SPSS 16.0统计学软件绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）并计算曲线下面积。结果 癌组织中EphA2 mRNA表达水平高于远隔癌旁组织（t=17.964,P＜0.05）。癌组织中EphA2表达水平高于远隔癌旁组织（t=12.100,P＜0.05）。食管鳞癌患者血清中EphA2表达水平高于体检健康者（t′=18.240,P＜0.05）。Ⅰ期+ⅡA期食管鳞癌患者癌组织EphA2 mRNA表达水平、EphA2表达水平及血清中EphA2表达水平均低于ⅡB期+Ⅲ期食管鳞癌患者（P＜0.05）。有淋巴结转移食管鳞癌患者癌组织EphA2 mRNA表达水平、EphA2表达水平高于无淋巴结转移食管鳞癌患者（P＜0.05）。T1期+T2期食管鳞癌患者癌组织EphA2 mRNA表达水平、EphA2表达水平及血清中EphA2表达水平均低于T3期+T4期食管鳞癌患者（P＜0.05）。血清中EphA2表达水平评估食管鳞癌TNM分期的ROC曲线下面积为0.646,95%CI（0.532,0.761）,最佳截断值为50.17 ng/L,灵敏度为69.0%,特异度为61.0%;血清中EphA2表达水平评估食管鳞癌浸润深度的ROC曲线下面积为0.650,95%CI（0.528,0.772）,最佳截断值为53.93 ng/L,灵敏度为73.0%,特异度为57.0%。结论 EphA2表达水平与食管鳞癌的发生发展及转移浸润有关,其在血清中的表达水平对术前疾病分期及浸润深度有一定的评估价值。     

血清中CD44v5及c-met检测对食管鳞癌高危人群的筛检价值

目的:检测食管鳞癌患者CD44v5及c-met表达情况,并分析其在癌组织及癌旁组织的表达差异;探讨采用ELISA法检测两者在血清中含量用于食管鳞癌筛检的价值.方法:采用RT-PCR技术和Western-Blot法分别检测CD44v5及c-met基因在食管鳞癌组织及癌旁组织中的表达;并采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定CD44v5及c-met蛋白在100例食管鳞癌患者及60例健康体检者血清的含量.结果: CD44v5、c-met mRNA在食管鳞癌组织中IA值(0.737±0.116,0.748±0.122)高于相应癌旁食管组织(0.140±0.065,0.147±0.064),差异均具有统计学意义(P<0.01);CD44v5及c-met蛋白相对表达量在癌组织(1.099±0.230,1.054±0.227)中亦高于相应癌旁组织(0.265±0.105,0.245±0.097)(P<0.01);CD44v5蛋白在食管鳞癌患者血清中的含量[(31.308±10.123) μg/L]高于健康体检者[(19.364±1.680) μg/L],差异具有统计学意义(P<0.01),c-met蛋白在食管鳞癌患者血清中的含量[(101.183±15.335) μg/L]亦高于健康体检者[(56.165±8.979) μg/L](P<0.01).CD44v5与c-met在食管鳞癌患者血清中的含量具有相关性(r=0.880,P<0.01).ELISA法检测CD44v5、c-met、二者并联及串联诊断食管鳞癌的ROC曲线下面积分别为0.865、1.000、0.800及0.950,灵敏度分别为91.0%、99.0%、100.0%、90.0%,特异度分别为60.0%、100.0%、60.0%、100.0%.结论:CD44v5与c-met的高表达与食管鳞癌的发生有关,二者具有相关性;ELISA法检测血清中c-met蛋白含量,并联合CD44v5蛋白检测,或许有助于在食管鳞癌高发地区对高危人群进行大规模筛检.     

微小RNA对树突状细胞功能的影响及在脓毒症中的作用

微小RNA是一种进化上高度保守的非编码RNA,主要通过抑制蛋白质的翻译来调控基因表达进而影响细胞的命运及功能。众多资料表明miRNAs 可调控免疫细胞的分化、功能及凋亡进而维持机体的免疫平衡。树突状细胞作为重要的抗原提成细胞,其功能及数量的改变在脓毒症的免疫紊乱中具有重要作用。本文将主要综述miRNAs 对树突状细胞免疫功能及凋亡的影响及在脓毒症中的潜在作用。