人白介素24单克隆抗体的制备与鉴定

目的：制备抗白细胞介素24（Interleukin 24,IL-24）的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法：应用分子生物学技术,构建含人IL-24编码序列的原核表达载体,表达并纯化了人IL-24融合蛋白。用纯化人IL-24融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,采用免疫印迹及免疫组化染色对抗体的特异性进行了鉴定。结果：获得3株能稳定分泌抗IL-24单抗的杂交瘤细胞,分别命名为1G2,3F4,4A6。通过免疫印迹及免疫组化染色检测显示,这3株单抗均能够与IL-24特异性结合。结论：成功制备抗IL-24单克隆抗体,为进一步探索IL-24在抗肿瘤中的作用机制奠定了基础。     

携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合腺病毒载体Ad5/11的构建及其体外实验研究

目的:构建携带报告基因eGFP及人内皮他丁en-dostatin-K5的嵌合型腺病毒载体ADS/11.方法:采用重叠PCR及在细菌E coil.BJ5183中同源重组的方法,获得表达eGFP报告基因的嵌合腺病毒骨架载体,然后以经Pac Ⅰ线性化的嵌合腺病毒载体骨架与Pac Ⅰ线性化的表达endostatin-K5的腺病毒E1穿梭载体共转染真核细胞HEK 293细胞中获得携带报告基因eGFP及人endostatin.K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP.以获得的嵌合型腺病毒载体感染U87MG细胞,在荧光显微镜观察eGFP的表达,采用RT-PCR检测endostatin-K5的表达;将所构建的嵌合病毒载体ADS/11-E1-CMV-endo-KS/E3-CMV-eGFP与未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP在体外感染人胶质瘤细胞系A172及乳腺癌细胞系MDA-MB-231;通过荧光蛋白eG-FP的表达,比较它们对以上肿瘤细胞的感染效率.结果:嵌合病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP可成功地表达eGFP及endostafin-K5.以经过修饰的嵌合型腺病毒载体AdS/11-E1-CMV-endo-KS/E3-CMV-eGFP感染人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的感染效率,明显高于对照未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP.结论:携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合型腺病毒载体ADS/11,可明显提高对人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的感染效率.     

人白介素24单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗白细胞介素24(Interleukin 24,IL-24)的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法:应用分子生物学技术,构建含人IL-24编码序列的原核表达载体,表达并纯化了人IL-24融合蛋白。用纯化人IL-24融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,采用免疫印迹及免疫组化染色对抗体的特异性进行了鉴定。结果:获得3株能稳定分泌抗IL-24单抗的杂交瘤细胞,分别命名为1G2,3F4,4A6。通过免疫印迹及免疫组化染色检测显示,这3株单抗均能够与IL-24特异性结合。结论:成功制备抗IL-24单克隆抗体,为进一步探索IL-24在抗肿瘤中的作用机制奠定了基础。     

关于患者满意度评价失真探讨及应对

在一段时间内医院自己搞的患者满意度评价与社会、患者的评价大相径庭,本文从三个方面进行了剖析,并提出三个方面的应对措施,本文的结论是,开展患者满意度评价调研不仅是个方法问题,说到底是个指导思想问题.对于医院管理者而言,如果真想了解社会、患者对医疗服务的真实反映,就开展实实在在的调研吧.     

消化道肿瘤术后肠内营养与肠外营养联合治疗效果观察

目的观察分析消化道肿瘤术后肠内营养与肠外营养联合治疗的临床效果。方法选取2012年1月～2014年1月的180例消化道肿瘤手术患者,将患者随机分为A、B、c三组,A组55例,B组58例,C组67例。A组患者行肠内营养支持操作,B组行肠外营养支持操作,C组行肠内肠外联合的营养支持操作。对比分析三组患者术后住院时间、肛门排气时1＂3以及相关并发症发生情况。结果C组患者术后住院时间、肛门排气时间显著优于A、B二组（P〈0．05）,而A、B二组患者差异无统计学意义（P〉O．05）;此外,三组患者切口感染、尿路感染、导管相关感染、消化道出血等并发症出现率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论消化道肿瘤术后行肠内营养与肠外营养联合治疗是安全有效的,患者术后肠道功能恢复程度显著高于单纯的肠内或场外营养。     

连续计数法血小板功能检测的方法学评价及质量控制研究进展

血栓性疾病是临床多发病，抗血小板药物是预防及治疗血栓性疾病的重要手段。随着抗血小板药的广泛应用，用药过量导致患者出血事件的发生率逐年增高。通过血小板功能检测来评估用药效果、指导临床用药，可明显降低临床出血不良事件的发生率。连续计数法血小板功能检测是近年来开展的一项评价血小板聚集功能的新技术，无需离心，也无需提取贫、富血小板血浆等手工操作，可实现全血标本、全流程自动化检测需求。与其他传统血小板功能检测实验相比，具有操作简单、干扰因素少、自动化程度高、真正模拟体内全血环境等优势；但也有不足，如红细胞碎片影响血小板计数，采用固定时间点检测血小板数量，而非连续线性监测影响实验稳定性等。本综述将连续计数法与其他血小板功能检测方法进行比较，分析各自优势与不足，并对检测过程中的影响因素进行具体分析，提出优化方案与质量改进措施。